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作者：刘彩茹重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：研究妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis ofpregnancy，ICP)孕妇胎盘合体滋养细胞中组蛋白去乙酰化酶3(histone deacetylase3， HDAC3)的定位和表达，探讨其表达变化与ICP病理生理过程的关系。方法：选择重庆医科大... 详细信息

目的：研究妊娠期肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis ofpregnancy，ICP)孕妇胎盘合体滋养细胞中组蛋白去乙酰化酶3(histone deacetylase3， HDAC3)的定位和表达，探讨其表达变化与ICP病理生理过程的关系。方法：选择重庆医科大学附属第一医院2012年3月至2013年11月分娩的ICP孕妇30例为研究对象，其中包括轻度组(15例),重度组(15例)，选择同一时期在该医院行择期剖宫产术的无妊娠合并症的孕妇15例为正常对照组。采用ELISA法测血清中TNF-α水平，免疫组化及westernblot检测胎盘合体滋养细胞HDAC3的表达，同时测血清中TBA及ALT、AST水平。结果：（1）ICP重度组、ICP轻度组、对照组血清TNF-α水平分别为：(52.35±3.16) ng/L、(39.08±2.27) ng/L、(32.40±2.13) ng/L;ICP重度组、ICP轻度组、对照组血清TBA水平分别为：（69.95±21.47）ng/L、（11.31±0.76）ng/L、（2.70±0.21）ng/L;ICP重度组、ICP轻度组、对照组血清ALT水平分别为：（312.2±34.7）U/L、（101.7±19.2）U/L、（21.9±2.8）U/L;ICP重度组、ICP轻度组、对照组血清AST水平分别为：（237.7±31.6）U/L、（71.0±12.9）U/L、（17.3±1.3）U/L;在ICP重度组孕妇血清中，TNF-α、TBA、AST和ALT水平较ICP轻度组和正常对照组有明显的升高，分别比较，组间差异有统计学意义（P胎盘合体滋养细胞胞核，着色较淡，呈淡棕黄色染色;在正常对照组，HDAC3也在胎盘合体滋养细胞表达，主要在胞核着色，但呈棕黄色浓染。（3）ICP重度组和轻度组胎盘合体滋养细胞中HDAC3表达水平分别为：（0.077±0.006）及（0.076±0.007），两组比较差异无统计学意义(P＞0.05)，两组明显低于对照组的（0.232±0.018），分别比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。（4）胎盘合体滋养细胞中HDAC3的定量表达与血清中TNF-α、TBA及ALT、AST水平呈负相关，Spearman相关系数分别为-0.340，-0.688，-0.533，-0.577。结论：（1）ICP孕妇胎盘合体滋养细胞中HDAC3表达下调。（2）ICP孕妇胎盘合体滋养细胞中HDAC3的定量表达与血清中TNF-α、TBA及ALT、AST水平呈负相关。（3）ICP孕妇胎盘合体滋养细胞中HDAC3表达下调介导的免疫损伤可能与ICP孕妇肝功能异常有关。

关键词：妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘合体滋养细胞组蛋白去乙酰化酶3 肿瘤坏死因子α

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全氟辛烷磺酸对人胎盘合体滋养细胞影响的研究

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上海医学 2022年第6期45卷 380-386页

作者：张楠王育程山山上海交通大学医学院附属仁济医院妇产科上海200120 同济大学医学院附属上海市第一妇婴保健院

目的研究全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)对人胎盘合体滋养细胞中糖皮质激素代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型(11β-HSD2)和胎盘合体滋养细胞凋亡的影响,探讨PFOS对胎儿的影响。方法利用改良的Kliman法分离提纯原代人胎... 详细信息

目的研究全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)对人胎盘合体滋养细胞中糖皮质激素代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型(11β-HSD2)和胎盘合体滋养细胞凋亡的影响,探讨PFOS对胎儿的影响。方法利用改良的Kliman法分离提纯原代人胎盘滋养层细胞,体外培养3 d,待滋养层细胞完全合体化为合体滋养细胞后,使用不同浓度的PFOS(0、0.001、0.01、0.1、1、10μmol/L)处理细胞,利用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹等方法检测PFOS对胎盘合体滋养细胞11β-HSD2的mRNA和蛋白质表达水平,以及酶活性的影响,检测PFOS对天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase3)蛋白质表达水平和酶活性的影响。结果体外培养第1、2、3天,胎盘滋养层细胞中11β-HSD2的mRNA和蛋白质相对表达量逐渐升高,与未处理时(即第0天)比较的差异具有统计学意义(P值均胎盘合体滋养细胞11β-HSD2的mRNA和蛋白质相对表达量较未处理时显著降低,且11β-HSD2的mRNA和蛋白质相对表达量随着PFOS剂量的增加(0.1、1、10μmol/L)显著降低(P值均胎盘合体滋养细胞11β-HSD2酶活性较未处理时显著降低,并随着PFOS剂量的增加,活性抑制程度显著增强(P值均胎盘合体滋养细胞pro-caspase3蛋白质相对表达量较未处理时显著降低,且蛋白质相对表达量随着PFOS剂量的增加(0.1、1、10μmol/L)显著降低(P值均胎盘合体滋养细胞cleaved-caspase3的蛋白质相对表达量较未处理时显著升高,并随着PFOS剂量的增加显著升高(P值均胎盘合体滋养细胞caspase3的酶活性较未处理时显著增强,并随着PFOS剂量的增加活性显著增强(P值均胎盘合体滋养细胞中11β-HSD2的表达和酶活性,促进胎盘合体滋养细胞凋亡,这可能是PFOS导致病理妊娠,对胎儿产生不良影响的重要机制之一。

关键词：全氟辛烷磺酸胎盘合体滋养细胞 11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ型凋亡

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