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中国康复医学杂志 2021年第2期36卷 129-134页

作者：洪艺根高文双贾磊魏慧曲玉娟岳寿伟山东大学齐鲁医院康复科济南250012

目的:观察低能量激光对大鼠背根神经节持续受压(chronic compression of the dorsal root ganglion,CCD)后痛觉敏感及脊髓背角内TRPV4表达及分布的影响。方法:选取健康雄性Wistar大鼠36只,分为空白组、CCD组、激光组各12只,各组均给予... 详细信息

目的:观察低能量激光对大鼠背根神经节持续受压(chronic compression of the dorsal root ganglion,CCD)后痛觉敏感及脊髓背角内TRPV4表达及分布的影响。方法:选取健康雄性Wistar大鼠36只,分为空白组、CCD组、激光组各12只,各组均给予常规饲养。激光组在CCD后第4天经皮肤给予L4/L5脊髓节段处810nm低能量激光治疗7天,输出功率150mw,10min/次。并于术前,术后第4、7、11天,分别测量各组大鼠机械刺激缩爪反应阈值和热缩爪潜伏期,观察机械痛阈和热痛阈的变化。同时,利用Western Blot检测各组术后11天TRPV4在脊髓背角中蛋白表达的变化,利用免疫荧光技术检测各组术后11天TRPV4阳性细胞分布。结果:与空白组相比,CCD组在术后第4、7、11天,机械痛阈和热痛阈均降低(P神经病理性疼痛的中枢敏化的作用,缓解CCD后所致的痛觉敏感。

关键词：低能量激光背根神经节持续受压脊髓背角 TRPV4

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蛋白激酶Cε对大鼠背根神经节持续受压后背角星型胶质细胞激活和机械痛敏的影响

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中国康复医学杂志 2019年第11期34卷 1278-1284页

作者：张杨杜占慧魏慧高文双岳寿伟山东大学齐鲁医院康复科济南250012 青岛市妇女儿童医院心脏中心

目的:探讨大鼠背根神经节持续受压(chronic compression of the dorsal root ganglion,CCD)后,脊髓背角星型胶质细胞的激活情况,以及PKCε是否可以通过调节星型胶质细胞的活性而参与CCD后神经病理性疼痛。方法:将大鼠随机分为6组,每组大... 详细信息

目的:探讨大鼠背根神经节持续受压(chronic compression of the dorsal root ganglion,CCD)后,脊髓背角星型胶质细胞的激活情况,以及PKCε是否可以通过调节星型胶质细胞的活性而参与CCD后神经病理性疼痛。方法:将大鼠随机分为6组,每组大鼠8只:假手术组、CCD7天组、CCD14天组、CCD7天+BIM I组、CCD+DMSO组、CCD+PDBu组,分别通过鞘内注射不同药物,或对正常大鼠鞘注DMSO/PDBu后,测量大鼠机械刺激缩爪阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT)的变化,利用Western Blot技术检测脊髓背角PKCε和GFAP蛋白表达的变化,利用免疫荧光技术检测脊髓背角星型胶质细胞激活情况。结果:CCD术后第4天,鞘内注射PKCε的激动剂PDBu 1—4h,明显降低CCD大鼠PWMT(P0.05)。与假手术组比较,CCD后7天和14天,手术侧背角PKCε和GFAP表达升高,差异有显著性意义(P背根神经节持续受压后,机械痛阈下降的同时,手术侧脊髓背角内PKCε和GFAP蛋白表达上调,星型胶质细胞激活增加。PKCε可能通过调节星型胶质细胞激活参与CCD后病理性神经痛的中枢敏化机制。

关键词：脊髓背角蛋白激酶C 星型胶质细胞背根神经节持续受压

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ERK-TRPV4途径参与大鼠背根神经节持续受压后痛觉敏感的脊髓中枢敏化机制的研究

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中国康复医学杂志 2019年第11期34卷 1285-1291页

作者：贾磊魏慧张杨怀娟岳寿伟山东大学齐鲁医院康复科

目的:探讨ERK-TRPV4途径参与大鼠背根神经节持续受压(CCD)后痛觉敏感的脊髓中枢敏化的机制。方法:选取SPF级雄性Wistar大鼠共42只,随机分为空白对照组6只,CCD手术组36只(包括术后2d、4d、7d、10d和14d,每组6只,以及免疫荧光组6只)。利... 详细信息

目的:探讨ERK-TRPV4途径参与大鼠背根神经节持续受压(CCD)后痛觉敏感的脊髓中枢敏化的机制。方法:选取SPF级雄性Wistar大鼠共42只,随机分为空白对照组6只,CCD手术组36只(包括术后2d、4d、7d、10d和14d,每组6只,以及免疫荧光组6只)。利用免疫共沉淀检测正常大鼠脊髓背角中ERK与TRPV4的相互联系。利用免疫组织化学染色法,观察ERK与TRPV4的分布情况。制备CCD模型,利用western blot技术检测空白对照组及术后2d,4d,7d,10d及14d,手术侧及对侧脊髓背角ERK和TRPV4蛋白表达的变化。利用免疫荧光技术观察术后4d脊髓背角中ERK和TRPV4阳性细胞数目、神经元的形态及阳性神经元比率的变化。结果:CCD术后第2天至第10天,手术侧脊髓背角中ERK及TRPV4表达明显升高(P神经元细胞比率均高于非手术侧(P神经元分布于灰质第Ⅰ至Ⅳ层,手术侧的神经元树突棘生成增加,胞体增大。结论:ERK-TRPV4通路参与了CCD后痛觉敏感的脊髓中枢敏化机制。

