检索结果-南通市图书馆

国际检验医学杂志 2019年第9期40卷 1041-1044页

作者：米力坎木·哈司木努尔比亚·玉苏甫田刚新疆维吾尔自治区喀什地区第一人民医院药学部天津市公安医院检验科

目的探讨胞浆型磷脂酶A2γ(cPLa2γ)的表达在乳腺癌细胞迁移和侵袭能力变化中的潜在作用。方法 (1)采用免疫组织化学的方法检测cPLa2γ在乳腺癌组织中的表达。(2)应用StealthTM-RNAi技术,瞬时转染乳腺癌MDA-MB-231细胞而抑制cPLa2γ的表... 详细信息

目的探讨胞浆型磷脂酶A2γ(cPLa2γ)的表达在乳腺癌细胞迁移和侵袭能力变化中的潜在作用。方法 (1)采用免疫组织化学的方法检测cPLa2γ在乳腺癌组织中的表达。(2)应用StealthTM-RNAi技术,瞬时转染乳腺癌MDA-MB-231细胞而抑制cPLa2γ的表达,分别采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting技术检测cPLa2γ的信使RNA(mRNA)和蛋白的表达水平;通过划痕实验观察细胞迁移能力的变化;观察抑制cPLa2γ表达的MDA-MB-231细胞侵袭能力变化。(3)应用Western blot技术检测抑制cPLa2γ表达后,MDA-MB-231细胞在EGF刺激不同时间后Akt(Ser473和Thr308)、cofilin和PKCζ磷酸化水平变化。(4)稳定转染MDA-MB-231细胞而获得抑制cPLa2γ表达的克隆细胞。采用鼠尾静脉注射的方式将抑制cPLa2γ表达的稳定克隆MDA-MB-231细胞注入免疫缺陷的SCID小鼠体内,观察在不同的时间肿瘤细胞的被动转移情况。结果 (1)cPLa2γ在乳腺癌组织中表达与淋巴结转移相关。(2)瞬时转染MDA-MB-231细胞,和对照组相比cPLa2γ的mRNA和蛋白表达水平降低;迁移能力降低;同时MDA-MB-231细胞的侵袭能力降低。(3)与对照组相比,抑制cPLa2γ表达后的MDA-MB-231细胞Akt(Ser473和Thr308)、cofilin和PKCζ磷酸化表达水平均降低。(4)稳定转染MDA-MB-231细胞而获得抑制cPLa2γ表达的克隆,与对照组相比mRNA和蛋白表达水平明显降低;抑制cPLa2γ表达的乳腺癌MDA-MB-231细胞注入SCID小鼠的尾静脉,乳腺肿瘤细胞被动转移能力降低。结论 cPLa2γ参与EGF诱导的乳腺癌细胞的迁移和侵袭,其调控与Akt通路有关。

关键词： MDA-MB-231细胞胞浆型磷脂酶A2γ 抑制迁移侵袭

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