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细胞内胆固醇清除的实验研究

南京医科大学学报(自然科学版) 1984年第4期 232-234+315-316页

作者：刘国庆蔡海江陈琪黄曼倩陈秀英李伍庆南京医学院病理生理教研室

作者等通过研究发现:牛血清白蛋白(BSA)以及人和牛的去脂蛋白血清(LPDS)都具有相似的促进细胞胆固醇清除的能力,而且这种能力与浓度有关。实验还表明:在不同时间加入db-cAMP,对皮肤纤维母细胞的胆固醇清除率有不同作用,若同时加入则抑... 详细信息

作者等通过研究发现:牛血清白蛋白(BSA)以及人和牛的去脂蛋白血清(LPDS)都具有相似的促进细胞胆固醇清除的能力,而且这种能力与浓度有关。实验还表明:在不同时间加入db-cAMP,对皮肤纤维母细胞的胆固醇清除率有不同作用,若同时加入则抑制胆固醇清除,如提前24小时加入则胆固醇清除率增加近两倍,作者等对此进行了讨论。

关键词：胆固醇清除纤维母细胞

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类植物乳杆菌的耐酸、耐胆盐及降胆固醇特性

微生物学报 2009年第9期49卷 1176-1179页

作者：刘长建刘秋姜波大连民族学院生命科学学院大连116600

【目的】研究了类植物乳杆菌Ⅱ32的酸、胆盐耐受性和胆固醇去除能力,并通过菌株生长和胆固醇去除的关系探讨可能的机理。【方法】菌株Ⅱ32生长在高胆固醇MRS培养基中,胆固醇的检测通过气相色谱法。检测菌株在不同生长阶段对胆固醇的去... 详细信息

【目的】研究了类植物乳杆菌Ⅱ32的酸、胆盐耐受性和胆固醇去除能力,并通过菌株生长和胆固醇去除的关系探讨可能的机理。【方法】菌株Ⅱ32生长在高胆固醇MRS培养基中,胆固醇的检测通过气相色谱法。检测菌株在不同生长阶段对胆固醇的去除情况。【结果】菌株Ⅱ32具有酸耐受性、胆盐耐受性和一定的胆固醇清除能力。菌株在pH2.0培养2h后仍能达到104cfu/mL;加胆盐(0.3%～0.4%)对菌株生长量达到OD值0.6的时间延迟在0.5h以内;热杀死的和休眠的细胞能去除很少的胆固醇,分别是5.64、5.90mg/g细胞干重,而生长的细胞去除的胆固醇达到16.98mg/g细胞干重。另外,研究表明胆固醇去除与菌体的生长有一定的相关性。【结论】菌株Ⅱ32去除胆固醇可能的机理是菌体对胆固醇的吸附及菌体在生长过程中对胆固醇的吸收利用,为此该菌株具有添加到食品中来降低血液胆固醇的潜能。

关键词：类植物乳杆菌酸耐受性胆盐耐受性胆固醇清除

冷刺激通过BAT中mTORC1-SREBP2-PCSK9通路介导血脂代谢和动脉粥样硬化进程的机制研究

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冷刺激通过BAT中mTORC1-SREBP2-PCSK9通路介导血脂代谢和动脉粥样...

作者：胡嘉怡山东大学

学位级别：硕士

研究背景根据WHO的卫生统计公告,动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)相关心血管疾病已成为世界第一位死因。因此,探究AS的预防和治疗具有重要意义。AS是多因素作用所致,最重要的危险因素是血脂异常,而这些成分的改变可由环境或遗传因素... 详细信息

