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八仙花杂交及受精胚珠培养研究

八仙花杂交及受精胚珠培养研究

作者：吴晓梦湖南农业大学

学位级别：硕士

杂交育种是目前培育八仙花（Hydrangea macrophylla）新品种的主要途径,但受杂交障碍的影响,育种进程缓慢。本研究以5个八仙花品种（‘初恋’、‘Coerulea’、‘铆钉’、‘无尽夏’和‘奥塔克萨’）和1个山绣球（H.macrophylla var.noma... 详细信息

杂交育种是目前培育八仙花（Hydrangea macrophylla）新品种的主要途径,但受杂交障碍的影响,育种进程缓慢。本研究以5个八仙花品种（‘初恋’、‘Coerulea’、‘铆钉’、‘无尽夏’和‘奥塔克萨’）和1个山绣球（H.macrophylla var.nomalis）品种（‘塔贝’）为杂交亲本进行杂交,研究了八仙花种内与种间杂交的杂交障碍和杂交果实生长发育规律,并建立了受精胚珠培养体系,以克服杂交障碍,获得杂交后代。主要研究结果如下:（1）通过花粉管生长行为观察、种实形成和种子萌发情况的统计,发现不同杂交组合存在的杂交障碍不同。‘初恋’×‘Coerulea’种内杂交的花粉在柱头大量萌发,花粉管生长正常,无明显胼胝质反应,表明不存在受精前障碍;种子在发育后期发生胚败育,种子发芽率极低且幼苗生长极其缓慢,表明受到了受精后障碍的影响。‘铆钉’×‘无尽夏’种内杂交的花粉在柱头上的萌发量少,花粉管生长异常,并出现大量胼胝质,表明受受精前障碍影响较大;虽有少量胚珠能成功受精,但无法正常发育,表明还存在受精后障碍。‘奥塔克萨’×‘塔贝’种间杂交的花粉在柱头大量萌发但萌发速度较慢,少数花粉管生长异常,但无明显胼胝质反应,且坐果率和果实膨大率较高,表明存在一定的受精前障碍,但受其影响较小;此外,饱满种子百分率较低,且种子发芽率极低,幼苗生长极其缓慢,存在较严重的受精后障碍。对杂交果实纵、横径进行测量并观察果皮颜色变化,结果表明,‘初恋’×‘Coerulea’杂交果实的生长曲线属于单S型,呈“慢-快-慢-停”的变化趋势;‘奥塔克萨’×‘塔贝’杂交果实的生长曲线属于单S型,呈“慢-快-慢”的变化趋势。（2）以60-100 d胚龄的受精胚珠为材料,观察了胚珠在各阶段的发育情况,并进行离体培养。结果表明,果实经70%乙醇溶液处理30 s后,次氯酸钠溶液（有效氯含量1%）处理10 min的消毒效果最佳;光照时间15 h·d和光照度2000-3000 lx的光暗交替条件有利于诱导胚珠萌发;胚珠在MS+1.5 mg·L 6-BA+0.2 mg·L NAA+1.5 mg·L GA培养基诱导效果最佳;‘初恋’×‘Coerulea’杂交组合的诱导效率随胚龄的增加呈逐渐升高的趋势,在100 d时达到最高;而‘奥塔克萨’×‘塔贝’杂交组合的诱导效率随胚龄的增加呈先升高后降低的趋势,在90 d时达到最高。诱导的幼苗在MS+0.1 mg·LNAA培养基进行壮苗效果最佳。

关键词：八仙花杂交育种花粉管杂交障碍胚珠培养

胚珠培养获得秘鲁番茄与栽培番茄种间杂种具有非温敏抗根结线虫基因Mi-3

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分子植物育种 2004年第6期2卷 833-838页

作者：赵泓柴敏于栓仓刘凡姜立纲毛爱军北京市农林科学院蔬菜研究中心北京100089

以含有Mi-3抗根结线虫基因的秘鲁番茄(Lycopersiconperuvianum)LA2823为父本,栽培番茄(Lycop-ersicon esculentum)高代优良自交系为母本,授粉后20～30d摘取幼果.将从幼果中分离出的直径大于2mm的胚珠放置在营养分化培养基上培养.2～4周... 详细信息

