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荞麦种间可杂交性及品种间杂种F1产量与性状优势分析

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荞麦种间可杂交性及品种间杂种F1产量与性状优势分析

作者：宋莫凡西北农林科技大学

学位级别：硕士

栽培甜荞具有花柱异型的特点,在自然条件下自交不亲和,因此大大限制了栽培甜荞的产量。野生甜荞和苦荞为等花柱型荞麦,具有自交结实的特点。如果能通过杂交将野生甜荞和苦荞中的等花柱自交可育基因导入到栽培甜荞中,就能够大大提升栽培... 详细信息

栽培甜荞具有花柱异型的特点,在自然条件下自交不亲和,因此大大限制了栽培甜荞的产量。野生甜荞和苦荞为等花柱型荞麦,具有自交结实的特点。如果能通过杂交将野生甜荞和苦荞中的等花柱自交可育基因导入到栽培甜荞中,就能够大大提升栽培甜荞的产量。然而野生甜荞和苦荞为甜荞的远缘种,种间杂交由于亲本间的不亲和性等诸多原因,导致花粉管不能正常生长或杂种胚败育等障碍。本试验通过进行不同组合的栽培甜荞与野生荞麦及苦荞的种间杂交,观察结实率,选择出可杂交性强的杂交组合;通过荧光显微观察受精过程中花粉管的生长动态,探索荞麦种间杂交不亲和的机理;通过对杂交子房的离体培养,对即将夭亡的杂种胚进行胚拯救,并探索出合适的荞麦杂种胚胚拯救技术体系;同时,还对栽培甜荞品种间的杂种优势进行研究。研究旨在探讨荞麦远缘杂交的授粉结实机制、远缘杂交胚拯救技术以及杂种优势利用。研究得出以下结果:(1)44个杂交组合中只有定甜荞1号(长、短)×野生甜荞、北早生(长)×野生甜荞和TQ12-08(长)×野生甜荞4个杂交组合存在结实情况,占比9.1%,杂交结实率在11.8%-36.3%之间。其余组合均不能结实,能够结实的4个组合其父本都是野生甜荞,可以判断以栽培甜荞作为母本,以野生甜荞作为父本可能具有最强的可杂交性;重复授粉对栽培甜荞与野生甜荞的杂交授粉结实性的提高具有一定作用,但因组合而异。(2)以栽培甜荞为母本,以野生甜荞作父本的杂交组合杂交时,授粉后花粉管能够正常伸长并进入到胚囊内完成受精;其他苦荞材料作父本授粉后花粉管萌发后不久就会被抑制生长,只能延伸到大约花柱的1/3-1/2的位置。以栽培甜荞为母本,野生甜荞作父本时,虽然花粉管都能正常生长到胚囊内,但与不同母本间结实情况不同,表明荞麦远缘杂交具有受精前和受精后的不亲和性。不同的授粉方式中以栽培甜荞为母本,以苦荞(野生种或栽培种)为父本,重复授粉与授粉后1h用2,4-D处理柱头这两种方式作用不明显,花粉管没有更进一步生长;授粉前1h用2,4-D溶液处理柱头的方式能够使花粉管生长的更长,但依然不足以使花粉管伸长进入胚囊完成受精。(3)种间杂交后得到的杂种胚大多数都会夭亡,对即将夭亡的杂种胚进行胚拯救,最适宜的取外植体子房的时间为授粉后8d,最适宜的培养基成分为:MS+6.0mg/L6-BA+1.0mg/L IAA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;将定甜荞1号×野生甜荞杂交得到的杂种F1种子进行种植,成熟期观察植株形态及花器特征后,可以判定其为真杂种植株。(4)12个自交-杂交混合种(F1)在株高、主茎节数、主茎分枝、单株花簇数、千粒重等经济性状优势表现不同,相比较在一级分枝和千粒重性状上优势较大。在综合比较经济性状及产量表现后,选出西农9978×北早生、西农9976×北早生、TQ11-6×定甜荞1号、定甜荞1号×西农9978四个组合为强优势杂交组合。

