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青龙衣冷、热乙醇提取物对H22小鼠肿瘤细胞膜生化功能影响的研究

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中国中药杂志 2005年第7期30卷 531-534页

作者：季宇彬汲晨锋马宏图哈尔滨商业大学药物研究所黑龙江哈尔滨150076

目的:研究青龙衣的冷、热乙醇提取物对H22小鼠肿瘤细胞膜蛋白含量、膜脂流动性、膜封闭度的影响。方法:应用SDSPAGE电泳分析膜蛋白含量,按Skinitzky法测定膜脂流动性,按Zamudio法测定膜封闭度。结果:青龙衣的冷、热乙醇提取物可降低肿... 详细信息

目的:研究青龙衣的冷、热乙醇提取物对H22小鼠肿瘤细胞膜蛋白含量、膜脂流动性、膜封闭度的影响。方法:应用SDSPAGE电泳分析膜蛋白含量,按Skinitzky法测定膜脂流动性,按Zamudio法测定膜封闭度。结果:青龙衣的冷、热乙醇提取物可降低肿瘤细胞膜蛋白含量,降低肿瘤细胞膜脂流动性,降低肿瘤细胞膜封闭度。结论:青龙衣冷、热乙醇提取物改变了肿瘤细胞膜的生化物质及生化功能,其结果导致肿瘤细胞的解体和死亡,这可能是青龙衣抗肿瘤作用的机制之一。

关键词：肿瘤细胞膜乙醇提取物生化功能青龙衣影响的研究 H22小鼠 SDS-PAGE 细胞膜脂流动性蛋白含量细胞膜封闭度抗肿瘤作用电泳分析生化物质测定

肿瘤细胞膜/细菌膜融合脂质体的构建及其用于结直肠癌免疫治疗的研究

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肿瘤细胞膜/细菌膜融合脂质体的构建及其用于结直肠癌免疫治疗的...

作者：罗先金四川大学

学位级别：硕士

肿瘤免疫疗法是通过激活患者自身的免疫系统来识别和清除癌细胞的方法,相比于化疗,具有较高的特异性和较低的毒性,因此可以安全有效地消除肿瘤并防止肿瘤复发。肿瘤疫苗作为一种肿瘤免疫疗法已被广泛研究,其可以通过肿瘤相关抗原来激活... 详细信息