以含有Mi-3抗根结线虫基因的秘鲁番茄(Lycopersiconperuvianum)LA2823为父本,栽培番茄(Lycop-ersicon esculentum)高代优良自交系为母本,授粉后20～30d摘取幼果.将从幼果中分离出的直径大于2mm的胚珠放置在营养分化培养基上培养.2～4周后胚芽、胚根分别由两端伸出.培养的胚珠还可以通过体细胞胚发生途径产生胚芽.获得的种间杂种对根结线虫的抗性表型与野生种父本完全相同,在植物学性状上亦与其父本秘鲁番茄更相近.以栽培番茄为母本进行回交,成熟果实与母本相似,但其种子即使放置在MS培养基上也不能萌发.对回交种子胚败育现象进行了探讨.

关键词：胚珠培养秘鲁番茄栽培番茄种间杂种非温敏抗根结线虫基因种子胚败育现象

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杏胚珠培养及幼胚子叶不定芽诱导研究

果树学报 2007年第5期24卷 611-615,729页

作者：楚宗丽王力荣朱更瑞冯义彬方伟超中国农业科学院郑州果树研究所郑州450009

以盛花后25、35、50、55、60d的凯特杏胚珠为外植体,研究胚珠培养的适宜条件;选择发育一致的幼胚子叶,研究不定芽的发生条件。结果表明,SH培养基是凯特杏胚珠培养的适宜培养基;盛花后25d的凯特杏胚珠(PF=0),仅采用生长培养不足以发育成... 详细信息

以盛花后25、35、50、55、60d的凯特杏胚珠为外植体,研究胚珠培养的适宜条件;选择发育一致的幼胚子叶,研究不定芽的发生条件。结果表明,SH培养基是凯特杏胚珠培养的适宜培养基;盛花后25d的凯特杏胚珠(PF=0),仅采用生长培养不足以发育成可见胚,试验采用诱导方式获得了可见胚,诱导出胚率为80%;以MS为基本培养基,BA与NAA结合诱导能力强;但这种胚小且瘦弱,继续生长培养,利用幼胚子叶诱导不定芽。在幼胚子叶诱导不定芽方面,盛花后25、35d取样的凯特杏胚珠,培养后获得幼胚子叶,诱导不定芽的适宜TDZ质量浓度为1.25mg/L,诱导出芽率分别为85.00%、80.00%;盛花后50、55d取样的材料,适宜TDZ质量浓度为2.50mg/L,出芽率分别为65.00%、60.00%,而盛花后60d取样的材料,适宜TDZ质量浓度为5.0mg/L,出芽率为61.11%,不定芽主要发生在子叶的近轴面、胚轴连接处及子叶近轴端两侧;在相同培养基中,25℃进行21d暗培养,盛花后35、50、55、60d材料出芽率分别为72.22%、65.00%、60.00%、55.56%;4℃下28d暗培养,35、50、55、60d依次为59.09%,71.42%、77.78%、86.36%;对不定芽进行伸长、生根与快繁培养,获得了健康正常的植株。通过以上研究,建立了凯特杏幼胚4级培养体系,即(1)胚珠培养,获得可见胚(1级培养);(2)幼胚生长培养(胚培养),获得了健壮幼胚(2级培养);(3)幼胚子叶再生,获得不定芽(3级培养);(4)不定芽组培苗快繁(4级培养)。

关键词：杏胚珠培养幼胚子叶不定芽诱导

棉属(Gossypium)野生种与栽培种杂交胚珠培养研究

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中国农业科学 1992年第3期25卷 28-32+99页

作者：胡绍安尚富德中国农业科学院棉花研究所河南大学生物系河南安阳 455112

以陆地棉(G.hirsutum)做母本,分别与瑟伯氏棉(G.thurberi)和克劳茨基棉(G.klotzschianum)杂交,以陆地棉自交为对照,取杂交和自交授粉后二天的胚珠培养。研究结果表明,胚珠和纤维的生长在遗传型之间没有明显差异,而在培养基之间差异明显... 详细信息