关键词：荞麦种间杂交胚拯救杂种优势

甜瓜辐射花粉授粉诱导单倍体和孤雌生殖现象诱导初探

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甜瓜辐射花粉授粉诱导单倍体和孤雌生殖现象诱导初探

作者：王强南京农业大学

学位级别：硕士

单倍体材料的应用能够很大程度上缩短育种周期,自然界中自发产生单倍体的概率极低,而通过人工诱导的方式可以大大提高单倍体的发生概率。如果甜瓜中能够有一套完善的高效单倍体诱导技术则必将改变现有的育种方式,提高育种效率。因此,本... 详细信息

单倍体材料的应用能够很大程度上缩短育种周期,自然界中自发产生单倍体的概率极低,而通过人工诱导的方式可以大大提高单倍体的发生概率。如果甜瓜中能够有一套完善的高效单倍体诱导技术则必将改变现有的育种方式,提高育种效率。因此,本研究通过辐射花粉授粉诱导单倍体以及异源花粉和化学药剂诱导培育甜瓜再生种子的发生,以此来探索一个能够提高甜瓜单倍体发生频率的方法。主要研究结果如下:1.甜瓜辐射花粉授粉诱导单倍体研究本实验采用12种不同基因型甜瓜供试材料,使用60Coγ射线辐射源处理花粉结合胚拯救诱导甜瓜再生材料产生。实验结果显示,父母本的基因型和花粉的辐射剂量对坐果率和再生材料的产生有一定的影响。花粉辐射剂量为300Gy和500Gy,总体坐果率为27.5%和12.5%,从12种基因型中获得20份再生材料,再生材料获得率为0.41%,其中花皮菜瓜这一基因型效果最好,共获得7份再生材料。辐射剂量300Gy,诱导17份再生材料,其中单倍体材料4份,二倍体材料6份,混倍体材料4份和3份非整倍体材料,辐射剂量500Gy,获得3份再生材料,1份混倍体,2份未成活。2.甜瓜孤雌生殖现象诱导初探本试验采用黄瓜和甜瓜属野生种为异源花粉,诱导处理甜瓜,根据是否能够收获有活力的种子,考察是否能诱导甜瓜孤雌生殖。实验结果显示:授粉植物、甜瓜的基因型和化学药剂的种类对甜瓜结籽情况都有影响。从300个授粉后的子房中一共获得122个瓜和39颗饱满种子,不同授粉植物之间结籽情况不同,其中以野生植物A授粉‘HP-1’的效果最好,共获得了 23颗饱满种子;以坐果灵和细胞分裂素同时处理效果最好,共获得122个瓜和39颗饱满种子。饱满种子组培出苗后经流式细胞仪测定均为二倍体,实验未对非饱满种子进行胚拯救。本研究表明甜瓜可能可以通过孤雌生殖直接获得双单倍体的潜力。

关键词：甜瓜辐射花粉胚拯救化学药剂再生种子

疣粒野生稻与栽培稻远缘杂交及其杂种不育原因的探讨

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疣粒野生稻与栽培稻远缘杂交及其杂种不育原因的探讨

作者：李冬波华中农业大学

学位级别：硕士

水稻(Oryza sativa)是我国的主要粮食作物之一，它在世界粮食生产中同样也占有举足轻重的地位。目前我国水稻生产中存在遗传背景非常狭窄的问题，狭窄的遗传基础使水稻生产容易受到病虫害的影响，从长远来看，也不利于产量的进一步提高... 详细信息

