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Peroxiredoxin-1在胃癌腹膜转移中的作用及相关机制的研究

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Peroxiredoxin-1在胃癌腹膜转移中的作用及相关机制的研究

作者：高国锋山西医科大学

学位级别：硕士

【背景】胃癌是我国目前最常见恶性肿瘤之。腹膜转移是其最常见的转移形式，同时也是胃癌根治术后最常见的复发形式，是影响胃癌治疗效果的关键因素之【1-2】，也是导致胃癌患者死亡的主要原因之【3】。目前，胃癌腹膜转移的机制尚不清... 详细信息

【背景】胃癌是我国目前最常见恶性肿瘤之。腹膜转移是其最常见的转移形式，同时也是胃癌根治术后最常见的复发形式，是影响胃癌治疗效果的关键因素之【1-2】，也是导致胃癌患者死亡的主要原因之【3】。目前，胃癌腹膜转移的机制尚不清楚，研究表明可能与多个癌基因、抑癌基因以及氧化还原状态等有关【4】。近年来，随着胃癌根治术的开展与成熟，其局部复发率有所下降，但是其死亡率任然居于各种恶性肿瘤死亡率的前列。相关统计表明：约25%的胃癌患者在术前或者术中被诊断存在胃癌的腹膜转移，从而失去了手术治疗的最佳机会，进展期胃癌即使行胃癌根治术治疗，术后任然有大约40%-60%的患者会发生腹膜转移。因此，有必要对胃癌腹膜转移的相关因素进行深入研究以揭示其发生和发展的机制，进而有效地指导临床治疗和改善预后。 Peroxiredoxin-1(Prx-1)是新近发现的类抗氧化物酶Peroxiredoxins家族中的种。以往对Prx-1的研究主要是其在抗氧化方面的作用，表现为Prx-1对活性氧族（activated oxygen species,AOS）的清除，保护细胞免受活性氧造成的损伤。近年来的研究发现：Prx-1与多种肿瘤细胞的增殖，分化和转移等生物学行为密切相关。研究表明：Prx-1在多种肿瘤中高表达，而抑制Prx-1的表达，可导致肿瘤增殖受抑和放疗增敏作用，因此，初步推断Prx-1与肿瘤的发生、发展密切相关。但Prx-1与人类胃癌的腹膜转移是否相关目前尚不清楚。通过比较蛋白组学对胃癌细胞系（SGC823）和腹膜高转移潜能的胃癌细胞系(SGC7901)进行比较，寻找两种细胞系之间的差异蛋白。研究发现：Prx-1为两种细胞系之间的差异蛋白之，在腹膜高转移潜能胃癌细胞系(SGC7901)中表达上调。进步通过Western blot免疫印记法和免疫组化法在细胞水平和临床标本水平进行检验，实验结果表明：较胃癌细胞系(SGC823)，腹膜高转移潜能的胃癌细胞系(SGC7901)中Prx-1的表达显著增强;胃癌腹膜转移灶与癌旁正常组织、胃癌原发灶、淋巴结转移灶两两比较，其阳性率结果有差异。因此，初步推断，Prx-1在胃癌的腹膜转移中可能发挥重要作用。【目的】 1、应用比较蛋白组学寻找胃癌细胞系(SGC823)和腹膜高转移潜能胃癌细胞系(SGC7901)之间的差异性蛋白。 2、检验胃癌细胞系（SGC823）和腹膜高转移潜能胃癌细胞系(SGC7901)中Prx-1的表达情况。 3、研究Prx-1在人类胃癌腹膜转移灶中的表达情况，比较Prx-1在胃癌原发灶，胃癌腹膜转移灶，淋巴结转移灶及癌旁正常胃黏膜组织中的表达情况，探究Prx-1在人类胃癌腹膜转移中的机制及其与患者病理参数之间的关系。【方法】 1、细胞总蛋白的制备和双向电泳：胃癌细胞系(BGC823)和腹膜高转移潜能胃癌细胞系(SGC7901)在温度37℃、CO2浓度5%的培养箱中培养48小时，取对数生长期细胞制备总蛋白;用Bradford法检测蛋白质浓度;用提取400ug细胞总蛋白行双向电泳;用24cm、PH值为4-7、固相PH梯度（IPG）胶条泡胀上样。 2.电泳凝胶图像分析：银染后的电泳凝胶采用ImageScanner图像扫描仪和Imagemaster图像分析软件进行扫描和分析。同等条件下，对两个细胞系的总蛋白样品进行3次双向电泳和图像分析，在同种细胞系的蛋白质电泳图谱中挑选蛋白质点清晰的图像作为参照，与另外两次的电泳图像进行匹配。最后将3次电泳所得的蛋白质点图谱在Imagemaster软件中创建平均胶。以（BGC823）细胞系的平均胶为参照胶与（SGC7901）细胞系的平均胶行两两匹配比较。以蛋白质表达水平（相对体积）增加2倍及2倍以上作为差异点，并把这些点从凝胶中切割下来进步分析。 3、蛋白质质谱分析：取双向电泳凝胶上表达差异的蛋白质点凝胶块进行胶内酶切，并提取肽段。取α-氰基-4-基肉桂酸（α-CHCA）5mg/ml的基质溶解液0.5ul加入到金属样品板点样孔内，然后加入含有0.1%三氟乙酸（TFA）的水-乙腈混合液0.5ul溶解肽段提取物。在室温下干燥样本。用基质辅助激光解析离子化飞行时间串联质谱仪4700型分析肽质量指纹图谱和串联质谱（MS/MS）。每个点样孔每种光谱激光发射500次，收集相对分子质量/电荷比值（质荷比）为800-3200的峰谱。然后选取定数量的肽段进行碰撞诱导解离（CID）串联质谱分析，激光频率为200Hz。 4、Western blot蛋白印迹（1）：将准备好的细胞用4℃预冷PBS液洗涤，重复3次，将PBS弃尽。每瓶细胞加入400μ l含PMSF的裂解液，在冰上裂解30分钟。裂解完成后，用刮棒将细胞刮于培养瓶侧，用枪将细胞碎片和裂解液移至1.5ml离心管内。离心后提取上清

