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ether-a-go-go相关基因通道在胰岛β-细胞中的作用

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首都医科大学学报 2019年第1期40卷 40-44页

作者：赵苗妙元沙沙李奇卢晶黄海霞杨金奎首都医科大学附属北京同仁医院内分泌科北京100730 糖尿病防治研究北京市重点实验室北京100730 北京市糖尿病研究所北京100730 首都医科大学附属北京潞河医院内分泌科北京101149 首都医科大学基础医学院生理与病理生理学系北京100069 首都医科大学代谢紊乱相关心血管疾病北京市重点实验室北京100069

目的探究ether-a-go-go相关基因(ether-a-go-go related gene,ERG)通道在胰岛β-细胞中的作用。方法提取野生型(wild type,WT)与ERG基因敲除型(knockout,KO)小鼠胰岛β-细胞,利用全细胞膜片钳技术记录钾离子电流与动作电位,分析敲除ERG... 详细信息

目的探究ether-a-go-go相关基因(ether-a-go-go related gene,ERG)通道在胰岛β-细胞中的作用。方法提取野生型(wild type,WT)与ERG基因敲除型(knockout,KO)小鼠胰岛β-细胞,利用全细胞膜片钳技术记录钾离子电流与动作电位,分析敲除ERG基因后钾电流与动作电位的变化。对两组小鼠进行腹腔注射葡萄糖耐量实验,分析基因敲除后小鼠糖耐量的变化,探究ERG基因是否对体内血糖浓度有影响。结果在两组小鼠胰岛β-细胞中记录到的钾离子电流均呈现内向整流趋势,KO组钾离子电流明显减小,动作电位时程明显延长。动物实验中,KO组小鼠糖刺激2 h后血糖浓度较WT组显著降低。结论 ERG通道电流是胰岛β-细胞中钾离子电流的重要组成部分,可显著影响动作电位时程,进而影响体内血糖浓度。

关键词： ether-a-go-go相关基因胰岛β-细胞膜片钳血糖

胰岛β-细胞中端粒酶活性、端粒长度与血中胰岛素含量变化的研究

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现代实用医学 2008年第3期20卷 171-172页

作者：张更荣陈电容黎晶晶宁波大学医学院附属宁波第二医院浙江宁波315010 浙江医药高等专科学校浙江宁波315100

目的探讨1型糖尿病(TIDM)大鼠胰岛β-细胞中端粒酶活性、端粒长度变化及与胰岛素(Ins)分泌的关系,研究三者在TIDM发病机制中的作用。方法TIDM大鼠模型组与正常大鼠对照组各60只,同时分离提取胰岛β-细胞,采用改良TRAP法检测β-细胞端粒... 详细信息

目的探讨1型糖尿病(TIDM)大鼠胰岛β-细胞中端粒酶活性、端粒长度变化及与胰岛素(Ins)分泌的关系,研究三者在TIDM发病机制中的作用。方法TIDM大鼠模型组与正常大鼠对照组各60只,同时分离提取胰岛β-细胞,采用改良TRAP法检测β-细胞端粒酶活性;用southern blot法检测端粒长度;分别与对照组进行对比分析。测定TIDM组血清Ins含量并与端粒长度作相关分析。结果TIDM组胰岛β-细胞端粒酶活性显著高于正常对照组(P胰岛β-细胞端粒酶的活性、端粒长度与胰岛β-细胞合成、分泌Ins密切相关,提示端粒酶的活性与端粒长度可能在TIDM的发病机制中具有重要作用。

关键词：胰岛β-细胞端粒酶端粒胰岛素

1型糖尿病大鼠胰岛β-细胞中端粒酶活性、端粒长度变化与血中Ins含量关系的研究

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浙江检验医学 2008年第3期 9-10页

作者：张更荣陈电容黎晶晶宁波大学医学院附属宁波第二医院浙江医药高等专科学校

目的探讨1型糖尿病(T1DM)大鼠胰岛β-细胞端粒酶活性、端粒长度变化及与胰岛素(Ins)分泌的关系,研究三者在T1DM发病机制中的作用。方法T1DM大鼠模型组与正常大鼠对照组各60只,同时分离提取胰岛β-细胞,采用改良TRAP法检测β-细胞端粒酶... 详细信息

