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胀果甘草粗多糖及其纯化多糖对树突状细胞成熟和抗肿瘤作用的影响及机制

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中国药房 2024年第20期35卷 2453-2459页

作者：娜迪热木·肖克拉提俞永婷卢泳强周朝曦张丽丽丛媛媛新疆医科大学药学院乌鲁木齐830011

目的研究胀果甘草粗多糖(GiP)及其纯化多糖GiP-B1对荷瘤小鼠树突状细胞(DC)成熟和抗肿瘤作用的影响及机制。方法将体外培养的肝癌细胞H22荷瘤小鼠未成熟DC(imDC)分为对照组、肿瘤坏死因子α(TNF-α)组、GiP组及GiP-B1组,检测荷瘤小鼠成... 详细信息

目的研究胀果甘草粗多糖(GiP)及其纯化多糖GiP-B1对荷瘤小鼠树突状细胞(DC)成熟和抗肿瘤作用的影响及机制。方法将体外培养的肝癌细胞H22荷瘤小鼠未成熟DC(imDC)分为对照组、肿瘤坏死因子α(TNF-α)组、GiP组及GiP-B1组,检测荷瘤小鼠成熟DC(mDC)的细胞活力,表面标志物(CD11c、CD80、CD86、MHC-Ⅱ)阳性表达率,白细胞介素12p70(IL-12p70)及IL-4水平;通过荷瘤小鼠m DC与CD4~+T淋巴细胞共培养生成CD4-细胞毒性T细胞(CD4-CTL),检测刺激指数,CD4-CTL上清液中IL-12p70、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4、IL-10水平及对H22细胞的杀伤活性;检测共培养后荷瘤小鼠mDC中IL-12、IL-12受体(IL-12R)、信号转导和转录激活因子4(STAT-4)mRNA表达量,以及IL-12Rβ2蛋白表达量,核转录因子κB(NF-κB)p65、STAT-4蛋白磷酸化水平。结果与对照组比较,GiP组与GiP-B1组荷瘤小鼠mDC细胞活力、MHC-Ⅱ阳性表达率以及IL-12p70、IL-4水平均显著升高(P0.05)。共培养后刺激指数、IL-12p70、IFN-γ水平均显著升高(P<0.05),IL-4、IL-10(GiP组除外)水平均显著降低(P<0.05),对H22细胞的杀伤活性均显著增强(P<0.05);荷瘤小鼠m DC中IL-12、IL-12R(GiP组除外)、STAT-4 mRNA表达量,IL-12Rβ2蛋白表达量以及NF-κB p65、STAT-4蛋白磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。结论GiP及GiP-B1对荷瘤小鼠DC的成熟有较好的促进作用,能有效刺激CD4~+T细胞增殖并增强CD4-CTL的抗肿瘤活性,其作用机制可能与激活IL-12/NF-κB/STAT-4信号通路有关。

关键词：胀果甘草多糖树突状细胞 IL-12/NF-κB/STAT-4信号通路细胞毒性T淋巴细胞抗肿瘤

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胀果甘草多糖GiP-B1通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路激活巨噬细胞RAW 264.7

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天然产物研究与开发 2021年第12期33卷 2073-2081页

作者：丛媛媛依明·尕哈甫陈春丽娜迪热木·肖克拉提俞永婷新疆医科大学药学院乌鲁木齐830011

为研究胀果甘草多糖GiP-B1通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对巨噬细胞RAW 264.7免疫功能的影响,体外以TLR4干扰RNA(TLR4-siRNA)转染巨噬细胞RAW 264.724 h,用100μg/mL GiP-B1处理转染和未转染细胞,12 h后分别采用CCK-8和ELISA法检测GiP-B1对巨噬细胞RAW 264.7增殖和分泌炎症因子的影响,并采用RT-PCR和Western blot法检测GiP-B1对巨噬细胞TLR4及其信号通路下游基因MyD88、NF-κB p65、IκBα的mRNA和蛋白表达水平的影响。结果显示,与空白对照组比较,GiP-B1可显著提高巨噬细胞RAW 264.7的增殖,促进白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的分泌,上调TLR4、MyD88、NF-κB p65、IκBα的mRNA和蛋白表达量(P果表明,GiP-B1可活化TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,促进相关基因表达,使NF-κB进入细胞核调控相关细胞因子的转录水平,进而激活巨噬细胞的免疫功能。