研究背景根据WHO的卫生统计公告,动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)相关心血管疾病已成为世界第一位死因。因此,探究AS的预防和治疗具有重要意义。AS是多因素作用所致,最重要的危险因素是血脂异常,而这些成分的改变可由环境或遗传因素导致。有学者提出,气温与心梗和脑卒中等急性心血管事件有明显的负相关性。而低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDLC)作为AS的重要致病因素也存在显著季节差异。血脂水平的这一季节波动性现象,为深入研究寒冷致心血管事件增高的可能机制提供新的思路。但冷刺激或者低温诱导的心血管事件是如何发生,具体机制仍不清楚。LDLC代谢的关键因素之一是低密度脂蛋白受体(Low density lipoprotein receptor,LDLR),而前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶 kexin9 型(Proprotein convertase subtilisin kexin type 9,PCSK9)作为LDLR的分子伴侣,抑制LDLR的再循环,在脂质代谢中发挥了重要作用,也成为了临床上降脂治疗的新靶点。我们发现与夏季相比,冬季时患者血浆PCSK9水平明显增加,说明PCSK9水平很可能与寒冷环境密切相关。甾醇调节元件结合蛋白(Sterol regulatory element binding proteins,SREBP)是一类转录因子,其亚型SREBP2对胆固醇合成具有相对特异性,在调节胆固醇稳态中起到了核心作用。LDLR和PCSK9 mRNA的表达均受SREBP2调节,但二者是如何协调作用调节胆固醇摄取和流出仍然未知。温度还与脂肪代谢变化密切相关。脂肪组织储存了人体50%以上的胆固醇,是人体重要代谢器官,主要分为白色脂肪组织(White adipose tissue,WAT)和棕色脂肪组织(Brown adipose tissue,BAT),寒冷条件下激活的脂肪代谢产热主要由BAT完成。脂肪组织与血脂的相关性一直备受关注,有证据表明,冷刺激活化的BAT可以清除循环中的TG、改善胰岛素抵抗、参与血脂水平调节,对代谢性疾病的预防和治疗可能具有重要作用。但也有发现证实,应激可以诱导BAT分泌大量炎性因子白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6),影响代谢并导致肥胖。因此,BAT是敌是友,还需更加深入地研究探讨。我们在前期研究中发现,冷刺激可活化动脉粥样硬化动物模型(ApoE-/-小鼠)的BAT,TC和LDL-C升高;有趣的是,正常小鼠的TC却无明显改变,而LDL-C则呈现下降趋势。导致这种看似“矛盾”现象背后的机制尚未阐明。我们推测,在不同病理生理状态下,不同脂肪组织在冷刺激下会有不同的血脂清除力。本课题研究了不同温度下人体和动物模型中PCSK9表达及在AS进程中作用,通过细胞实验证实冷刺激通过棕色脂肪细胞中mTORC1-SERBP-PCSK9通路介导胆固醇清除,探索了寒冷中AS疾病高发的分子机制并提供新的防治靶点。研究目的1.探讨冷刺激和血脂浓度对代谢及AS进程的影响;2.探讨冷刺激后不同脂肪组织中PCSK9的变化情况;3.探讨冷刺激下棕色脂肪细胞中PCSK9的调节通路研究方法1.研究对象体内PCSK9含量检测收取正常人群与冠心病患者于冬季(1-3月)和夏季(7-9月)的病例信息和血液标本,匹配基线进行分组,通过ELISA检测试剂盒分别检测各组血浆PCSK9含量。2.构建小鼠冷刺激模型选取6-8周龄雄性C57BL/6小鼠(n=20)及ApoE-/-小鼠(n=20),置于18℃环境适应1周后转入4℃环境继续刺激7周,接受高脂高胆固醇饮食喂养(0.25%胆固醇+15%脂肪)8周,构建冷刺激模型。对照同样选取6-8周龄雄性C57BL/6小鼠(n=20)及ApoE-/-小鼠(n=20),直接置于30℃热中性环境8周。3.探讨冷刺激对C57BL/6及ApoE-/-小鼠非寒颤产热(NST)的影响使用小动物呼吸代谢仪测量小鼠的基础代谢率及皮下注射去甲肾上腺素(每10g体重0.05ml的0.2mg/ml去甲肾上腺素)后的呼吸代谢参数,衡量BAT活性。4.探讨冷刺激对C57BL/6及ApoE-/-小鼠脂肪组织棕色化的影响称量各组小鼠BAT质量。对各组小鼠VAT及BAT冰冻切片进行HE和免疫组化染色,观察每视野下脂肪细胞数量、体积大小和UCP-1的表达情况。5.探讨冷刺激对C57BL/6及ApoE-/-小鼠摄食量、体重、身长、体质指数(BMI)、葡萄糖耐量的影响6.探讨冷刺激对C57BL/6及ApoE-/-小鼠脂降解水平的影响留取各组小鼠VAT,一部分进行组织匀浆,使用ELISA检测试剂盒测量cAMP含量;另一部分分离消化,置于加入或不加异丙肾上腺素的脂肪细胞孵育