目的探讨1型糖尿病(T1DM)大鼠胰岛β-细胞端粒酶活性、端粒长度变化及与胰岛素(Ins)分泌的关系,研究三者在T1DM发病机制中的作用。方法T1DM大鼠模型组与正常大鼠对照组各60只,同时分离提取胰岛β-细胞,采用改良TRAP法检测β-细胞端粒酶活性;用Southern blot法检测端粒长度;分别与对照组进行对比分析。测定T1DM组血清Ins含量并与端粒长度作相关分析。结果T1DM组胰岛β-细胞端粒酶活性显著高于正常对照组(P胰岛β-细胞端粒酶的活性、端粒长度与胰岛β-细胞合成、分泌Ins密切相关,提示端粒酶的活性与端粒长度可能在T1DM的发病机制中具有重要作用。

关键词： 1型糖尿病大鼠胰岛β-细胞端粒酶端粒

严重烫伤内毒素血症大鼠胰岛β-细胞功能损害研究

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实验与检验医学 2008年第2期26卷 125-128,165页

作者：张宇晴王占科刘龙燕南昌大学医学院 2005年硕士研究生330006 南昌解放军第九四医院 330006 江西省肿瘤医院检验科 330006

目的探讨胰岛NF-кB基因表达对大鼠胰岛β-细胞胰岛素分泌功能免疫损伤的作用。方法制作12h、1d、3d、5d和7d组30%TBSAⅢ度烫伤内毒素血症大鼠模型,采用高糖钳夹技术检测大鼠胰岛在体内的功能状态,用胶原酶消化法分离出大鼠胰岛,观察其... 详细信息

目的探讨胰岛NF-кB基因表达对大鼠胰岛β-细胞胰岛素分泌功能免疫损伤的作用。方法制作12h、1d、3d、5d和7d组30%TBSAⅢ度烫伤内毒素血症大鼠模型,采用高糖钳夹技术检测大鼠胰岛在体内的功能状态,用胶原酶消化法分离出大鼠胰岛,观察其在体外的胰岛功能;并探讨胰岛功能变化与NF-кB基因表达的关系。结果烫伤12h和1d组大鼠血糖及血清胰岛素水平比正常组显著升高(P胰岛功能各时相点与正常组比较均明显受损(P胰岛体外功能呈显著负相关(P细胞功能损伤,NF-кB活化在胰岛β-细胞功能损伤中可能发挥着重要作用。

关键词：烫伤胰岛β-细胞核转录因子κB 功能

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胰岛β-细胞衰老与血糖异常

长春中医学院学报 1996年第3期12卷 38-38页

作者：勾敏慧罗晶王立敏长春中医学院 130021 长春市南关区医院

随着增龄,抗体血糖水平逐渐升高,糖耐量试验也出现改变。这无疑与胰岛β-细胞的功能活动有着密切关系。因此研究胰岛β-细胞的衰老变化,有助于了解老年性血糖异常的发生机制。1 胰岛数量、结构的增龄变化胰岛是胰腺的内分泌部,由四种... 详细信息

随着增龄,抗体血糖水平逐渐升高,糖耐量试验也出现改变。这无疑与胰岛β-细胞的功能活动有着密切关系。因此研究胰岛β-细胞的衰老变化,有助于了解老年性血糖异常的发生机制。1 胰岛数量、结构的增龄变化胰岛是胰腺的内分泌部,由四种分泌细胞组成,其中β-细胞占75％,因而胰岛的形态结构变化,同时反应出β-细胞的变化。在动物实验中出现这样的结果,即随着增龄胰岛的数目增加,在12月龄或更老的大鼠,显示特征性的胰岛数量、体积增加,在小鼠和人的研究中也得出类似的结果。在4～7月龄的成龄雌性鼠,胰岛的形态是椭圆形,有大小不同的直径,呈随意分布。

关键词：血糖异常老年人胰岛β-细胞衰老

严重烫伤内毒素血症大鼠胰岛β细胞功能不全与NF-κBp65基因表达相关性研究

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严重烫伤内毒素血症大鼠胰岛β细胞功能不全与NF-κBp65基因表达...