关键词：胃癌胃癌腹膜转移 Prx-1

半夏泻心汤含药血清对人胃癌腹膜转移细胞凋亡及侵袭的影响

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半夏泻心汤含药血清对人胃癌腹膜转移细胞凋亡及侵袭的影响

作者：付航甘肃中医药大学(原名：甘肃中医学院)

学位级别：硕士

目的:通过半夏泻心汤含药血清干预人胃癌腹膜转移细胞GC9811-P,研究被干预后细胞的凋亡,侵袭及TGF-β1、VEGFm RNA和蛋白的表达水平。探讨半夏泻心汤干预胃癌腹膜转移的机制,为中医药治疗肿瘤提供实验依据。方法:4只家兔分别灌服半夏泻... 详细信息

目的:通过半夏泻心汤含药血清干预人胃癌腹膜转移细胞GC9811-P,研究被干预后细胞的凋亡,侵袭及TGF-β1、VEGFm RNA和蛋白的表达水平。探讨半夏泻心汤干预胃癌腹膜转移的机制,为中医药治疗肿瘤提供实验依据。方法:4只家兔分别灌服半夏泻心汤和生理盐水,无菌条件下心脏采血,将含药血清配制成25μL/m L、50μL/m L、100μL/m L的浓度干预GC9811-P细胞,用RTCA检测血清干预后细胞的生长及迁移,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,激光共聚焦显微镜下观察经罗丹明123染色后的各组细胞数目及线粒体膜电位变化,RT-PCR检测TGF-β1、VEGFm RNA的表达,Western blot检测TGF-β1、VEGF蛋白的表达水平。结果:根据实验结果显示,与空白血清组相比,GC9811-P细胞经过不同浓度的半夏泻心汤含药血清(25、50、100μL/m L)处理后,细胞增殖受到明显抑制。RTCA实时动态检测表明,对照组(SF组),即下室中没加血清的,GC9811-P细胞基本没有发生迁移,其它经过不同浓度半夏泻心汤含药血清(0、3.1、6.2、12.5、25、50、100μL/m L)干预的各组GC9811-P细胞均发生了迁移,至23h时,迁移能力无明显差异(P>0.05),23h后,25、50、100μL/m L的半夏泻心汤含药血清能显著抑制其迁移能力。而通过细胞流式图可以看出与空白血清组相比,半夏泻心汤含药血清低剂量组(25 L/m L)、中剂量组(50μL/m L)、高剂量组(100μL/m L)的细胞位于G2/M、S期的百分比降低,随着药物浓度的增大,效应越明显。激光共聚焦显微镜图片看出与空白血清组相比,各个剂量组细胞内荧光强度减弱,线粒体膜电位降低,且药物血清浓度越高,强度越弱,膜电位越低。RT-PCR及Western blot结果显示,半夏泻心汤含药血清可以下调VEGF的m RNA的表达,随着半夏泻心汤含药血清浓度的升高,TGF-β1和VEGF的蛋白表达均下降。结论:半夏泻心汤含药血清可以抑制人胃癌腹膜转移细胞GC9811-P的凋亡和侵袭,并呈明显的效应-剂量关系,其机制可能与抑制TGF-β1和VEGF的分泌有关。