关键词：冷刺激胆固醇清除 PCSK9 血脂棕色脂肪

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菠菜中降胆固醇乳酸菌的筛选及鉴定

食品与生物技术学报 2010年第6期29卷 937-940页

作者：刘长建姜波安晓雯赵轶男刘秋大连民族学院生命科学学院辽宁大连116600

作者使用4种培养基从菠菜中共分离到乳酸菌33株。通过硫磷铁比色法,测定每株乳酸菌对培养基中胆固醇的清除能力在4.82%～47.58%,清除率在40%以上的有9株,而乳酸菌MB65的胆固醇清除率最高(47.58%)。通过对乳酸菌MB65的形态观察、生理生... 详细信息

作者使用4种培养基从菠菜中共分离到乳酸菌33株。通过硫磷铁比色法,测定每株乳酸菌对培养基中胆固醇的清除能力在4.82%～47.58%,清除率在40%以上的有9株,而乳酸菌MB65的胆固醇清除率最高(47.58%)。通过对乳酸菌MB65的形态观察、生理生化试验、糖发酵试验及16S rDNA序列分析等研究,鉴定MB65为干酪乳杆菌。

关键词：菠菜乳酸菌分离鉴定胆固醇清除

雉鸡乳酸菌DCe13的分离及降胆固醇特性的研究

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食品与发酵工业 2015年第11期41卷 47-51页

作者：刘长建刘秋孙军德姜波于基成齐小辉沈阳农业大学土壤与环境学院辽宁沈阳110866 大连民族大学生命科学学院辽宁大连116600

从雉鸡肠道分离得到1株生长良好的乳酸菌DCe13,菌株革兰氏阳性、接触酶阴性.经系统发育和recA基因特定片段分析,结合菌落形态、细胞形态、生化反应试验,确定菌株DCe13为植物乳杆菌.菌株DCe13培养36 h,乳酸含量9.08 μg/mL,而pH值下降为4... 详细信息

从雉鸡肠道分离得到1株生长良好的乳酸菌DCe13,菌株革兰氏阳性、接触酶阴性.经系统发育和recA基因特定片段分析,结合菌落形态、细胞形态、生化反应试验,确定菌株DCe13为植物乳杆菌.菌株DCe13培养36 h,乳酸含量9.08 μg/mL,而pH值下降为4.7.菌株具有酸耐受性、胆盐耐受性和一定的胆固醇清除能力.菌株在pH2.0培养2h后仍能达到7.9×10^4CFU/mL;5 h内,加胆盐（0.3％～0.4％）对菌株生长量（OD值）没有影响.胆固醇去除量与菌体的生长呈正相关,培养48 h,单位细胞于重能清除最大的胆固醇量为22.71.μg/mg.另外,对比试验中生长细胞单位干重去除的胆固醇量达到10.50 μg/mg,但热杀死和休眠细胞能去除很少的胆固醇,分别是3.59 μg/mg和8.26 μg/mg.菌株DCe13去除胆固醇可能的机理是菌体对胆固醇的吸附及菌体在生长过程中对胆固醇的吸收利用.研究表明该菌株具有添加到食品中降低血液胆固醇的潜能.

关键词：雉鸡 16S rRNA系统发育分析酸耐受性胆盐耐受性胆固醇清除

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腊肠中降胆固醇乳酸菌的筛选及鉴定

中国酿造 2011年第8期30卷 35-37页

作者：刘长建蒋本国姜波闫建芳刘秋大连民族学院生命科学学院辽宁大连116600

通过硫磷铁比色法,该试验从腊肠中共分离到具有降胆固醇能力的乳酸菌35株,胆固醇的清除能力为9.65%～48.23%,清除率在40%以上的有11株,而乳酸菌HC12的胆固醇清除率最高(48.23%)。通过对乳酸菌HC12的形态观察、生理生化试验、糖发酵试验... 详细信息

通过硫磷铁比色法,该试验从腊肠中共分离到具有降胆固醇能力的乳酸菌35株,胆固醇的清除能力为9.65%～48.23%,清除率在40%以上的有11株,而乳酸菌HC12的胆固醇清除率最高(48.23%)。通过对乳酸菌HC12的形态观察、生理生化试验、糖发酵试验及16S rDNA序列分析等研究,鉴定HC12为干酪乳杆菌。