作者：张宇晴南昌大学

学位级别：硕士

目的:机体遭受创伤或手术后,存在创伤后高血糖,高血糖可促进感染和多器官功能不全综合征(multi-organ dysfunction syndrome,MODS)发生与发展,预后不良。胰岛β细胞在葡萄糖代谢中发挥着重要作用。研究创伤后胰岛β细胞功能及其免疫损... 详细信息

目的:机体遭受创伤或手术后,存在创伤后高血糖,高血糖可促进感染和多器官功能不全综合征(multi-organ dysfunction syndrome,MODS)发生与发展,预后不良。胰岛β细胞在葡萄糖代谢中发挥着重要作用。研究创伤后胰岛β细胞功能及其免疫损伤机理非常重要。本研究以正常大鼠和严重烫伤内毒素血症大鼠为模型,运用高糖钳夹技术检测各组大鼠胰岛β细胞体内功能状态,用胶原酶消化法分离大鼠胰岛,观察体外胰岛β细胞功能;并观察严重烫伤内毒素血症大鼠胰腺组织核转录因子-кBP65(Nuclear transcription factor–κappaBP65, NF-кBP65)基因表达和血清炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)变化,以探讨胰岛组织NF-кBP65基因表达与胰岛功能不全的关系,及其可能存在的分子免疫损伤机制,为临床防治创伤性高血糖及其危害提供理论和实验依据。方法:选择普通级健康成年S(DSprague-Dawley)大鼠72只,体重250-300g,雌雄不限,将大鼠随机分为正常组(n=12),实验组(n=60),各组大鼠分笼饲养,自由获得鼠食和水。正常组大鼠不进行任何处理,实验组大鼠采用改进型Walker和Mason法制作30%体表面积(30%TBSA)III度烫伤模型,并2小时后腹腔注射内毒素。实验组大鼠于烫伤后12h﹑1d﹑3d﹑5d﹑7d和正常组大鼠分两组进行如下实验:1.正常组(n=6)和烫伤内毒素血症组各时相点(n=6)大鼠空腹状态采用颈动脉采血,离心收集血清于-70℃保存,用ELISA方法测TNF-α和IL-1β;并进行高糖钳夹技术,观察胰岛体内功能变化;2.正常组(n=6)和烫伤内毒素血症组各时相点(n=6)大鼠空腹状态取大鼠胰腺组织用于:⑴胶原酶消化法分离胰岛,采用葡萄糖和L-精氨酸刺激的胰岛素释放试验,观察体外胰岛功能;⑵10%福尔马林组织固定保存,分别做HE染色和免疫组织化学染色,观察胰腺组织胰岛结构变化,胰岛素(Ins)及NF-κBP65蛋白表达情况;⑶取胰腺组织匀浆,匀浆液离心后取上清液于-70℃保存,观察胰腺组织胰岛素含量变化。结果:1.严重烫伤内毒素血症大鼠模型建立情况⑴经病理切片证实,烫伤创面病变符合III度烫伤;⑵与正常组比较,实验组大鼠血糖和血清胰岛素于伤后均明显升高﹙p﹤0.05﹚。2.严重烫伤内毒素血症大鼠胰岛β细胞功能变化⑴稳态模式评估法胰岛素分泌指数(HOMA-β)和高糖钳夹技术检测胰岛β细胞体内功能表明,实验各组功能均低于正常组﹙p﹤0.05﹚;⑵原代分离胰岛检测胰岛体外功能表明,实验组大鼠与正常组比较胰岛功能下降﹙p﹤0.01﹚。3.胰腺组织匀浆液和Ins免疫组化观察胰腺组织胰岛素含量结果表明,与正常组比较,实验组大鼠均有升高﹙p﹤0.01或p胰岛体内功能也呈显著负相关﹙p﹤0.01或0.05﹚,NF-кB阳性率与胰岛体外功能呈显著负相关﹙p﹤0.01﹚。结论:1﹑严重烫伤内毒素血症大鼠存在胰岛β细胞功能不全;2﹑NF-кB基因过度表达及血清炎症因子升高在严重烫伤大鼠胰岛功能不全中可能发挥重要作用。

关键词：烫伤胰岛β-细胞功能不全核转录因子-κΒ 肿瘤坏死因子-α 白介素-1β

microRNA-375通过下调PSEN1的表达诱导胰岛β细胞凋亡

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医学分子生物学杂志 2018年第5期15卷 268-272页