以陆地棉(G.hirsutum)做母本,分别与瑟伯氏棉(G.thurberi)和克劳茨基棉(G.klotzschianum)杂交,以陆地棉自交为对照,取杂交和自交授粉后二天的胚珠培养。研究结果表明,胚珠和纤维的生长在遗传型之间没有明显差异,而在培养基之间差异明显。遗传型和培养基类型对成胚事都有明显影响。适当提高培养基中铵态氮与硝态氮之比,能提高成胚率。通过杂种胚珠培养,获得一定频率的正常杂种胚,并培养成杂种植株。为克服种间杂交不亲和性提供了成功的试验技术,同时探讨了种间杂交不亲和性的生理生化机理。

关键词：野生棉种间杂交胚珠培养

培养基、胚龄和激素配比对棉花胚珠离体培养纤维生长发育的影响

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棉花学报 2013年第1期25卷 17-23页

作者：叶春燕欧婷陈进红何秋伶祝水金浙江大学农业与生物技术学院杭州310058

为建立适合棉花胚珠离体培养纤维生长发育的实验体系,以中棉所49为材料,比较研究了培养基类型、激素种类和配比、胚龄等因素对棉花胚珠培养纤维生长发育的影响,以及棉花胚珠离体培养的基因型差异。结果表明:BT基本培养基较适合于棉花胚... 详细信息

为建立适合棉花胚珠离体培养纤维生长发育的实验体系,以中棉所49为材料,比较研究了培养基类型、激素种类和配比、胚龄等因素对棉花胚珠培养纤维生长发育的影响,以及棉花胚珠离体培养的基因型差异。结果表明:BT基本培养基较适合于棉花胚珠离体培养;液体培养和固体培养均能诱导棉花离体胚珠产生纤维,但液体培养效果优于固体培养;开花前后的胚珠均能诱导离体纤维的生长,但以开花当天的胚珠为外植体的效果最好。外源激素对于棉花胚珠离体培养纤维生长是必不可少的,GA3、IAA、NAA、Ethylene和BR均促进离体培养胚珠纤维的生长,且GA3效果最好;2种激素配合使用效果优于单一激素处理,其中5.0μmol.L-1I-AA+5.0μmol.L-1GA3激素配比效果最佳。棉花胚珠离体培养的纤维生长发育存在显著的基因型差异,不同棉花基因型的最适激素种类及配比具有一定的差异。

关键词：棉花纤维生长胚珠培养激素

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棉胚珠继代培养纤维体系的建立(英文)

作物学报 2001年第6期27卷 694-703页

作者：杨佑明徐楚年贾君镇中国农业大学作物学院北京100094 中国农业大学基础科学与技术学院北京100094

针对传统的棉胚珠培养方法因纤维在发育中途夭亡而不能用于研究次生壁增厚和强度形成的机理 ,本文建立了棉胚珠继代培养纤维体系 ,即根据花铃的形态特征选取类发育状态的胚珠作外植体 ,以 14d为周期连续 3次继代 ,在继代培养基中添加 ... 详细信息

针对传统的棉胚珠培养方法因纤维在发育中途夭亡而不能用于研究次生壁增厚和强度形成的机理 ,本文建立了棉胚珠继代培养纤维体系 ,即根据花铃的形态特征选取类发育状态的胚珠作外植体 ,以 14d为周期连续 3次继代 ,在继代培养基中添加 5 g· L-1活性碳 ,并根据纤维发育不同阶段的特点调整植物生长物质的种类和浓度。结果使纤维重现了植株条件下的发育历程 ,其比强度、长度和细胞壁厚度等品质指标达到或接近植株条件下发育的纤维。

关键词：棉花胚珠培养纤维发育纤维品质继代培养

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白木纳格葡萄败育型胚珠培养研究

新疆农业科学 2011年第7期48卷 1201-1204页

作者：夏培蓓伍新宇吴玉霞朱瑜陈新红阿尔孜古丽.卡斯木罗淑萍新疆农业大学农业生物技术重点实验室乌鲁木齐830052 新疆农业科学院园艺作物研究所乌鲁木齐830091 新疆农业大学林学与园艺学院乌鲁木齐830052 新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州农业技术推广中心新疆阿图什845350

【目的】研究白木纳格葡萄败育型胚珠离体培养的最优方案,为木纳格葡萄胚挽救育种技术的研究奠定基础。【方法】以花后不同天数的白木纳格葡萄败育型胚珠为试材,进行离体培养,研究接种时间、基本培养基种类I、BA浓度以及活性炭对胚珠发... 详细信息