关键词：胀果甘草多糖巨噬细胞 TLR4 MyD88 NF-κB

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胀果甘草多糖的分离纯化及其理化性质

华西药学杂志 2008年第4期23卷 448-450页

作者：热娜.卡斯木丛媛媛屠鹏飞新疆医科大学药学院新疆乌鲁木齐830054 北京大学医学部中医药现代研究中心北京100083

目的对新疆地产胀果甘草Glycyrrhiza inflataBat.中获得的一种水溶性多糖(GIP-2)进行分离纯化,并测定其部分理化参数。方法采用脱脂、回流提取、乙醇沉淀、Sevag法除蛋白,从胀果甘草药材中提取粗多糖,透析后经DEAE-52离子交换层析和Seph... 详细信息

目的对新疆地产胀果甘草Glycyrrhiza inflataBat.中获得的一种水溶性多糖(GIP-2)进行分离纯化,并测定其部分理化参数。方法采用脱脂、回流提取、乙醇沉淀、Sevag法除蛋白,从胀果甘草药材中提取粗多糖,透析后经DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B、Sephadex G-50凝胶柱层析分离纯化得到一种水溶性多糖(GIP-2);UV及IR法检测其性质;自动旋光仪测定旋光度;高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)分析其纯度和分子量范围;完全酸水解法鉴定多糖的单糖组分。结果胀果甘草多糖GIP-2为黄白色粉末,无甜味,易溶于水;UV检测192 nm处有明显吸收峰,260、280 nm处均无吸收峰,证明被测物为多糖,且不含核酸及蛋白质;IR分析结果显示,在3393、2932、1616、1423、1101 cm-1处表现为典型的多糖吸收峰;GIP-2分子量>2000 kDa,主要由葡萄糖、阿拉伯糖和半乳糖组成,其摩尔比为3.3:11.7:1.0。结论提取分离所得胀果甘草多糖GIP-2为单一、纯净的多糖。

关键词：胀果甘草多糖分离纯化理化性质

胀果甘草多糖对树突状细胞表型和功能的影响及作用机制的初步研究

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胀果甘草多糖对树突状细胞表型和功能的影响及作用机制的初步研究

作者：陈橙新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:利用体外贴壁法,诱导培养小鼠骨髓源的树突状细胞(DC),研究胀果甘草多糖对DC表型成熟,和抗原提呈功能的影响,并初步研究其基于TLRs/NF-κB信号通路,促进DC免疫功能的作用机制。方法:1)从C57BL/6雄性小鼠骨髓分离原代细胞,用终浓度... 详细信息

目的:利用体外贴壁法,诱导培养小鼠骨髓源的树突状细胞(DC),研究胀果甘草多糖对DC表型成熟,和抗原提呈功能的影响,并初步研究其基于TLRs/NF-κB信号通路,促进DC免疫功能的作用机制。方法:1)从C57BL/6雄性小鼠骨髓分离原代细胞,用终浓度为10 ng/mL IL-4、20 ng/mL GM-CSF联合诱导成未成熟DC(imDC),并利用倒置显微镜、扫描电镜和流式细胞(FCM)术等方法鉴定DC的表型。2)收集培养至第七天的悬浮状细胞,以不同浓度胀果甘草粗多糖GiP及其纯化组分GiP-B1,分别干预DC 24 h和48 h,利用CCK8法检测GiP-B1和GiP对DC的细胞毒性作用;FCM术检测DC表面标志分子CD11c、MHC-II、CD80和CD86的表达;ELISA法检测DC分泌的IL-12、IL-6、IL-1β和TNF-α含量;WB法检测GiP-B1和GiP对DC迁移能力的影响。3)FCM术和ELISA法分别检测TLR2/4单克隆抗体封闭前后GiP-B1和GiP对DC表型和分泌IL-12、IL-6、IL-1β和TNF-α的影响;RT-PCR法检测MyD88、p65、TLR2和TLR4基因表达;WB检测DC中的MyD88、TLR2、TLR4、p65、p-p65、IκB-α及p-IκB-α蛋白表达水平。结果:1)体外培养的imDC形成集落,半贴壁生长,表面较光滑,表面标志分子CD11c、MHC-II、CD80和CD86表达低;成熟DC体积变大,褶皱增多,触角变长,集落减少,大量细胞悬浮,表面标志分子CD11c、MHC-II、CD80和CD86表达升高。2)0～400μg/mL的GiP-B1和GiP分别干预DC 24 h和48 h,对DC的生长无影响;与空白对照组比较,干预48 h后GiP-B1(100～400μg/mL)和GiP(100～400μg/mL)均能增加DC表面标志分子的表达,对MHC-II、CD80和CD86的影响差异显著(P<0.05);各组GiP-B1和GiP均能显著促进IL-12p40/p70等细胞因子的分泌(P<0.05);各组GiP-B1和GiP均能显著增加CCR7蛋白的表达(P<0.05)。3)与空白对照组比较,anti-TLR4和anti-TLR2可抑制GiP-B1和GiP诱导的,DC表面标志分子MHC-II和CD80的表达(P<0.05),降低DC分泌IL-6、IL-1β和TNF-α等细胞因子的含量(P<0.05);100μg/mL和200μg/mL的GiP-B1和GiP,可上调TLRs/NF-κB信号通路相关的TLR4、TLR2、MyD88和p65的mRNA水平(P<0.05),以及p65和IκB-α蛋白磷酸化水平。结论:GiP及其纯化组分GiP-B1,均能显著促进DC表型及功能成熟,提高抗原提呈能力,促进DC免疫功能,其作用机制可能与激活TLRs/NF-κB信号通路有关。