作者：曹月陆丹丹常晓嫒李雅婷朱云霞南京医科大学江苏省人类功能基因组学重点实验室南京市211166

目的研究miR-375能否诱导胰岛β细胞凋亡并对其机制进行初步探索。方法在大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞中转染miR-375，运用流式细胞术检测INS-1细胞的凋亡情况。荧光素酶报告基因技术分析miR-375对Psenl的作用。Western印迹检测PSENl蛋白... 详细信息

目的研究miR-375能否诱导胰岛β细胞凋亡并对其机制进行初步探索。方法在大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞中转染miR-375，运用流式细胞术检测INS-1细胞的凋亡情况。荧光素酶报告基因技术分析miR-375对Psenl的作用。Western印迹检测PSENl蛋白的表达。Hoechst染色检测干扰PSENl对INS-1细胞凋亡的影响。结果过表达miR-375诱导INS-1细胞凋亡；miR-375能够抑制Psenl基因3’UTR荧光素酶活性；过表达miR-375抑制PSENl蛋白的表达，干扰miR-375能够增加PSEN1蛋白的表达：干扰PSEN1的表达能够诱导INS-1细胞凋亡。结论miR-375通过下调PSENl的蛋白表达进而诱导胰岛β细胞凋亡。

关键词： microRNA 凋亡胰岛β-细胞

Obestatin抑制胰岛 β -细胞钙通道电流

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Obestatin抑制胰岛 β -细胞钙通道电流

硫唑嘌呤对大鼠葡萄糖代谢和β细胞功能的影响

第八届海峡两岸心血管科学研讨会

作者：陶虹施劲松任安经袁文俊宁夏医科大学基础医学院生理学系

目的观察obestatin对胰岛β-细胞钙通道电流的影响。方法以培养的胰岛β-细胞为模型,利用穿孔全细胞膜片钳技术研究1、10、100 nM不同浓度的obestatin对细胞膜L-型电压敏感钙通道电流的影响。结果对照组（不含obestatin）、1、10、100 n... 详细信息

目的观察obestatin对胰岛β-细胞钙通道电流的影响。方法以培养的胰岛β-细胞为模型,利用穿孔全细胞膜片钳技术研究1、10、100 nM不同浓度的obestatin对细胞膜L-型电压敏感钙通道电流的影响。结果对照组（不含obestatin）、1、10、100 nM obestatin灌流5min后,统计膜电位为-20mV时的Icav峰值分别为给药前的（97±8）%、（91±7）%、（60±9）%和（45±6）%。其中,10和100nMobestatin作用5min后的Icav峰值与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01,n=5）。10nM obestatin灌流前-30、-20、-10和0 mV时Icav峰值分别为（-5.48±0.69）pA/pF、（-5.7±0.68）pA/pF、（-5.58±0.61）pA/pF和（3.90±0.44）pA/pF,灌流5min后峰值分别下降为（-3.11±0.68）pA/pF、（-3.60±0.99）pA/pF、（-3.26±1.03）pA/pF和（2.28±0.71）pA/pF,均低于给药前,差异有统计学意义（P＜0.01,n=5）。结论 obestatin可抑制胰岛β-细胞钙通道电流。

关键词：胰岛β-细胞电压依赖性L-型钙通道膜片钳

来源： cnki会议评论

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上海医学 1992年第7期15卷 405-407页

作者：顾明君方京冲何德华朱禧星钟学礼第二军医大学附属长征医院内分泌科上海医科大学附属华山医院糖尿病研究室

本研究观察了硫唑嘌呤对大鼠葡萄糖代谢和β细胞功能的影响。给Sprague-Dawley大鼠腹腔注射硫唑嘌呤5或15mg·kg^(-1)·d^(-1)8天,与对照组比较,结果不影响动物体重、血浆葡萄糖、胰岛素及果糖胺水平(P>0.05);但明显降低胰腺胰岛素含量... 详细信息

本研究观察了硫唑嘌呤对大鼠葡萄糖代谢和β细胞功能的影响。给Sprague-Dawley大鼠腹腔注射硫唑嘌呤5或15mg·kg^(-1)·d^(-1)8天,与对照组比较,结果不影响动物体重、血浆葡萄糖、胰岛素及果糖胺水平(P>0.05);但明显降低胰腺胰岛素含量和/或胰岛素释放(P<0.01)和<0.05)。

关键词：硫唑嘌呤胰岛β-细胞