水稻(Oryza sativa)是我国的主要粮食作物之一，它在世界粮食生产中同样也占有举足轻重的地位。目前我国水稻生产中存在遗传背景非常狭窄的问题，狭窄的遗传基础使水稻生产容易受到病虫害的影响，从长远来看，也不利于产量的进一步提高。白叶枯病是威胁我国水稻生产的三大病害之一，化学防治效果很差，选育抗病品种是最为经济有效的方法。我国水稻抗白叶枯病品种抗源单一，大面积种植单一抗源品种容易引起抗性“丧失”，因而寻找新的抗源显得十分重要。疣粒野生稻(Oryza meyeriana)是我国现有三种野生稻资源之一，它对白叶枯病接近免疫，同时抗稻瘟病、褐飞虱、螟虫并具有耐旱、耐荫等性状，是一种优异的种质资源。但是疣粒野生稻为GG基因组的野生稻，同栽培稻的亲缘关系很远，常规方法难以利用。为了把疣粒野生稻的优良基因导入栽培稻中，为进一步利用疣粒野生稻创造条件，本研究进行了远缘杂交的各种尝试，并对远缘杂交难以成功的原因进行了探讨，主要结果如下： 1．利用分布于12条染色体上的159对SSR引物分析了疣粒野生稻同栽培稻IR24的遗传多样性，发现其多态性很高，而且许多引物在疣粒野生稻中扩增条带很弱甚至没有扩增条带，表明其亲缘关系很远，遗传多样性很高。 2．为了克服远缘杂交不亲和及杂种天亡、不育，降低杂种后代的落粒性及促进杂种胚的发育，采用了广亲和品种杂交以及不同试剂在授粉后进行处理，比较了各种处理的效果;从消毒时间、渗透压等方面对胚拯救进行改进，但效果并不明显。最后利用常规胚拯救技术获得了BCF植株。 3．选取来自我国及国际水稻所的10种白叶枯菌对亲本、杂种F及回交后代BCF接种，进行抗性鉴定，发现F基本上是抗病亲本的抗病类型，可能是由1个或多个显性主效抗病基因控制;通过回交只得到一株BCF，它只抗其中几个病原菌株，推测所得BCF可能只有疣粒野生稻中的部分抗病基因。

关键词：疣粒野生稻远缘杂交胚拯救雄配子不育雌配子不育

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亚洲百合杂交育种研究

亚洲百合杂交育种研究

作者：焦雪辉北京林业大学

学位级别：硕士

目前国内百合杂交育种多是在野生种之间或野生种与栽培品种之间进行,而对品种间,尤其是亚洲百合品种间的杂交育种研究相对较少。本研究以亚洲百合和东方百合部分品种为亲本进行杂交,以期选育出综合两个品种系优良特点的新品种。此外,通... 详细信息

目前国内百合杂交育种多是在野生种之间或野生种与栽培品种之间进行,而对品种间,尤其是亚洲百合品种间的杂交育种研究相对较少。本研究以亚洲百合和东方百合部分品种为亲本进行杂交,以期选育出综合两个品种系优良特点的新品种。此外,通过百合系内及系间杂交,能在一定程度上反映不同品种之间的杂交亲和性,为进一步开展百合育种工作提供理论和实践依据。本研究主要包括花粉生活力的测定、杂交授粉、利用荧光显微技术观察花粉管的生长、杂交后代的培育和杂种鉴定,最终获得了5个杂种后代。通过试验,获得的主要结果如下： 1)利用正交试验设计,得出花粉萌发最佳培养液为蔗糖100g/L+H3BO3 40mg/L+CaCl21 Omg/L,用此培养液测得’Black Out 1106’、Detroit’、’Gironde’、’Loreto’、’Mount Duckling’、’Tresor’的花粉萌发率较高,其他品种花粉萌发率较低。 2)百合系内杂交亲和性比较好,多数组合能获得膨大的果实;百合系间杂交亲和性较差,虽然部分组合获得膨大的果实,但果实较瘦弱且维系时间较短;对于给定的两个亲本而言,正反交结实情况差异也很大;对于大多数杂交组合而言,蒴果的膨大程度与种子有胚率呈一定的正相关性。 3)利用荧光显微镜观察发现,’Mount Duckling’自交（?）（?）’Loreto’×’Black Out 1106’杂交组合中,父本的花粉均能在母本的柱头上萌发,进入中央花柱道,到达花柱基部,最终到达子房并进入胚珠。不过某些花粉管在生长过程中也表现出了一些不亲和的现象,如在花柱及子房中均出现了胼胝质反应等。 4)在杂种幼胚离体培养基的筛选试验中,以’Navona’x’Tresor’为试材,通过试验分析得出最佳离体萌发培养基为MS+蔗糖3%+NAA0.01mg/L;在杂交幼苗最适生根培养基的筛选试验中,发现在培养基中添加活性炭利于杂交幼苗生根,最适生根培养基为MS+蔗糖6%+NAAO.1 mg/L+活性炭1.0g/L 5)利用ISSR-PCR分子标记方法对所获得的5个杂种后代进行杂种真实性鉴定,从15个ISSR引物中筛选出2个引物进行扩增,共得到29条DNA条带,其中多态性条带24条,占总条带数的82.76%。研究结果表明,5个杂交后代多数条带和亲本共用,有的融合双亲性状,出现双亲相加性带型,或双亲各自特有条带,此外,部分杂种还出现双亲均没有的条带,以上情况均说明了杂种的真实性。

