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胎兔颅骨成骨细胞克隆筛选及鉴定

第三军医大学学报 1999年第8期21卷 567-570页

作者：唐康来吴梅英杨柳卢卫忠李建福曹佳刘胜学第三军医大学附属西南医院骨科

目的：筛选胎兔颅骨细胞原代培养中的细胞克隆，建立成骨细胞株。方法：从胎兔颅骨组织中分离培养颅骨细胞，在此基础上，运用有限稀释法行克隆传代筛选，建立成骨细胞株，并用酶组化、免疫组化及染色体染色等方法予以鉴定。结果：原代... 详细信息

目的：筛选胎兔颅骨细胞原代培养中的细胞克隆，建立成骨细胞株。方法：从胎兔颅骨组织中分离培养颅骨细胞，在此基础上，运用有限稀释法行克隆传代筛选，建立成骨细胞株，并用酶组化、免疫组化及染色体染色等方法予以鉴定。结果：原代培养的颅骨细胞来源复杂，形态多样；克隆传代筛选的细胞株，细胞形态单一，碱性磷酸酶组化染色呈强阳性，骨形态发生蛋白免疫组化染色呈强阳性，钙红染色显示具有成骨能力；染色体数目形态保持相对稳定。结论：利用有限稀释和克隆传代培养筛选建立的兔成骨细胞株，生物学性状均一，遗传学性状稳定。

关键词：成骨细胞细胞培养克隆颅骨胎兔

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胎兔手术技术操作基础

中华整形烧伤外科杂志 1998年第3期14卷 186-188页

作者：冯国平孙广慈杨欣张海明张正文刘志飞中国医学科学院中国协和医科大学整形外科医院北京100041

目的建立简单有效的胎兔外科手术方法,使术后成活率达到80％以上。方法在胎兔创伤愈合的研究中,采用在硫喷妥钠静脉麻醉下将胎兔胎体后1/2置于宫外或在宫内手术的方法;用37℃左右的生理盐水补充术中丢失的羊水;严密缝合羊膜。结果手术... 详细信息

目的建立简单有效的胎兔外科手术方法,使术后成活率达到80％以上。方法在胎兔创伤愈合的研究中,采用在硫喷妥钠静脉麻醉下将胎兔胎体后1/2置于宫外或在宫内手术的方法;用37℃左右的生理盐水补充术中丢失的羊水;严密缝合羊膜。结果手术后胎兔的成活率达到90％,胎兔发育正常。结论此方法简单有效。

关键词：胎兔外科手术胎儿

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冷冻预处理温度对胎兔许旺细胞活性的影响

中国组织工程研究与临床康复 2011年第36期15卷 6793-6796页

作者：代秀松吴敏张长春徐伟肖玉周蚌埠医学院第一附属医院骨科安徽省蚌埠市233004

背景:许旺细胞作为周围神经损伤修复的重要桥接材料,其活性对临床修复周围神经损伤成功与否具有重要影响。目的:观察不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对胎兔许旺细胞活性的影响。方法:设计胎兔许旺细胞冷冻维持温度为-30～-70℃,每间... 详细信息

背景:许旺细胞作为周围神经损伤修复的重要桥接材料,其活性对临床修复周围神经损伤成功与否具有重要影响。目的:观察不同维持温度冷冻预处理超深低温保存对胎兔许旺细胞活性的影响。方法:设计胎兔许旺细胞冷冻维持温度为-30～-70℃,每间隔-5℃为一组,以10%二甲基亚砜为低温保护剂,对胎兔许旺细胞进行上述温度冷冻预处理,液氮中保存48h,快速复温后继续培养48h,透射电镜观察细胞超微结构改变,MTT法和3H-TdR掺入法检测细胞活性。结果与结论:透射电镜下见-45℃处理的细胞超微结构良好,其余各温度组细胞均出现细胞器肿胀、坏死等轻重不同的冷冻损伤表现。MTT法和3H-TdR检测结果均显示-45℃冷冻预处理对许旺细胞的生长抑制率最低,分别为(3.83±0.56)%、(4.41±0.71)%,和其余各温度组之间相比,差异有显著性意义(P胎兔许旺细胞冷冻预处理的最佳维持温度值,对细胞活性影响最小,可较好保持其生物学活性。

关键词：许旺细胞冷冻预处理维持温度活性胎兔

冷冻保存胎兔颅骨骨膜修复关节软骨缺损的实验研究

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中国修复重建外科杂志 1998年第2期12卷 117-121页