关键词：胀果甘草多糖树突状细胞表型抗原提呈作用机制

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新疆胀果甘草多糖活性炭脱色效果的研究

食品工业 2015年第11期36卷 55-58页

作者：韩蓓佳李鑫何大俊吕仁杰裴彩霞新疆石河子大学生命科学学院石河子832000

研究胀果甘草多糖活性炭脱色的工艺,筛选和优化出活性炭的最佳脱色条件。利用活性炭脱色的方法对新疆胀果甘草进行脱色,以z值为评价指标,在优化活性炭添加量、活性炭添加量、脱色时间和脱色温度的单因素试验的基础上,采用正交试验法同样... 详细信息

研究胀果甘草多糖活性炭脱色的工艺,筛选和优化出活性炭的最佳脱色条件。利用活性炭脱色的方法对新疆胀果甘草进行脱色,以z值为评价指标,在优化活性炭添加量、活性炭添加量、脱色时间和脱色温度的单因素试验的基础上,采用正交试验法同样以z值为评价指标,对脱色工艺进行优选。结果表明,脱色的最佳条件为:活性炭添加量5 g、脱色次数1次、时间40 min、温度45℃。

关键词：胀果甘草多糖活性炭脱色 z值

新疆胀果甘草多糖对小鼠免疫功能促进作用研究

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食品研究与开发 2016年第7期37卷 41-43页

作者：王悦贾李佳韩蓓佳吕仁杰裴彩霞何大俊李鑫石河子大学生命科学学院新疆石河子832000

研究胀果甘草多糖对小鼠免疫功能的调节作用。用环磷酰胺(CTX)饲喂小鼠制造免疫功能抑制的动物模型,以生理盐水作为正常对照。给模型小鼠分别饲喂低、中、高剂量多糖溶液,连续7 d,饲喂多糖溶液质量分数分别为80、160、320 mg/kg。通过... 详细信息

研究胀果甘草多糖对小鼠免疫功能的调节作用。用环磷酰胺(CTX)饲喂小鼠制造免疫功能抑制的动物模型,以生理盐水作为正常对照。给模型小鼠分别饲喂低、中、高剂量多糖溶液,连续7 d,饲喂多糖溶液质量分数分别为80、160、320 mg/kg。通过计算胸腺指数和脾脏指数,检测腹腔巨噬细胞吞噬活性和血清溶血素等实验,对胀果甘草多糖的免疫活性进行研究。3项免疫指标均显示,胀果甘草多糖对小鼠的特异性免疫、非特异性免疫有正向调节作用,且有剂量效果关系。

关键词：胀果甘草多糖免疫活性免疫器官质量实验巨噬细胞吞噬活性血清血溶素实验

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正交试验法优选胀果甘草多糖的提取工艺

海峡药学 2007年第12期19卷 13-14页

作者：丛媛媛热娜.卡斯木王晓文阿不都外力.吾甫尔王素甫.热合曼新疆医科大学药学院乌鲁木齐830054

目的对胀果甘草多糖的超声提取工艺进行研究。方法用正交试验法筛选最佳提取工艺,并用苯酚-硫酸法来测定胀果甘草多糖含量。结果λmax=490nm,平均回收收率为101.11%,RSD =1.43%。胀果甘草多糖的最佳提取工艺为:粉末粒度为40目,超声时间6... 详细信息

目的对胀果甘草多糖的超声提取工艺进行研究。方法用正交试验法筛选最佳提取工艺,并用苯酚-硫酸法来测定胀果甘草多糖含量。结果λmax=490nm,平均回收收率为101.11%,RSD =1.43%。胀果甘草多糖的最佳提取工艺为:粉末粒度为40目,超声时间60min,水量20mL。结论该方法简单,快速,为从药材或制剂中提取胀果甘草多糖提供了参考。

关键词：胀果甘草多糖正交试验法超声提取含量测定