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中国免疫学杂志 2016年第11期32卷 1703-1707,1710页

作者：滕永生庄园第三军医大学药学系微生物与生化药学教研室重庆400038

细胞通过细胞骨架来运动、极化、分化和维持多细胞组织形态。而肌动蛋白是构成细胞骨架的基石,它可以被超过100种的肌动蛋白结合蛋白（Actin binding proteins,ABPs）所不断地重构。

关键词：胞浆蛋白细胞骨架组织形态 Actin 免疫细胞乳腺癌细胞系巨噬细胞适应性免疫结构域固有免疫

丙酮酸、丙酮酸肌酸和肌酸对肉鸡肝脏胞浆蛋白/酶表达谱的影响

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畜牧与兽医 2012年第S1期44卷 182-183页

作者：陈娟王曼孔一力马海田南京农业大学农业部动物生理生化重点实验室江苏南京210095

选取雄性AA肉鸡为研究对象,探讨丙酮酸(Pyr)、丙酮酸肌酸(CrPyr)和肌酸(Cr)对肉鸡肝脏胞浆蛋白/酶表达的影响,拟从蛋白水平探讨Pyr,CrPyr和Cr调节肉鸡脂肪代谢和蛋白质代谢的机理。400羽1日龄雄性AA肉鸡随机分为4组,每组4个重复,每个重... 详细信息

选取雄性AA肉鸡为研究对象,探讨丙酮酸(Pyr)、丙酮酸肌酸(CrPyr)和肌酸(Cr)对肉鸡肝脏胞浆蛋白/酶表达的影响,拟从蛋白水平探讨Pyr,CrPyr和Cr调节肉鸡脂肪代谢和蛋白质代谢的机理。400羽1日龄雄性AA肉鸡随机分为4组,每组4个重复,每个重复25羽。按常规饲养方式饲喂至22日龄,对照组饲喂基础日粮,试验组分别于基础日粮中添加5%CrPyr。

关键词：胞浆蛋白丙酮酸脂肪代谢常规饲养肌酸蛋白质代谢差异蛋白差速离心法脂肪酸结合蛋白钙网织蛋白

一种改良的恶性疟原虫核蛋白和胞浆蛋白分离方法的建立

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中国病原生物学杂志 2013年第10期8卷 874-877页

作者：韩世通张青锋潘卫庆同济大学传染病与疫苗研究所上海200092

目的建立一种改良的恶性疟原虫核蛋白和胞浆蛋白分离方法，并对分离的蛋白组分进行分析和鉴定。方法分别用含不同盐浓度的裂解缓冲液和不同研磨次数提取核蛋白和胞浆蛋白，并利用针对不同组分特异性蛋白的抗体进行Westernblot，分析分... 详细信息

目的建立一种改良的恶性疟原虫核蛋白和胞浆蛋白分离方法，并对分离的蛋白组分进行分析和鉴定。方法分别用含不同盐浓度的裂解缓冲液和不同研磨次数提取核蛋白和胞浆蛋白，并利用针对不同组分特异性蛋白的抗体进行Westernblot，分析分离效果。结果含50mmol／LNaCl的裂解缓冲液和研磨100～150次为分离核蛋白和胞浆蛋白最佳条件，恶性疟原虫醛缩酶胞浆蛋白和组蛋白3核蛋白的抗体Westernblot、抗GFP抗体Westernblot及活细胞免疫荧光检测均表明该方法效果良好。结论建立了一种快速、有效的恶性疟原虫核蛋白和胞浆蛋白的分离方法（裂解液盐浓度为50mmol／L，研磨100150次），为研究恶性疟原虫蛋白的胞内分布以及蛋白质／蛋白质／核酸相互作用提供了重要的技术手段。