关键词：亚洲百合杂交育种亲和性胚拯救杂种鉴定

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百合远缘杂交及其杂种鉴定研究

百合远缘杂交及其杂种鉴定研究

作者：张睿婧广西大学

学位级别：硕士

百合是世界五大鲜切花商品之一,但在我国观赏百合的商品化栽培历史较短。目前,我国生产鲜切花的百合种球多数是从荷兰等国家进口。然而,除了云南昆明等少数四季如春的高原区以外,国外的许多商品种不适应在我国夏季高温高湿地区气候条件... 详细信息

百合是世界五大鲜切花商品之一,但在我国观赏百合的商品化栽培历史较短。目前,我国生产鲜切花的百合种球多数是从荷兰等国家进口。然而,除了云南昆明等少数四季如春的高原区以外,国外的许多商品种不适应在我国夏季高温高湿地区气候条件下栽培,严重影响了百合鲜切花产业的发展。我国丰富的百合野生资源具有明显的耐热抗病性,如何充分利用我国特有的百合野生资源,提高商品种的抗逆性,培育出既适合在我国境内生长又具有自主知识产权的新品种是百合育种的重要目标。本论文以东方百合品种“康斯坦萨”(Lilium’Constanta’,Oriental lily hybrid)×岷江百合(Lilium regale Wilson)、’‘索邦’’(Lilium’Sorbonne’)×泸定百合Lilium sargentiae Wilson)两个远缘杂交组合进行种质创新研究,旨在培育具有较高的夏季耐热性和抗病性的新种质和新品种。开展的从杂交育种、杂种胚拯救以及杂交F1代的早期鉴定等一系列的试验。主要结果如下： 1.岷江百合和泸定百合的新鲜花粉萌发率达到90%,均适用于杂交试验。花粉贮藏于常温、4℃、-20℃、-75℃,4个条件对花粉生活力的影响存在较大的差异,-20℃贮藏效果最佳。 2.采用了直接授粉、切花柱、切花柱加母本柱头液等方法进行授粉试验,以克服远缘杂交受精前的障碍。研究结果表明,直接授粉杂交的坐果率最高为85%,切花柱加母本柱头液为39%,切花柱为33%。直接授粉法最佳,杂交组合的柱头对花粉排斥小,这两个杂交组合受精前障碍不明显。 3.为克服受精后障碍采取胚拯救技术。取材时间为授粉后子房发育20d、30d、40d、50d、60d,以子房切片培养、胚珠培养、胚囊培养三种方法对早期的杂种胚进行培养。子房采集后携至实验室作表面灭菌处理后,横切为0.3cm的子房切片,接种于MS为基本培养基的5种培养基上进行胚拯救培养。以授粉后40d,子房切片培养的效果最佳,黑暗培养有利于被拯救胚诱导成苗。 4.用SRAP分子标记对“康斯坦萨”(Lilium’Constanta’,Oriental lily hybrid)×岷江百合(Lilium regale Wilson)杂交组合所得到的杂交后代进行杂种真实性鉴定。采用CTAB法提取DNA,从筛选的56对多态性高,重复性好的引物中随机选用13对引物Mel/Em1、Me4/Em10、Me2/Em1、 Me1/Em5、Me1/Em6、Me2/Em3、Me1/Em8、Me4/Em4、Me1/Em9、Me3/Em8、 Me2/Em2、Me1/Em3、Me1/Em4,都能扩增出父本及母本条带。结果表明,通过子房切片胚拯救培养获得的7个株系均鉴定为真杂种。