关键词：半夏泻心汤含药血清胃癌腹膜转移凋亡侵袭

血清CA125对胃癌腹膜转移的临床诊断价值

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血清CA125对胃癌腹膜转移的临床诊断价值

作者：崔丹丹吉林大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在探讨术前血清CA125对胃癌腹膜转移的临床诊断价值,以及联合CEA、CA199、CA242和AFP检测的诊断价值,为胃癌腹膜转移的诊断、疗效监测以及预后评估提供依据。方法:本研究的数据选取2019年1月-2020年10月于吉林大学中日联... 详细信息

目的:本研究旨在探讨术前血清CA125对胃癌腹膜转移的临床诊断价值,以及联合CEA、CA199、CA242和AFP检测的诊断价值,为胃癌腹膜转移的诊断、疗效监测以及预后评估提供依据。方法:本研究的数据选取2019年1月-2020年10月于吉林大学中日联谊医院胃肠外科接受胃癌手术的病人,按照纳入标准及排除标准,共收集188例。根据是否发生腹膜转移将患者分为胃癌腹膜转移癌组和无腹膜转移癌组。其中胃癌腹膜转移癌组患者38例,无腹膜转移癌组患者150例。收集患者入院后第二天的血清肿瘤标志物水平及其它临床病理资料。对比胃癌腹膜转移癌组患者和无腹膜转移癌组患者的肿瘤标志物水平,用中位数、四分位数表示并运用非参数检验(MannWhitney U检验)进行差异检验。应用卡方检验分析并探讨临床病理学资料及术前肿瘤标志物水平与胃癌腹膜转移的相关性。对具有明显统计学意义的指标进行多因素Logistic回归分析,进一步确定胃癌腹膜转移的独立危险因素。并采用受试者工作特征(ROC)曲线进行分析,计算ROC曲线下面积AUC,评估其对胃癌腹膜转移的预测效能。结果:1.本研究中胃癌腹膜转移癌组患者术前5种血清肿瘤标志物的水平明显高于无腹膜转移癌组,差异有统计学意义(P0.05)。而手术方式、肿瘤的分化程度、临床分期、血清CA125、CA199、CA242、CEA、AFP、腹水在胃癌腹膜转移癌组与无腹膜转移癌组,其差异具有统计学意义(P胃癌腹膜转移的独立危险因素。3.对影响血清CA125水平的因素进行分析,结果显示肿瘤部位、肿瘤最大径、分化程度、临床分期、腹膜转移的程度及有无腹水对CA125水平有影响(P>0.05),而年龄、性别对CA125水平无显著关性(P>0.05)。4.术前的血清肿瘤标志物及腹水对胃癌腹膜转移的诊断价值分析结果显示:血清CA125对胃癌腹膜转移的诊断价值最高(AUC=0.964),AFP对胃癌腹膜转移的诊断价值最低(AUC=0.496)。所有肿瘤标志物联合检测的诊断价值高于任何单一的肿瘤标志物的水平。血清CA125联合腹水对胃癌腹膜转移具有较高的诊断价值(AUC=0.977)。结论:1.本研究中胃癌腹膜转移癌组患者术前的血清肿瘤标志物水平高于无腹膜转移癌组患者的肿瘤标志物水平,差异有统计学意义(P胃癌腹膜转移,同时联合检测肿瘤标志物可提高对胃癌腹膜转移的临床诊断价值。***125及腹水是胃癌腹膜转移的独立危险因素,两者联合检测有助于提高预测胃癌腹膜转移的效能。

关键词： CA125 肿瘤标志物胃癌腹膜转移诊断价值

CA125和腹水对胃癌腹膜转移的诊断价值与不同方法治疗下预后的研究

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CA125和腹水对胃癌腹膜转移的诊断价值与不同方法治疗下预后的研究