关键词：疟原虫,恶性核蛋白胞浆蛋白

基于胞浆蛋白增强信号的类花青素荧光分子探针研究

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基于胞浆蛋白增强信号的类花青素荧光分子探针研究

作者：文锡旦长沙理工大学

学位级别：硕士

化学生物传感的核心内容是有效获取生物体系内重要化学生物信息以探索各类化学反应过程与生命活动本质。而荧光探针作为化学生物传感技术的基石,由于其操作简单、灵敏度高、能够实时原位检测成像以及无损分析等特点,已日益成为化学、生... 详细信息

化学生物传感的核心内容是有效获取生物体系内重要化学生物信息以探索各类化学反应过程与生命活动本质。而荧光探针作为化学生物传感技术的基石,由于其操作简单、灵敏度高、能够实时原位检测成像以及无损分析等特点,已日益成为化学、生物、现代生命科学和临床医学等领域不可或缺的分子工具。但是,现有荧光探针绝大部分都是基于探针与分析物反应释放信号报告单元的信号输出模式,这种“一步式”信号输出模式荧光开启的信背比有限,难以实现复杂生物体系中低丰度物质的有效检测,因此发展适用于复杂环境中低丰度物质高灵敏检测的新型荧光探针具有十分重大的意义。本论文工作针对目前小分子荧光探针面对复杂环境中低丰度物质检测灵敏度不足的瓶颈问题,设计了一种借助细胞内固有高丰度物质——胞浆蛋白,对探针输出信号进行“放大”的策略,有效提高探针灵敏度,以解决低丰度物种检测的问题。同时,本论文中所提出的借助细胞内固有高丰度物质进行放大的策略具有通用性特征,可为小分子荧光探针在生物传感领域的进一步发展及应用提供新方法和新思路。基于此,本论文开展了以下具体工作:(1)受自然界中天然花青素染料的启发,通过一步合成法合成了稳定性好、近红外荧光发射、且易于修饰探针位点的类花青素荧光染料20种,并对所合成染料进行荧光性能考察,发现部分类花青素荧光染料在细胞裂解液体系中的荧光强度高于其在缓冲溶液中的情形,以PEF-16染料为例在细胞裂解液中的荧光强度相较于PBS中有6倍的荧光增强。而商业化荧光染料无此现象,使用三种不同细胞的细胞裂解液也具有相似的荧光增强效果。通过对细胞裂解液种各类常见组分的成分分析,确定胞浆蛋白为染料荧光强度的增强因子。并且探针在生理pH(3.0-11.0)条件下具有良好的荧光稳定性。筛选获得了适用于生物成像的“最优化”胞浆蛋白增强型染料PEF-16。(2)以筛选“最优化”胞浆蛋白增强型荧光染料PEF-16为荧光报告单元,设计并合成了基于该染料的H2S探针,同时以商业化的香豆素染料为荧光报告单元设计了具有相同反应位点的控制探针。探针在与目标物H2S发生反应后其叠氮基团被还原为氨基,即从叠氮化探针PEF-16-N3被还原为PEF-16荧光染料,荧光开启,与此同时,被还原的染料在胞浆蛋白存在的条件下,荧光信号被有进一步“放大”(4.12倍),从而实现对低浓度H2S的有效检测;而控制探针即使在有胞浆蛋白存在条件下,与目标物反应后其荧光开启效果也基本与PBS溶液中一致,表明本论文探针相对于其他H2S探针有显著区别。同时对探针的选择性、pH性能以及细胞毒性展开考察,均取得满意效果。随后,将探针用于细胞及组织成像,结果充分证明了该探针能利用细胞内的固有高丰度物质胞浆蛋白对输出信号进行进一步的放大,突破已有探针的“一步式”信号输出模式,有效提高探针的灵敏度,能实现对细胞及活体组织中低丰度H2S的有效检测。

关键词：信号放大胞浆蛋白类花青素荧光染料硫化氢

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牛副结核分枝杆菌特异性胞浆蛋白抗原的提纯

中国预防兽医学报 1989年第4期 44-46页

作者：赖平安韩有库北京农学院吉林农业大学导师

副结核分枝杆菌 C株胞浆蛋白经 Sepharose 4B和 Molselct CM-50柱分离提取出5种成份.进一步以ELISA 和 BA-ELISA 方法分析各成份的抗原性,并与三种分枝杆菌高免血清进行对比试验,结果认为 S ⅡCM①的抗原性为最好.