关键词：百合远缘杂交胚拯救杂种鉴定 SRA分子标记

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克服百合远缘杂交不亲和性的研究

克服百合远缘杂交不亲和性的研究

作者：刘凤栾河北农业大学

学位级别：硕士

本试验以亚洲百合‘多安娜’(Pollyanna)×东方百合‘西伯利亚’(Siberia)和亚洲百合‘普瑞头’(Prato)×麝香百合‘雪皇后’(Snow Queen)组合为研究对象,在蕾期到花开3 d共5个时期,进行盐溶液处理法、花粉预培养法和切割柱头法3种方式... 详细信息

本试验以亚洲百合‘多安娜’(Pollyanna)×东方百合‘西伯利亚’(Siberia)和亚洲百合‘普瑞头’(Prato)×麝香百合‘雪皇后’(Snow Queen)组合为研究对象,在蕾期到花开3 d共5个时期,进行盐溶液处理法、花粉预培养法和切割柱头法3种方式授粉,筛选出了两个结实效果较好的授粉方式:3.5% KCl处理后授粉和3.0% NaCl处理后授粉。试验进一步以‘多安娜’×‘西伯利亚’组合为对象,研究了3.5% KCl和3.0% NaCl处理对母本‘多安娜’柱头形态、相关生理指标以及花柱内父本花粉管生长、授粉后胚囊(胚胎)发育的作用,以期了解盐处理促进部分花期结实率(Seed setting rate,SSR)提高的内在机理,为百合育种实践提供参考资料。主要结果如下:1. KCl与NaCl处理后杂交结实效果以及其对柱头形态、生理及花粉萌发、花粉管生长的影响基本类似。2. 3种处理方法相比,两组合的盐处理效果都明显好于花粉预培养法及切割花柱法。其中,3.5% KCl和3.0% NaCl浓度处理的结实率较高。3.盐处理中,‘多安娜’×‘西伯利亚’组合结实率高于‘普瑞头’×‘雪皇后’。与对照相比,前者花开1 d-3 d同期结实率显著提高,其中部分处理高达5-10倍;蕾期及花开当天也部分实现了结实。后一组合倾向于在蕾期、花开当天以及花开1 d等3个授粉时期结实。4.在各处理进行的胚拯救中,两组合子房切片90%左右发生褐化,仅4%-8%切片中产生了膨大胚珠。‘普瑞头’×‘雪皇后’组合处理后胚拯救成苗率显著提高,总体好于‘多安娜’×‘西伯利亚’,但其3个采样时期的成苗率差异较大。5.‘多安娜’柱头经3.5% KCl处理后,电镜观察到5个授粉时期的乳突细胞均呈膨大变化,其表面分泌物减少或消失,裸露面积增大。各授粉时期乳突细胞纵、横截面面积都(极)显著(P胚囊高峰期滞后于‘普瑞头’3 d左右,花开8 d、10 d时其保持成熟的胚囊比例高于后者。两杂交组合双受精作用均开始于授粉后10 d,较一般亲和组合晚。‘多安娜’×‘西伯利亚’组合胚囊、胚胎解体和败育主要发生于授粉后16 d-20 d期间,而‘普瑞头’×‘雪皇后’为授粉后11 d-15 d期间。9.有胚种子在10℃、24 h黑暗条件下,处理15 d诱导萌发效果最好。快繁苗在1/2 MS + 1.0 mg/L IAA和1/3 MS + 0.3 mg/L NAA两培养基中生根效果好。

关键词：百合远缘杂交盐溶液处理胚拯救花期柱头

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岩生报春×翠南报春F1代回交育种研究

岩生报春×翠南报春F1代回交育种研究

作者：王谕北京林业大学

学位级别：硕士

岩生报春(Primula saxatilis)是报春花科(Primulaceae)报春花属(Primula L.)指叶报春组多年生草本,北京市重点野生保护植物,伞形花序1-2轮,花冠淡紫红色,花径大,可达35mm,花期长,达3个月以上,但每轮花量少而松散。翠南报春(Primula sieb... 详细信息