关键词：腊肠乳酸菌分离鉴定胆固醇清除

乳酸菌MR25的筛选、鉴定及降胆固醇益生特性

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中国食品学报 2011年第8期11卷 42-46页

作者：刘长建蒋本国姜波刘秋崔玉波大连民族学院生命科学学院辽宁大连116600

通过气相色谱法,从萝卜干中共分离到31株具有清除培养基中胆固醇能力的乳酸菌,其中乳酸菌MR25的胆固醇清除率最高（42.48%）。通过形态观察、生理生化试验、糖发酵试验等,鉴定MR25为米酒乳杆菌。乳酸菌MR25具有酸耐受性、胆盐耐受性和... 详细信息

通过气相色谱法,从萝卜干中共分离到31株具有清除培养基中胆固醇能力的乳酸菌,其中乳酸菌MR25的胆固醇清除率最高（42.48%）。通过形态观察、生理生化试验、糖发酵试验等,鉴定MR25为米酒乳杆菌。乳酸菌MR25具有酸耐受性、胆盐耐受性和一定的胆固醇降低能力。在pH2.0、培养2h条件下菌株浓度仍能达到106cfu/mL。加胆盐（0.3%~0.4%）对菌株生长量（OD值）的影响很小。热杀死和休眠的细胞能去除很少的胆固醇,分别是3.26mg/mL和8.42mg/mL,而生长的细胞去除的胆固醇达到44.06mg/mL。胆固醇去除与菌体的生长有一定的相关性。乳酸菌MR25去除胆固醇的机理是菌体对胆固醇的吸附作用,以及菌体在生长过程中对胆固醇的吸收利用。

关键词：乳酸菌分离鉴定酸耐受性胆盐耐受性胆固醇清除

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具有降胆固醇功能的益生菌的筛选

中国微生态学杂志 2012年第10期24卷 883-885页

作者：杨晶邹积宏关力王涛黑龙江农业职业技术学院黑龙江佳木斯154007 黑龙江大学黑龙江哈尔滨150080

采用半选择性培养基MRS从传统发酵食品中筛选出2株细菌,经鉴定一株为双歧杆菌,另一株为乳酸杆菌。按照益生菌标准对上述2株菌的耐酸、耐胆盐、抗药性、抑菌等性能进行评价,结果表明其均可作为益生菌用于降胆固醇产品。

关键词：降胆固醇胆固醇清除乳酸菌分离鉴定

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蒙氏肠球菌Sna的抗氧化及降胆固醇特性

食品安全质量检测学报 2017年第9期8卷 3445-3449页

作者：王雅君刘长建周玉荣袁英博大连民族大学生命科学学院大连116600

目的从雉鸡嗉囊分离得到一株生长良好的乳酸菌Sna,测试其抗氧化活性和降胆固醇的能力和模式。方法菌株鉴定通过菌落、菌体形态、生化试验和16S rRNA序列分析。抗氧化和降胆固醇作用通过体外实验完成。结果乳酸菌Sna确认为蒙氏肠球菌。... 详细信息

目的从雉鸡嗉囊分离得到一株生长良好的乳酸菌Sna,测试其抗氧化活性和降胆固醇的能力和模式。方法菌株鉴定通过菌落、菌体形态、生化试验和16S rRNA序列分析。抗氧化和降胆固醇作用通过体外实验完成。结果乳酸菌Sna确认为蒙氏肠球菌。当菌体浓度为10~9 CFU/mL时,菌株Sna对羟自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为78.8%、34.9%和43.3%。单位细胞干重去除胆固醇量与菌体生长有一定的相关性,在培养36 h单位细胞干重能清除最大的胆固醇量5.14μg/mg。对比试验显示生长的细胞单位干重去除的胆固醇量达到4.96μg/mg,但热杀死的和休眠的细胞去除胆固醇量分别为4.39μg/mg和4.23μg/mg。结论菌株Sna具有抗氧化作用和胆固醇的清除能力;菌株Sna去除胆固醇可能的机制是菌体对胆固醇的吸附及菌体在生长过程中对胆固醇的吸收利用。该菌株具有添加到食品中来抵抗氧化作用和降低血液胆固醇的潜能。

关键词：雉鸡蒙氏肠球菌酸耐受性胆盐耐受性抗氧化作用胆固醇清除