关键词：副结核分枝杆菌反应性胞浆蛋白结核分枝杆菌属沉积构造诊断血清阳性血清抗原性特异性

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编码线粒体蛋白与胞浆蛋白共用基因

医学分子生物学杂志 1988年第6期 278-280+275页

作者： Surguchov AP 王吉伟

作者提出"一个基因,两个多肽产物"的见解。指出单一胞核基因能产生"线粒体和胞浆共有蛋白"此种共用基因在转录和/或翻译起始部位不同,以及由于其前体通过线粒体膜运输时加工途径的不同,均可导致蛋白质分子结构的差异;因此,作者建议从分... 详细信息

作者提出"一个基因,两个多肽产物"的见解。指出单一胞核基因能产生"线粒体和胞浆共有蛋白"此种共用基因在转录和/或翻译起始部位不同,以及由于其前体通过线粒体膜运输时加工途径的不同,均可导致蛋白质分子结构的差异;因此,作者建议从分子遗传学角度检验胞核基因突变对其在两个细胞区域内产物特性的影响,对此基因的分子克隆、转录本及多肤产物进行结构分析,才能可靠地确定线粒体蛋白与胞浆蛋白的同源性。其以作者认为编码线粒体、胞浆型酶的孢核共用基因表达不同,负责协调双重定位蛋白的定位与生物合成。大量的证据表明,从同一基因的不同起始部位能转录出一个、二个或多个 mRNA。指出胞核基因具有双重编码能力。除产生一种胞浆产物外,还能直接合成线粒体产物,结果使发粒体特有的基因在进化过程中被删掉。最后作者提出:遗传学与生化学密切配合,对于鉴定与阐明共有蛋白将起决定性作用。

关键词：线粒体酶基因突变细胞点突变胞浆蛋白胞核编码基因

应用免疫转印技术分析副结核分枝杆菌胞浆蛋白的抗原性

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中国预防兽医学报 1988年第5期 38-41页

作者：赵新泰金泳厚延边农学院传染病室

应用免疫转印技术,着重对副结核菌P18株胞浆蛋白抗原性进行了分析,并比较了不同菌株P18、P10Tcps、316F、2E、Ⅱ(国际标准株)、P3、(吉林地方株)和8302(延边地区分离株)胞浆蛋白以及P18、P10株培养滤液中蛋白成份的抗原性;另外,对不同... 详细信息

应用免疫转印技术,着重对副结核菌P18株胞浆蛋白抗原性进行了分析,并比较了不同菌株P18、P10Tcps、316F、2E、Ⅱ(国际标准株)、P3、(吉林地方株)和8302(延边地区分离株)胞浆蛋白以及P18、P10株培养滤液中蛋白成份的抗原性;另外,对不同感染牛对副结核菌胞浆蛋白各组分的抗体应答反应性进行了比较。结果表明,P18株胞浆蛋白中的66.2～92.5、60.3、53.7、51.3、25.9～40.7、25.4和24.6Kd的蛋白质分子对S6号副结核阳性血清发生反应,其中以24.6Kd蛋白质分子的抗原性最强。不同菌株的胞浆蛋白和培养滤液蛋白具有相同的抗原性。不同感染牛对副结核菌胞浆蛋白抗原各组分的抗体应答反应不同。

关键词：抗原性胞浆蛋白蛋白带副结核菌副结核病

NOD1和NOD2：介导天然免疫的两种胞浆蛋白

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医学分子生物学杂志 2009年第3期6卷 265-268页