岩生报春(Primula saxatilis)是报春花科(Primulaceae)报春花属(Primula L.)指叶报春组多年生草本,北京市重点野生保护植物,伞形花序1-2轮,花冠淡紫红色,花径大,可达35mm,花期长,达3个月以上,但每轮花量少而松散。翠南报春(Primula sieboldii)是报春花科报春花属多年生草本植物,伞形花序多1轮,花序紧凑,花冠淡红色至紫红色,但花径较小,花期短,多为1个月左右。为充分利用野生报春植物资源,综合岩生报春、翠南报春优良性状,获得花大、花量大、花序紧凑、花期长的报春花新种质,本研究以岩生报春×翠南报春F1代为研究对象栽培扩繁,展开表型评价与育性评价,在育性评价基础上以杂种F1代为母本与亲本岩生报春回交,通过胚拯救技术获得杂种F2代,对F2代进行扩繁和鉴定。主要研究结论如下：(1)对岩生报春×翠南报春F1代4个株系表型性状进行评价分析,不同杂种株系表型特征表现出一致性,与亲本存在显著性差异。杂交后代的株型较亲本更为紧凑,在叶形、叶缘、叶柄色、花眼等方面表现出双亲性状;杂交后代花径大小介于两亲本之间,花期较父本花期提早且延长,SS-53花期在11月上旬至次年2月下旬,SS-18、SS-28、SS-39花期在12月上旬至次年2月上旬。岩生报春×翠南报春F1代在花径、花期观赏性状方面得到改良,可作为培育目标新品种的中间种质。(2)通过观察花粉形态学特征,测定花粉生活力与柱头可授性,评价岩生报春×翠南报春F1代的育性。结果表明：岩生报春×翠南报春F1代花粉干瘪,严重败育,4个株系花粉萌发率仅在0%、1.26%、0.76%、3.13%,几乎不具有生活力,不可作为育种父本植物;F1代4个株系柱头均具有一定的可授性,可作为母本植物材料用于进一步育种。(3)以育性评价结果为依据进行回交实验。设置4个异型授粉回交组合,授粉380朵花,授粉后各组合子房均有一定程度的膨大,与母本植物的柱头可授性呈正相关,但在授粉后35-42d内败育,不能自然结实产生种子;授粉后37-40d是以短花柱F1为母本、岩生报春为父本比较合适的进行胚拯救的时间。(4)以岩生报春×翠南报春F1代为母本、岩生报春为父本共拯救154个子房,近8000粒胚珠,共萌发10粒。胚拯救共获得F2代7株。利用SSR分子标记技术对F2代4个株系进行SSR分子鉴定,结合形态学特点,回交-3、回交-5可基本确定为真杂种。本研究充分利用野生濒危报春植物资源岩生报春,获得岩生报春×翠南报春F1代与岩生报春的回交后代,为培育花大、花量大、花序紧凑、花期长的报春花新品种奠定基础。

关键词：岩生报春翠南报春种间杂交胚拯救杂种鉴定

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观赏兼食用百合新品种的培育

观赏兼食用百合新品种的培育

作者：李卓忆北京林业大学

学位级别：硕士

本文通过将观赏性较好的亚洲百合品种、LA百合品种与可食用的兰州百合(Lilium davidii *** Salisb)杂交,以培育观赏兼食用的百合新品种,丰富百合的经济价值、观赏价值,这将为家庭园艺中百合的应用以及百合花海景观等提供新的思路。本文... 详细信息