作者：蔡善保胡汝麒王海燕周建生潘功平蚌埠医学院附属医院骨科

为探讨关节软骨缺损的修复方法，采用家兔３０只，平均分成两组。在每个动物的双侧髌股关节股骨关节面作４ｍｍ×７ｍｍ全层软骨缺损。将经二步冷冻法保存的胎兔颅骨骨膜移植于一组动物一侧后肢作为实验组，另一侧用自体骨膜移植作为自... 详细信息

为探讨关节软骨缺损的修复方法，采用家兔３０只，平均分成两组。在每个动物的双侧髌股关节股骨关节面作４ｍｍ×７ｍｍ全层软骨缺损。将经二步冷冻法保存的胎兔颅骨骨膜移植于一组动物一侧后肢作为实验组，另一侧用自体骨膜移植作为自体对照组。在另一组动物的一侧后肢用新鲜胎兔颅骨骨膜移植作为新鲜对照组，另一侧关节软骨缺损不修复作为空白对照组。术后肢体不作外固定。１６周后取材，经大体观察、组织学观察及氨基酸成分分析。结果发现，经冷冻保存的胎兔颅骨骨膜移植后能形成透明样软骨，与自体对照组无显著性差异（Ｐ＞０．０５），与新鲜对照组及空白对照组主要指标有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。氨基酸分析示实验组新生物接近纤维软骨（Ｐ＞０．０５）。认为，冷冻胎兔颅骨骨膜移植为关节软骨缺损的修复提供了实验依据。

关键词：关节软骨缺损修复颅骨骨膜胎兔低温保存

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胎兔宫内唇裂修复模型

国际口腔医学杂志 1991年第4期 254-255页

作者：骆雷

唇腭裂是颌面部最常见的先天性畸形.尽管有众多的修复方法,但相当多的患者术后不可避免的遗留术创瘢痕及面中份发育不足.作者设想在子宫内施行手术修复唇裂以避免发生以上问题。实验动物为妊娠24天的新西兰白兔.全麻下切开子宫,借助6倍... 详细信息

唇腭裂是颌面部最常见的先天性畸形.尽管有众多的修复方法,但相当多的患者术后不可避免的遗留术创瘢痕及面中份发育不足.作者设想在子宫内施行手术修复唇裂以避免发生以上问题。实验动物为妊娠24天的新西兰白兔.全麻下切开子宫,借助6倍外科手术显微镜于中线口角间作1mm之切口并切开齿槽突,形成全层贯通的口鼻瘘。将其中一组用9—0的尼龙缝线修复伤口,而另一组则不予缝合。对照组则只将胎兔暴露,不施行任何手术。经统计学分析,手术修复组和未修复组的术后生存率无明显差别,

关键词：唇裂修复胎兔修复组发育不足鼻部畸形鼻畸形

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人轮状病毒wa株宫内感染胎兔的试验

中国人兽共患病杂志 1997年第3期13卷 63-65页

作者：林继煌何孔旺赵枫江杰元薛家宾谢孟坤江苏省农业科学院古牧兽医研究所南京21014 广州第一军医大学

TGF-β对胎兔颅骨成骨样细胞体外成骨作用及BMP蛋白表达影响的研究

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第三军医大学学报 2002年第5期24卷 547-549页

作者：唐康来杨柳许建中卢卫忠吴梅英李起鸿第三军医大学附属西南医院骨科重庆400038

目的　探讨TGF β对胎兔颅骨成骨样细胞体外成骨作用及BMP蛋白表达的影响。方法　采用ALP活性测定及骨结节计数方法观察TGF β对胎兔颅骨成骨样细胞体外的成骨作用 ,BMP McAb免疫组化染色及其定量分析观察TGF β对胎兔颅骨成骨样细胞BM... 详细信息

目的　探讨TGF β对胎兔颅骨成骨样细胞体外成骨作用及BMP蛋白表达的影响。方法　采用ALP活性测定及骨结节计数方法观察TGF β对胎兔颅骨成骨样细胞体外的成骨作用 ,BMP McAb免疫组化染色及其定量分析观察TGF β对胎兔颅骨成骨样细胞BMP蛋白表达的影响。结果　TGF β( 3～ 7d)对ALP活性有促进作用 ,并呈一定的时效和量效关系。TGF β对骨结节形成低剂量时有促进作用 ,高剂量时有较强的抑制作用 ;TGF β对成骨细胞BMP蛋白表达表现为抑制作用 ;二者均有显著性差异。结论　TGF β对胎兔颅骨成骨样细胞体外成骨及BMP蛋白表达表现为双相作用。

关键词：胎兔成骨样细胞转化生长因子β M有形态发生蛋白骨形成