作者：周文考中国医科大学

学位级别：硕士

目的:胃癌腹膜转移是胃癌最常见的转移方式,也是胃癌病人死亡的主要原因。事实上,胃癌腹膜转移病人术前诊断困难,术前影像学检查是其重要的检测方法之一,往往都是腹壁上存在较大转移灶,腹膜转移发现时间较晚,届时病人已经出现腹水、腹... 详细信息

目的:胃癌腹膜转移是胃癌最常见的转移方式,也是胃癌病人死亡的主要原因。事实上,胃癌腹膜转移病人术前诊断困难,术前影像学检查是其重要的检测方法之一,往往都是腹壁上存在较大转移灶,腹膜转移发现时间较晚,届时病人已经出现腹水、腹胀等其他相关症状。近年来,有报道胃癌病人术前CA125及腹水对胃癌腹膜转移的临床预测有较高的价值。本次回顾性研究主要以CA125及腹水进行联合检测来评估胃癌腹膜转移及探讨胃癌腹膜转移病人行手术及术后化疗的意义。方法:本次研究回顾性分析了2013年1月至2017年12月份于中国医科大学肿瘤医院(暨辽宁省肿瘤医院)接受胃癌手术病人共921人。收集病人术前血清肿瘤标志物水平及其他相关临床病理学资料。分析并探讨术前肿瘤标志物水平及其他临床病理学资料与胃癌腹膜转移的相关性。回顾性分析胃癌腹膜转移病例89例,收集有效随访病例的相关术前临床和病理学资料、术中探查所见转移方式、手术方式选择、术后处理措施等数据。结果:与胃癌腹膜转移相关的临床病理学资料有腹水(P≦0.001)、肿瘤浸润浆膜与否(P≦0.001)、淋巴结转移与否(P≦0.001);与胃癌腹膜转移相关的肿瘤标志物有CA125(P≦0.001)、CA72-4(P=0.009)。去除混杂因素分析后显示CA125(OR值=12.281,95%可信区间0.539-40410,P=0.006)、腹水(OR=9.489,95%可信区间1.655-54.760)是胃癌腹膜转移的独立危险因素。通过对病人临床病理学特征进行单因素分析显示,手术方式及化疗、腹膜转移方式、Borrmann分型对胃癌腹膜转移的预后生存具有显著性影响。结论:术前CA12-5及腹水对于预测胃癌腹膜转移的临床诊断价值较高,两者的串联联合检测可显著提高胃癌腹膜转移诊断的敏感性,所以对于术前CA125大于正常值的胃癌病人应行腹部超声检查,评估病人是否存在腹水。若两者同时存在应在术前进行腹腔镜探查,若存在腹膜种植转移,无论病人转移程度如何,如果没有绝对手术禁忌症,建议行胃癌切除D1淋巴结清扫,术后配合化疗。

关键词：胃癌腹膜转移 CA125 腹水预后生存回顾性文章胃癌切除术化疗

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胃癌腹膜转移相关基因的研究进展

中国现代医药杂志 2018年第7期20卷 96-100页

作者：邓伟王学红芦永福青海大学青海西宁810016 青海大学附属医院消化内科

胃癌（Gastric Carcinoma）是全球癌症相关死亡主要原因之一,晚期患者超过一半最终死于腹腔复发,并且腹膜转移患者的5年生存率仅为2%[1]。腹膜转移的发展是一个多步骤过程,首先从原发性肿瘤中分离癌细胞,进行到游离肿瘤细胞附着于腹膜... 详细信息

胃癌（Gastric Carcinoma）是全球癌症相关死亡主要原因之一,晚期患者超过一半最终死于腹腔复发,并且腹膜转移患者的5年生存率仅为2%[1]。腹膜转移的发展是一个多步骤过程,首先从原发性肿瘤中分离癌细胞,进行到游离肿瘤细胞附着于腹膜间皮细胞,使间皮细胞回缩以暴露基底膜,附着于基底膜,细胞外基质的降解,癌细胞的增殖,最后血管生成[2],大致可以概括为粘附-降解-移动-血管生成过程.

