检索结果-南通市图书馆

补肾安胎冲剂对人胎盘微血管内皮细胞VEGF/PI3K/Akt信号通路表达的影响

环球中医药 2024年第12期17卷 2441-2448页

作者：李元琪李伟莉储继军余欣慧吴俊陆莎莎安徽中医药大学第一附属医院妇产科合肥230000 蒙城县中医院妇科

目的基于VEGFR-2沉默探讨补肾安胎冲剂(后文简称BSAT)对人胎盘微血管内皮细胞(human placental microvascular endothelial cells,HPMVECs)的影响,通过血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)/磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(protein kinase B,Akt)通路探索其治疗复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)的作用机制。方法在体外构建人胎盘微血管内皮细胞,随后采用转染小干扰RNA(siRNA)技术沉默VEGFR-2基因表达,并给予补肾安胎冲剂含药血清或空白血清干预,将人胎盘微血管内皮细胞分为空白血清组(PBS+空白血清)、siRNA空白血清组(PBS+VEGFR-2 siRNA+空白血清)、siRNA NC空白血清组(PBS+NC siRNA+空白血清)、siRNA药物血清组(PBS+VEGFR-2 siRNA+BSAT含药血清)、药物血清组(PBS+BSAT含药血清)予对应处理,实时荧光定量PCR、免疫荧光法及Western blot分别检测VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt mRNA及蛋白表达,观察在VEGFR-2基因沉默时,补肾安胎冲剂是否能通过PI3K/Akt通路介导血管新生。结果空白血清组和siRNA NC空白血清组相比,VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt mRNA及蛋白无明显差异(P>0.05);药物血清组细胞VEGF、VEGFR-2、PI3K、Akt mRNA及蛋白的表达明显高于空白血清组(P血管新生,促进母胎界面血管重构,从而对RSA发挥治疗作用。

关键词：补肾安胎冲剂复发性流产胎盘微血管内皮细胞磷脂酰肌醇3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶信号通路血管内皮生长因子

来源：

维普期刊数据库博看期刊

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

补肾安胎冲剂对RSA小鼠胎盘血管细胞中VEGF、VEGFR2的影响

补肾安胎冲剂对RSA小鼠胎盘血管细胞中VEGF、VEGFR2的影响

引用

作者：金雅安徽中医药大学

学位级别：硕士

1目的观察补肾安胎冲剂对复发性流产小鼠胚胎丢失率及胎盘微血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞中VEGF、VEGFR2蛋白表达的影响,进而从分子及细胞水平探讨补肾安胎冲剂保胎的作用机理,为临床上运用补肾安胎冲剂治疗RSA提供新的理... 详细信息