关键词：背根神经节持续受压痛觉敏感脊髓中枢敏化

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低能量激光对大鼠背根神经节持续受压后TRPV4表达及痛觉敏感的影响

低能量激光对大鼠背根神经节持续受压后TRPV4表达及痛觉敏感的影响

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作者：洪艺根山东大学

学位级别：硕士

研究背景神经病理性疼痛（neuropathic pain,NP）是指由直接影响躯体感觉功能的病损或相关的疾病引起的疼痛,其病程反复,难以治愈,是一个全球性的健康问题,涉及全球6.9%～10%的人口。腰椎间盘突出导致的根性神经痛是最常见的神经病理性... 详细信息

研究背景神经病理性疼痛（neuropathic pain,NP）是指由直接影响躯体感觉功能的病损或相关的疾病引起的疼痛,其病程反复,难以治愈,是一个全球性的健康问题,涉及全球6.9%～10%的人口。腰椎间盘突出导致的根性神经痛是最常见的神经病理性疼痛之一,通常伴有超敏和痛觉敏感症状,中枢敏化是NP的重要发病机制。大鼠背根神经节持续受压模型（chronic compression of the dorsal root ganglion,CCD）能较好地模拟神经受压的病理改变,具有操作简单、成功率高的优点,能够触发稳定的自发性和诱发性疼痛症状。瞬时感受器电位离子通道中的香草素受体亚家族4（transient receptor potentialvanilloid 4,TPRV4）属于非选择性的阳离子通道的一种,广泛分布于神经系统中,可在肺、肾、睾丸、皮肤、脊髓等多种组织里发现,多种理化性质（如低渗、机械变形、高温、炎症介质、细胞内外Ca2+浓度变化）可激活该通道,参与调节神经细胞的多种生物学功能,包括信号传导、细胞生长与调控等。低能量激光治疗（low level laser therapy,LLLT）现已广泛应用于物理医学和康复医学等临床领域中,对疼痛治疗效果良好,特别是在治疗肌肉骨骼疼痛方面效果明显,同时低能量激光对神经病理性疼痛亦有一定的疗效。低能量激光治疗具有加速损伤组织的愈合、减少局部炎症和水肿、恢复局部血供和抑制局部疼痛的作用。研究目的观察低能量激光对CCD大鼠痛觉敏感的影响,及脊髓背角内TRPV4表达与分布的变化,初步探讨低能量激光对CCD大鼠的镇痛作用机制。研究方法1.大鼠背根神经节持续受压模型制作选取健康雄性Wistar大鼠36只（每只体重180-200g,均购自山东大学动物实验中心）,分为空白组、CCD组、激光组各12只。CCD组与激光组大鼠L4/L5椎间孔内插入直径为0.63mm的L型钢棒。空白组术中不插入钢棒,余手术步骤各组均相同。2.低能量激光照射治疗激光组在CCD后第4天经皮肤给予L4/L5脊髓节段处810nm低能量激光治疗,输出功率150mw,10min/次,连续治疗7次。空白组与CCD组未给予激光治疗,三组饲养条件均一致。3.行为学测定-机械刺激缩爪反应阈值与热缩爪潜伏期测定于术前,术后第4、7、11天,分别测量各组大鼠机械刺激缩爪反应阈值和热缩爪潜伏期,比较各组大鼠机械痛阈和热痛阈的变化情况。4.脊髓背角TRPV4蛋白表达变化及阳性细胞分布检测术后11天,行为学检测之后将大鼠处死取材,利用western blot检测各组TRPV4在脊髓背角中蛋白表达的变化,利用免疫荧光技术检测各组TRPV4阳性细胞分布。结果1.大鼠CCD术后机械痛与热痛阈变化与空白组相比,CCD组大鼠术后第4天、7天、11天,机械痛阈和热痛阈均降低（P＜0.01）。与CCD组相比,激光组术后第7天、11天,机械痛阈和热痛阈显著增高（P＜0.01）。2.脊髓背角TRPV4蛋白表达变化及阳性细胞分布术后11天,与空白组相比较,CCD组大鼠脊髓背角中TRPV4表达显著上调（P＜0.01）,TRPV4阳性细胞数目升高（P＜0.01）;激光组脊髓背角TRPV4的蛋白表达较CCD组显著下调（P＜0.01）,TRPV4阳性细胞数目降低（P＜0.01）。结论低能量激光可能通过影响脊髓背角中TRPV4蛋白表达缓解CCD后所致的痛觉敏感。

关键词：低能量激光背根神经节持续受压痛觉敏感 TRPV4

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