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中国修复重建外科杂志 2008年第8期22卷 974-978页

作者：于德水吕刚王岩峰刘丽波辽宁医学院附属第一医院骨科辽宁锦州121001 中国医科大学基础医学院神经生物教研室

目的研究BMSCs移植对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后VEGF受体胎肝激酶1(fetal liver kinase 1,Flk-1)基因和蛋白表达的影响,探讨BMSCs移植修复大鼠SCI的机制。方法取4周龄雄性Wistar大鼠5只,体重100～120g,进行BMSCs分离及培... 详细信息

目的研究BMSCs移植对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后VEGF受体胎肝激酶1(fetal liver kinase 1,Flk-1)基因和蛋白表达的影响,探讨BMSCs移植修复大鼠SCI的机制。方法取4周龄雄性Wistar大鼠5只,体重100～120g,进行BMSCs分离及培养。取81只Wistar雌性大鼠,体重220～250g,采用改良Allen's打击装置制备SCI模型,随机分为3组:假手术组(A组,n=21),仅咬除T8～10棘突和椎板;DMEM组(B组,n=30),SCI区周围注射DMEM;BMSCs组(C组,n=30),SCI区周围注射BMSCs。于移植术后1、3、5d,采用RT-PCR方法检测各组大鼠SCI区Flk-1基因表达的变化;于移植术后3、7、14d,免疫组织化学方法观察脊髓内Flk-1蛋白的表达。结果原代培养的BMSCs细胞形态多样,随着传代次数的增加,细胞形态逐渐趋于均一,多为扁平形和长梭形。RT-PCR结果显示,在移植术后1、3、5d,C组Flk-1 mRNA表达水平与B组比较差异无统计学意义(P>0.05);但B、C组与A组比较,Flk-1 mRNA表达于术后1d明显增加并达峰值(P1),术后3d下降(P1),至术后5d表达仍高于A组(P1蛋白表达较A组显著增加,差异有统计学意义(P1);术后14d,A、B组Flk-1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);移植术后3d,B、C组Flk-1表达相似,差异无统计学意义(P>0.05),移植术后7、14d,C组Flk-1表达明显高于B组(P1)。结论SCI后BMSCs移植对Flk-1 mRNA的表达无调节作用,但上调Flk-1蛋白的表达,是修复SCI的机制之一。

关键词：脊髓损伤 BMSCs移植胎肝激酶1 VEGF受体

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小鼠胚胎背主动脉发育过程中内皮和平滑肌标志物表达时相及其变化

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第36期11卷 7121-7125页

作者：韩雅玲李颖佳齐岩梅康建闫承慧解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科辽宁省沈阳市110016

目的:观察小鼠胚胎发育过程中背主动脉胎肝激酶1、α-平滑肌肌动蛋白的表达时相,初步探讨背主动脉内皮和平滑肌细胞的形成及其可能起源。方法:实验于2006-01/2007-01在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科完成。①实验材料:... 详细信息

目的:观察小鼠胚胎发育过程中背主动脉胎肝激酶1、α-平滑肌肌动蛋白的表达时相,初步探讨背主动脉内皮和平滑肌细胞的形成及其可能起源。方法:实验于2006-01/2007-01在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所心内科完成。①实验材料:昆明种小白鼠50只,体质量20～22g,其中雌鼠30只。②实验方法:将雌鼠分别放入公鼠笼内过夜、交配,从怀孕第8.5天开始获取胚胎,在雌鼠怀孕第8.5～18.5天,每一时间点取10个小鼠胚胎。③实验评估:对胎鼠组织切片分别行苏木精-伊红染色,观察背主动脉形态学变化;免疫组织化学染色法观察内皮细胞标志物胎肝激酶1、CD31、Ⅷ因子相关抗原,α-平滑肌肌动蛋白表达变化及其相互关系。结果:①胚胎8.5～9.5d胎鼠背主动脉由单层细胞构成,呈胎肝激酶1、CD31阳性,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅷ因子相关抗原阴性。②胚胎10.5d胎鼠背主动脉仍为单层细胞,但胎肝激酶1、CD31、Ⅷ因子相关抗原、α-平滑肌肌动蛋白均呈阳性。③胚胎11.5d背主动脉管壁发育为多层,内层细胞呈胎肝激酶1阳性、α-平滑肌肌动蛋白阴性,外层细胞呈胎肝激酶1阴性而α-平滑肌肌动蛋白阳性,血管与周围间充质无明显分界,背主动脉管壁周围可见散在α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞。④11.5d之后,背主动脉管壁平滑肌细胞数量增多且由不规则型转变为纺锤型,内层内皮细胞继续呈胎肝激酶1阳性、α-平滑肌肌动蛋白阴性,外层平滑肌细胞胎肝激酶1阴性、α-平滑肌肌动蛋白阳性,血管与周围间充质分界清楚,背主动脉血管周围无散在α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞。结论:胚胎背主动脉的平滑肌细胞可能最早起源于胎肝激酶1、CD31阳性细胞,后期可能来源于周围间充质细胞的募集分化。

关键词：背主动脉血管平滑肌胚胎胎肝激酶1 α-平滑肌肌动蛋白

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心宁片对心肌梗死后大鼠心肌血管内皮生长因子及其受体表达的影响

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中国中西医结合急救杂志 2009年第3期16卷 146-148页

作者：谢勇刘柏炎杨益刘松青蔡光先湖南中医药大学血管生物学实验室湖南长沙410007

目的观察心宁片对心肌梗死（心梗）后大鼠心肌血管内皮生长因子（VEGF）及其受体胎肝激酶1（FLK-1）表达的影响，探讨心宁片对心梗后大鼠缺血心肌的保护作用及其相关机制。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备心肌缺血模型。将60只SD... 详细信息

目的观察心宁片对心肌梗死（心梗）后大鼠心肌血管内皮生长因子（VEGF）及其受体胎肝激酶1（FLK-1）表达的影响，探讨心宁片对心梗后大鼠缺血心肌的保护作用及其相关机制。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支制备心肌缺血模型。将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、麝香保心丸组（30mg·kg^-1·d^-1）以及心宁片大、中、小剂量组（分别为1．08、0．54和0．27g·kg^-1·d^-1），各组均于制模后2d给药，连用30d。于术前、术后5min、给药30d后动态监测Ⅱ导联心电图，采用免疫组化法测定缺血心肌组织VEGF、FLK-1的表达。结果与假手术组比较，模型组心电图ST段明显抬高，心肌缺血区VEGF及其受体FLK-1的含量显著增加（P〈0．05或P〈0．01）。与模型组比较，心宁片大、中剂量组ST段显著压低[（0．319±0．064）mV、（0．328±0．046）mV比（0．384±0．078）mV，P〈0．01和P〈0．053；心肌缺血区VEGF、FLK-1表达显著升高（VEGFA值：0．190±0．029、0．169±0．027比0．156±0．019；FLK-14值：0．133±0．004、0．101±0．004比0．095±0．003，P〈0．05或P〈0．01]，而心宁片小剂量组虽有压低和升高趋势，但差异无统计学意义。阳性对照药麝香保心丸组与心宁片大、中剂量组的作用差异无统计学意义。结论心宁片可提高心梗后动物缺血心肌组织中的VEGF与FLK-1含量，其中以大剂量组作用最强。

关键词：心宁片心电图心肌缺血胸痹血管内皮生长因子胎肝激酶1

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