作者：石青李祥(综述) 刘金辉谢小梅(审阅) 南昌大学医学院微生物学教研室江西南昌市330006 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西南昌市330004

NOD1和NOD2是新发现的一类参与天然免疫的胞浆蛋白质家族—核苷酸结合寡聚域样受体（the nucleotide bindingolig omerization domain-like receptor，NLRs）中的两个重要蛋白受体，它们通过识别外源病原菌的模式抗原分子而激活NF-κB... 详细信息

NOD1和NOD2是新发现的一类参与天然免疫的胞浆蛋白质家族—核苷酸结合寡聚域样受体（the nucleotide bindingolig omerization domain-like receptor，NLRs）中的两个重要蛋白受体，它们通过识别外源病原菌的模式抗原分子而激活NF-κB等核转录因子，启动相关细胞因子的基因表达，释放炎性因子和抗菌肽等，其介导的信号通路在宿主抵御病原体感染的天然免疫中发挥着重要作用。

关键词： NOD1 NOD2 天然免疫胞浆蛋白

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牛分枝杆菌胞浆特异蛋白质抗原的制备和检测

中国畜禽传染病 1990年第3期12卷 39-40,46页

作者：汪广荫朴范泽卫广森曹殿军杨光胡晓红黑龙江八一农垦大学牧医系

将牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)S_(10)株苏通培养基培养物经低温高速离心、超声波裂解、Sephadex G200柱层析,获得三个峰,制备了三种胞浆蛋白抗原,经以ELISA与牛分枝杆菌阳性牛血清、阴性血清及各种分枝杆菌高免牛血清检测、并与牛... 详细信息

将牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)S_(10)株苏通培养基培养物经低温高速离心、超声波裂解、Sephadex G200柱层析,获得三个峰,制备了三种胞浆蛋白抗原,经以ELISA与牛分枝杆菌阳性牛血清、阴性血清及各种分枝杆菌高免牛血清检测、并与牛PPD、聚合OT等抗原作比较证明,以第二峰的胞浆蛋白抗原的特异性为最好。

关键词：牛分枝杆菌胞浆蛋白抗原检测

Ca_v1.2钙通道GST-CT1蛋白片段与胞浆钙调蛋白提取纯化的比较

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解剖科学进展 2016年第2期22卷 121-123页

作者：晏珊封瑞杨磊孙宇王千慧郭凤赵美眯孙雪菲郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110122 天津出入境检验检疫局工业品安全技术中心天津300308

目的对比分析心肌Ca_V1.2钙通道片段GST-CT1融合蛋白与胞浆钙调蛋白(calmodulin,CaM)提取与纯化方法的异同。方法将pGEX-6p-3/CT1和pGEX-6p-3/CaM重组质粒转入*** BL21菌株,筛选得到转化成功的菌株并用IPTG诱导其表达,GS-4B beads分离纯... 详细信息

目的对比分析心肌Ca_V1.2钙通道片段GST-CT1融合蛋白与胞浆钙调蛋白(calmodulin,CaM)提取与纯化方法的异同。方法将pGEX-6p-3/CT1和pGEX-6p-3/CaM重组质粒转入*** BL21菌株,筛选得到转化成功的菌株并用IPTG诱导其表达,GS-4B beads分离纯化,SDS-PAGE凝胶电泳鉴定目的蛋白及其相对纯度,Pull down assay方法鉴定GST-CT1融合蛋白和CaM蛋白的生物学活性。结果采用超声破碎法,应用N-laurylsarcosine和Triton X-100处理后提取的GST-CT1融合蛋白浓度和纯度显著高于未用两者处理的对照组,而N-laurylsarcosine和Triton X-100对胞浆蛋白CaM的提取和纯化无明显影响。结论细胞膜通道蛋白GST-CT1的提取和纯化方法与胞浆蛋白Ca M存在明显差别。

关键词：融合蛋白胞浆蛋白钙通道钙调蛋白