1目的观察补肾安胎冲剂对复发性流产小鼠胚胎丢失率及胎盘微血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞中VEGF、VEGFR2蛋白表达的影响,进而从分子及细胞水平探讨补肾安胎冲剂保胎的作用机理,为临床上运用补肾安胎冲剂治疗RSA提供新的理论依据。2方法将健康雌性CBA/J小鼠与雄性DBA/2小鼠以2∶1合笼交配建立RSA小鼠模型。将健康雌性CBA/J小鼠与雄性Balb/c小鼠以2∶1合笼交配建立正常妊娠小鼠模型。每日凌晨5:00-6:00检查雌鼠阴道,若见阴栓,则造模成功,记为妊娠第1天;若未见阴栓,则继续合笼。共造复发性流产模型小鼠50只,正常妊娠小鼠10只。将造模成功的RSA小鼠随机分为5组:模型组、黄体酮组、中药高、中、低剂量组,每组入组小鼠10只。从妊娠第1天开始给药正常妊娠组、模型组给予蒸馏水灌胃;黄体酮组予黄体酮胶囊26mg/kg/d给药;BSAT高、中、低剂量组分别予35.1g/kg/d、11.7g/kg/d和3.9g/kg/d蒸馏水稀释灌胃,每日16:00-17:00给药,连续15天。末次给药24h后,处死小鼠,分离出各组小鼠完整的子宫,在体式显微镜下提取并原代培养胎盘微血管内皮细胞、血管平滑肌细胞及成纤维细胞,肉眼观察每组小鼠胚胎丢失情况并记录。用Western blot、免疫荧光法检测妊娠小鼠胎盘微血管细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞中VEGF、VEGFR2蛋白表达水平。3结果3.1胚胎丢失率:与正常组比较,模型组RSA流产小鼠流产率显著提高（P＜0.01）。与模型组比较,西药组、补肾安胎冲剂中剂量、补肾安胎冲剂高剂量组RSA流产小鼠流产率降低显著,差异有显著统计学意义（P＜0.01）。3.2 Western Blot法检测各组孕鼠胎盘微血管内皮细胞中,与正常组相比,复发性流产模型组妊娠小鼠VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）。与模型组相比,西药组、补肾安胎冲剂低、中、高剂量VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著升高（P＜0.01）。与补肾安胎冲剂高剂量组相比,补肾安胎冲剂中、低剂量组的VEGF、VEGFR2及西药组VEGF蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）,西药组VEGFR2蛋白表达含量下降不明显,差异无统计学意义（P＞0.05）。3.3 Western Blot法检测各组孕鼠胎盘平滑肌细胞中,与正常组相比,复发性流产模型组妊娠小鼠VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）。与模型组相比,西药组、补肾安胎冲剂低、中、高剂量VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著升高（P＜0.01）。与补肾安胎冲剂高剂量组相比,补肾安胎冲剂中、低剂量组VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）;西药组VEGF、VEGFR2蛋白表达含量下降不明显,差异无统计学意义（P＞0.05）。3.4 Western Blot法检测各组孕鼠胎盘成纤维细胞中,与正常组相比,复发性流产模型组妊娠小鼠VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）。与模型组相比,西药组、补肾安胎冲剂低、中、高剂量VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著升高（P＜0.01）。与补肾安胎冲剂高剂量组相比,补肾安胎冲剂中、低剂量组VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）;西药组VEGF、VEGFR2蛋白表达含量下降不明显,差异无统计学意义（P＞0.05）。3.5免疫荧光法检测各组孕鼠胎盘微血管内皮细胞中,与正常组相比,复发性流产模型组妊娠小鼠VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）。与模型组相比,西药组、补肾安胎冲剂低、中、高剂量VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著升高（P＜0.01）。与补肾安胎冲剂高剂量组相比,补肾安胎冲剂中、低剂量组的VEGF、VEGFR2及西药组VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）,西药组VEGF蛋白表达含量下降不明显,差异无统计学意义（P＞0.05）。3.6免疫荧光法检测各组孕鼠胎盘平滑肌细胞中,与正常组相比,复发性流产模型组妊娠小鼠VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）。与模型组相比,西药组、补肾安胎冲剂低、中、高剂量VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著升高（P＜0.01）。与补肾安胎冲剂高剂量组相比,补肾安胎冲剂中、低剂量组的VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）,西药组VEGF、VEGFR2蛋白表达含量下降不明显,差异无统计学意义（P＞0.05）。3.7免疫荧光法检测各组孕鼠胎盘成纤维细胞中,与正常组相比,复发性流产模型组妊娠小鼠VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著下降（P＜0.01）。与模型组相比,西药组、补肾安胎冲剂低、中、高剂量VEGF、VEGFR2蛋白表达含量显著升高（P＜0.01）

关键词：复发性流产补肾安胎冲剂 VEGF、VEGFR2 胎盘微血管内皮细胞平滑肌细胞成纤维细胞

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于VEGFR2介导的Ras/MAPK信号通路探讨补肾安胎冲剂治疗复发性流产的作用机制

引用

海南医学院学报 2021年第9期27卷 672-678页

作者：常韦李伟莉陆莎莎安徽中医药大学安徽合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院妇产科安徽合肥230031

目的:探讨补肾安胎冲剂对小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干扰的血管内皮生长因子受体2介导的Ras蛋白(rat sarcoma protein,Ras)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)mRNA及蛋白表达的影响。方法:构建胎盘微血管内皮细胞,并制备补肾安胎冲剂含药血清,筛选出最佳含药血清浓度,将其分为正常血清组、siRNA-NC正常血清组、药物血清组、siRNA正常血清组、siRNA药物血清组,采用实时荧光定量PCR、Western blotting、免疫荧光法分别检测Ras/MAPK mRNA及蛋白表达。结果:正常组和阴性对照组Ras、MAPK mRNA及蛋白的表达无明显差异(P>0.05);药物血清组细胞Ras、MAPK mRNA及蛋白的表达明显高于正常血清组(P<0.01);siRNA1正常血清组较正常血清组相比Ras、MAPK mRNA及蛋白的表达明显下降(P<0.01);siRNA1药物血清组与siRNA1正常血清组Ras、MAPK mRNA及蛋白的表达相比有显著差异(P<0.01)。结论:补肾安胎冲剂对于复发性流产的治疗作用可能是通过上调Ras/MAPK mRNA及蛋白表达实现的。

关键词：补肾安胎冲剂复发性流产胎盘微血管内皮细胞含药血清 Ras/MAPK信号通路

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：