关键词：胃癌腹膜转移血管生成钙粘蛋白细胞外基质肿瘤细胞胃癌细胞相关基因

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胃癌腹膜转移的中西医研究进展

中医肿瘤学杂志 2022年第1期4卷 82-86页

作者：王贝贝栗书元山西省长治市中医医院山西长治046013

胃癌腹膜转移是胃癌常见的转移方式之一,往往初诊或根治术后即发生腹膜转移,且分期越晚,腹膜转移程度越高,生存期越短,预后越差。西医认为腹膜微环境为游离癌细胞提供了生存、转移条件,在治疗上以化疗、放疗、腹腔热灌注化疗、手术为主... 详细信息

胃癌腹膜转移是胃癌常见的转移方式之一,往往初诊或根治术后即发生腹膜转移,且分期越晚,腹膜转移程度越高,生存期越短,预后越差。西医认为腹膜微环境为游离癌细胞提供了生存、转移条件,在治疗上以化疗、放疗、腹腔热灌注化疗、手术为主。中医认为正虚、邪毒是发生腹膜转移的理论基础,治疗上以扶正祛邪为主旨。在化疗基础上联合中医药可提高临床疗效、改善生活质量。

关键词：胃癌腹膜转移中西医

胃癌腹膜转移患者行胃癌切除术及术后化疗的生存分析

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现代肿瘤医学 2019年第21期27卷 3858-3861页

作者：周文考赵国华吕武王越林杰辽宁省肿瘤医院(中国医科大学肿瘤医院)普通外科

目的:探讨胃癌腹膜转移患者行手术及术后化疗的意义。方法:回顾性分析胃癌腹膜转移病例89例,收集有效随访病例的相关术前临床和病理学资料、术中探查所见转移方式、手术方式、术后处理措施等数据。结果:通过对患者临床病理学特征进行单... 详细信息

目的:探讨胃癌腹膜转移患者行手术及术后化疗的意义。方法:回顾性分析胃癌腹膜转移病例89例,收集有效随访病例的相关术前临床和病理学资料、术中探查所见转移方式、手术方式、术后处理措施等数据。结果:通过对患者临床病理学特征进行单因素分析显示,手术方式(P=0.004)、化疗(P=0.003)、腹膜转移方式(P胃癌腹膜转移的预后生存具有显著性影响。结论:对于胃癌腹膜转移患者,无论患者转移程度如何,如果没有绝对手术禁忌证,建议行胃癌切除D1淋巴结清扫,术后配合化疗。

关键词：胃癌切除术术后化疗胃癌腹膜转移生存回顾性研究

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胃癌腹膜转移的实验诊断进展

中国实验诊断学 2012年第10期16卷 1954-1956页

作者：赵璐赵爱光上海中医药大学附属龙华医院上海200032

胃癌是消化道常见恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率居恶性肿瘤前列,而腹膜转移是胃癌最主要的复发转移方式之一,统计表明在进展期胃癌术后腹膜转移占40%-50%[1]。早期腹膜转移肿瘤在临床上并无特殊表现,当出现肠梗阻和腹水时治疗困难,预... 详细信息

胃癌是消化道常见恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率居恶性肿瘤前列,而腹膜转移是胃癌最主要的复发转移方式之一,统计表明在进展期胃癌术后腹膜转移占40%-50%[1]。早期腹膜转移肿瘤在临床上并无特殊表现,当出现肠梗阻和腹水时治疗困难,预后较差。因此对胃癌腹膜转移进行早期诊断或提高到亚临床水平,是提高胃癌总体疗效的关键。胃癌腹膜转移是一个由众多相关因子共同参与的复杂过程。目前关于胃癌腹膜转移机制尚未阐明,但较为公认的是＂种子土壤＂学说。

关键词：胃癌腹膜转移实验诊断腹膜转移肿瘤恶性肿瘤早期诊断转移方式总体疗效相关因子

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胃癌腹膜转移的治疗进展

中华胃肠外科杂志 2006年第5期9卷 464-466页

作者：李正荣詹文华中山大学附属第一医院胃肠胰外科中山大学胃癌诊治中心广州510080

临床上诊治的胃癌多为进展期胃癌，根治性手术之后的5年生存率仍然徘徊不前，其主要原因是术后肿瘤复发转移问题，其中约50％左右的患者存在腹膜复发转移。发生腹膜转移患者的疗效差，生存率低，因此，如何提高胃癌腹膜转移患者的治疗... 详细信息

临床上诊治的胃癌多为进展期胃癌，根治性手术之后的5年生存率仍然徘徊不前，其主要原因是术后肿瘤复发转移问题，其中约50％左右的患者存在腹膜复发转移。发生腹膜转移患者的疗效差，生存率低，因此，如何提高胃癌腹膜转移患者的治疗效果一直是学者们关注的问题。

关键词：胃癌腹膜转移治疗效果 5年生存率复发转移进展期胃癌根治性手术