本文通过将观赏性较好的亚洲百合品种、LA百合品种与可食用的兰州百合(Lilium davidii *** Salisb)杂交,以培育观赏兼食用的百合新品种,丰富百合的经济价值、观赏价值,这将为家庭园艺中百合的应用以及百合花海景观等提供新的思路。本文先通过直观筛选、花粉活力鉴定以及柱头可授性试验筛选出合适的杂交组合以及杂交时间。再通过对杂交授粉方式的摸索,杂交结实率,结实情况的持续观测并结合花粉管行为的荧光观察对不同杂交组合亲和性进行了详细的评价;并进一步对杂交后代胚拯救技术的方式以及胚拯救时间进行了探究。筛选出合适的培养基,确定了较为合适的杂交时间和方式、胚拯救时间以及方法,并得到两种杂交后代,其组合分别是兰州百合与亚洲百合品种'Tresor'、兰州百合与亚洲百合品种'Prunotto';并通过染色体数量鉴定以及分子鉴定两种方式分别鉴别了杂交后代,得到了杂种百合植株,通过组织培养技术,对杂种后代进行了繁殖,得到了一定数量的杂种后代,同时还将冷藏时间不同的小鳞茎的可溶性糖与淀粉进行测定,发现了可溶性糖与淀粉含量随冷藏时间的变化规律,为后续百合新品种的研究奠定了基础。具体研究结果如下:1.通过花粉活力测定试验发现:'Ballroom'、'Prunotto'、'Tresor'、'Rosella's dream'、'Black Out'均可作为杂交的父本。通过柱头可授性试验发现:兰州百合的授粉时间最好集中于早上7:00-9:00。2.兰州百合X 'Prunotto'在授粉时,先用5%的蔗糖溶液处理柱头,再进行授粉,可以提高杂交亲和性。授粉时,选择花蕾期的花朵可以提高杂交亲和性。适合的进行胚拯救的时间为授粉后30d;兰州百合X 'Tresor'直接授粉效果较好,无需对柱头进行处理,并且延迟授粉和提前授粉均不利于提高果实结实率。授粉后40d时开始胚拯救效果较好;兰州百合X 'Black Out'利用花粉萌发液或者0.1%的6-BA处理柱头,并且自然风干一段时间,再进行授粉效果好。延迟授粉和提前授粉不利于提高果实结实率。胚拯救时间应为授粉40d。3.通过花粉管荧光观察发现:三个组合均出现不同程度的受精前障碍。4.子房切片培养效率极低,胚培养,带胚囊挽救萌发率较高,但后期成活率低,胚珠培养法较为适宜胚拯救。兰州百合X 'Prunotto'后代胚珠培养需先暗培养,最适培养基为1/2MS+3%蔗糖+0.6%琼脂+0.01 mg/LNAA+0.1 mg/L6-BA;兰州百合X'Tresor'、兰州百合X 'Black Out'后代最适培养基为1/2 MS+3%蔗糖+0.6%琼脂+0.01 mg/LNAA。5.兰州百合X 'Prunotto'后代最适鳞茎增大培养基为MS+1mg/LNAA+2g/L活性炭+60g糖+6g琼脂。兰州百合X 'Tresor'后代最适鳞茎增大培养基为MS+1mg/L NAA+1g/L活性炭+60g糖+6g琼脂。兰州百合X 'Prunotto'后代叶片不定芽诱导的较为适合的激素为NAA 0.1mg/L、6-BA 0.5mg/L。较为适合的继代培养激素为NAA 0.1mg/L、6-BA 1mg/L;兰州百合X 'Tresor'后代叶片不定芽诱导的较适激素为NAA 0.2mg/L、6-BA 1mg/L。较适的继代培养激素为 NAA0.1mg/L、6-BA 1mg/L。6.通过淀粉与可溶性糖的变化推测并验证了低温冷藏5周可以提高组培小种球的移栽成活率。7.兰州百合X 'Prunotto'得到15个杂种,兰州百合X 'Tresor'得到12个杂种,并对其进行了扩繁。

关键词：兰州百合杂交胚拯救

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松树体细胞胚胎发生技术的发展与应用

林业与环境科学 2018年第4期34卷 152-161页

作者：胡继文郭文冰邓乐平钟岁英王为民赵奋成黄婷吴惠姗李义良廖仿炎广东省森林培育与保护利用重点实验室/广东省林业科学研究院广东广州510520 台山市红岭种子园广东江门529223

植物体细胞胚胎(SE)发生作为上世纪中叶以来最强大的生物技术之一,相比其它无性繁殖方法,具有诸多优势。松树是世界上重要的商品林树种,松树SE研究是开展松树育种与繁育的热门领域。文章综述了松树SE的研究历程,对松属树种的SE发生情况... 详细信息

植物体细胞胚胎(SE)发生作为上世纪中叶以来最强大的生物技术之一,相比其它无性繁殖方法,具有诸多优势。松树是世界上重要的商品林树种,松树SE研究是开展松树育种与繁育的热门领域。文章综述了松树SE的研究历程,对松属树种的SE发生情况进行了归纳;详细阐述了体胚发生技术在松树新品系选育(包括无性系林业及遗传改良)、苗木扩繁、遗传转化及杂种后代胚拯救方面的应用实例,以期为SE技术在松树上的利用提供参考。

关键词：松树体细胞胚胎发生无性系林业遗传转化胚拯救