【目的】研究白木纳格葡萄败育型胚珠离体培养的最优方案,为木纳格葡萄胚挽救育种技术的研究奠定基础。【方法】以花后不同天数的白木纳格葡萄败育型胚珠为试材,进行离体培养,研究接种时间、基本培养基种类I、BA浓度以及活性炭对胚珠发育率的影响。【结果】白木纳格葡萄败育型胚珠取样适宜期为DAF35至DAF40,离体培养后,胚珠发育率均可达到50%以上,其中DAF 40 d为最佳取样时间,胚珠发育率可达到61.07%。在IBA 1.5 mg/L,GA30.5 mg/L,蔗糖60 g/L,琼脂5 g/L,活性炭1 g/L的Nitsch培养基中,白木纳格葡萄败育型胚珠发育率最高。【结论】建立了适合白木纳格葡萄败育型胚珠培养体系。

关键词：白木纳格葡萄败育型胚珠胚珠培养

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猕猴桃种间远缘杂交胚珠培养

果树学报 2006年第4期23卷 620-622页

作者：陈绪中李丽张忠慧程中平黄宏文姜正旺王彦昌王圣梅中国科学院武汉植物园武汉430074

狗枣猕猴桃(Actinidiakolomikta)在远缘杂交过程中容易落果,无法获得杂交后代,针对这一问题以中科院武汉植物园猕猴桃资源圃中狗枣猕猴桃为母本,4倍体中华猕猴桃雄株(A.chinensis)为父本进行种间远缘杂交,授粉后29、45d小心剔取胚珠接... 详细信息

狗枣猕猴桃(Actinidiakolomikta)在远缘杂交过程中容易落果,无法获得杂交后代,针对这一问题以中科院武汉植物园猕猴桃资源圃中狗枣猕猴桃为母本,4倍体中华猕猴桃雄株(A.chinensis)为父本进行种间远缘杂交,授粉后29、45d小心剔取胚珠接种于培养基上,4℃条件下暗处理2周后转移至光下培养,每4周继代1次,当幼苗生长高度达3cm以上且根系发达时炼苗移栽。结果显示,培养基MS+GA30.2mg/L+NAA0.2mg/L+ZT1.0mg/L上,胚珠的萌发率最高,达到36.67%,在培养基MS+GA30.5mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA2.0mg/L上,幼苗长势好,而培养基1/2MS+IBA0.7mg/L对根系的发育具有良好的促进作用。

关键词：猕猴桃种间杂交胚珠培养

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不同供体材料对非洲菊胚珠离体培养的影响

植物生理学报 2015年第7期51卷 1151-1156页

作者：单芹丽王继华吴丽芳王丽花汪国鲜李绅崇杨春梅云南省农业科学院花卉研究所国家观赏园艺工程技术研究中心昆明650205 玉溪云星生物科技有限公司云南玉溪652604

以非洲菊胚珠为试材,研究供体材料的基因型、取材季节、发育时期和小花类型对胚珠培养的影响。结果表明:45个非洲菊基因型胚珠诱导培养90 d时,有29个基因型能诱导出不定芽,不定芽的诱导率超过10%的基因型仅有3个,不定芽诱导率最高达17.7... 详细信息

以非洲菊胚珠为试材,研究供体材料的基因型、取材季节、发育时期和小花类型对胚珠培养的影响。结果表明:45个非洲菊基因型胚珠诱导培养90 d时,有29个基因型能诱导出不定芽,不定芽的诱导率超过10%的基因型仅有3个,不定芽诱导率最高达17.7%。胚珠诱导不定芽的效果为:夏季>春季>秋季>冬季;非洲菊花药未吐粉前,花序越成熟,不定芽诱导率越高,诱导时间越短;舌状花的诱导效果略好于管状花。四因素对非洲菊不定芽诱导效果的主次关系是基因型>季节>发育时期>小花类型,基因型是决定非洲菊不定芽诱导效果的重要因素,小花类型对不定芽的诱导效果没有显著影响。

关键词：胚珠培养基因型季节发育时期小花类型