肿瘤免疫疗法是通过激活患者自身的免疫系统来识别和清除癌细胞的方法,相比于化疗,具有较高的特异性和较低的毒性,因此可以安全有效地消除肿瘤并防止肿瘤复发。肿瘤疫苗作为一种肿瘤免疫疗法已被广泛研究,其可以通过肿瘤相关抗原来激活肿瘤特异性的免疫反应,以达到杀伤、清除肿瘤细胞的目的。肿瘤细胞膜含有一系列完整的肿瘤相关抗原,其相比于亚单位疫苗,诱导免疫应答的能力更强,因此能够更有效清除肿瘤细胞。一款有效的疫苗不仅需要合适的抗原,往往还需要佐剂的参与。所以我们引入一种来源于细菌的双层膜囊泡(Double-layered membrane vesicles,DMVs)作为佐剂。DMVs含脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)、外膜蛋白A(Outer membrane protein A,OmpA)、外膜蛋白F(Outer membrane protein F,OprF)等成分,是源于革兰氏阴性菌的一种双层脂质囊泡,可与肿瘤细胞膜融合。出于安全性的考虑,本文使用的DMVs均来源于减毒处理的革兰氏阴性菌VNP20009。淋巴结是免疫应答发生的主要场所,含有由不同类型的免疫细胞,如T细胞、B细胞、自然杀伤细胞(Natural killer cells,NK)和抗原提呈细胞(Antigen-presenting cells,APCs)等。肿瘤引流淋巴结(Tumor drain lymph node,TDLN)由于靠近肿瘤,因此在刺激机体产生抗肿瘤免疫应答方面具有重要地位。研究表明,10nm～100nm的纳米载体具有较好的淋巴结靶向能力。据此,我们利用纳米载体将肿瘤细胞膜和佐剂共同递送到TDLN中,提高机体产生的抗肿瘤免疫应答。此外,肿瘤免疫微环境往往处于免疫抑制状态,所以我们在融合脂质体中载入PD-L1抑制剂JQ-1,以进一步提高肿瘤疫苗抗肿瘤的能力。在本课题中,我们设计了一种肿瘤细胞膜/细菌膜融合脂质体,并在脂质体表面吸附了铝盐佐剂。通过融合脂质体将抗原和佐剂共递送至TDLN,有效地诱导抗肿瘤免疫应答。首先,我们用薄膜水化法制备了粒径在100nm左右的脂质体,再用脂质体挤出器将脂质体、DMVs和肿瘤细胞膜挤压融合在一起,即可获得融合脂质体AMV。其水合粒径为95nm左右,电位为-3.65mv。载入JQ-1后得到AMVJ,用超高速离心法测出JQ-1的包封率为78.05%。接下来我们对制剂AMV,AMVJ进行了体外表征。首先,我们用透射电镜对制剂进行形态学表征,电镜下显示为50～70 nm的球形。SDS-PAGE电泳结果表明AMV、AMVJ中含有与游离组FreeMV相同的膜蛋白条带,红外光谱实验结果显示肽键相关峰吸光度明显增强,两者均证明AMV、AMVJ中膜蛋白的存在。为了验证两种膜蛋白是否融合,我们进行了共聚焦显微镜共定位的实验。用Did和Dio分别标记肿瘤细胞膜和细菌膜DMVs,并制备得到AMV。在共聚焦显微镜下观察到细胞中两种生物膜的共定位,表明我们成功制备了载有肿瘤细胞膜和细菌膜DMVs的融合脂质体。体外细胞学研究表明,制剂组毒性较低,且其被APCs摄取的效率显著性高于游离组。加入Al的AMV、AMVJ组的摄取效率相比MV、MVJ组有进一步提高,这可能是Al促进APCs摄取所导致。在小鼠骨髓来源的树突状细胞(Bone marrow-derived dendritic cells,BMDCs)上的PD-L1表达实验中,AMVJ能显著性降低BMDC的PD-L1表达。随后,我们在C57BL/6小鼠上考察了AMV诱导抗原特异性体液和细胞免疫应答的能力。经过三次皮下免疫后,小鼠血清抗体测定结果表明:AMV能够显著提高血清中的IgG、IgG1、IgG2a的水平。脾细胞内因子染色结果显示,AMV免疫后能显著上调机体IL-4/CD4T、IFN-γ/CD8T、TNF-α/CD8T细胞比例,这些结果证明AMV能够刺激小鼠产生更强的体液免疫应答和细胞免疫应答。同时,我们还检测了AMVJ对荷瘤小鼠体内免疫指标的调节情况,结果显示AMVJ组能够显著性降低TDLN中APCs的PD-L1的表达,并显著提高瘤内活化的CD4T细胞、CD8T细胞比例。最后,我们在MC38结直肠癌异位模型小鼠上,直接考察融合脂质体AMV、AMVJ的肿瘤抑制效果。经过四次皮下给药后,AMV、AMVJ均能显著性抑制肿瘤的生长,并延长荷瘤小鼠的生存期。其中接受AMVJ治疗的小鼠肿瘤生长最缓慢,生存期得到显著性延长。综上所述,我们成功构建了用于结直肠癌免疫治疗的融合脂质体递送系统。一方面,利用Al、细菌DMVs、肿瘤细胞膜和脂质体融合形成新的融合脂质体,提高肿瘤细胞膜的抗原摄取效率,增加刺激免疫应答能力。另一方面,通过制剂的粒径优势可以靶向TDLN,进一步提升机体的免疫应答。此外,载入JQ

关键词：肿瘤细胞膜 DMVs 淋巴结靶向 APCs PD-L

用糖基化磷脂酰肌醇B7-1锚定肿瘤细胞膜进行免疫治疗

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免疫学杂志 2007年第3期23卷 323-326页

作者：张淑敏畅继武马富玲隋志方王馨张新刘凤勇天津市泌尿外科研究所肿瘤免疫室天津300211

目的研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗。方法用蛋白转化法将B7-1锚定在肿瘤细胞膜上,免疫C57BL-6小鼠后,一组小鼠取脾细胞进行T细胞扩增和细胞毒T淋巴细胞(CTL)功能检测,另一组小鼠进行肿瘤细胞接种试验。结果用GPI-B7-1修饰的肿瘤细胞膜免... 详细信息

目的研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗。方法用蛋白转化法将B7-1锚定在肿瘤细胞膜上,免疫C57BL-6小鼠后,一组小鼠取脾细胞进行T细胞扩增和细胞毒T淋巴细胞(CTL)功能检测,另一组小鼠进行肿瘤细胞接种试验。结果用GPI-B7-1修饰的肿瘤细胞膜免疫小鼠后诱发了肿瘤特异性T细胞扩增和CTL。且该疫苗有一定的保护小鼠免受肿瘤细胞侵袭的作用。结论GPI蛋白转化法为人类抗肿瘤免疫治疗提供了新的、有效的修饰肿瘤细胞膜的方法。

关键词： GPI-B7-1 肿瘤细胞膜免疫治疗

用扫描隧道显微镜研究肿瘤细胞膜表面的纳米结构

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光子学报 2002年第11期31卷 1344-1347页

作者：孙润广齐浩张静陕西师范大学物理学与信息技术学院生命科学学院食品工程系西安710062

用扫描隧道显微镜技术研究肿瘤细胞膜的超分子结构以及外加纵向电磁场对其超分子结构的作用结果表明 ,在扫描隧道显微镜照片中 ,肿瘤细胞膜表面纳米结构的图象由环形波纹构成在外加纵向电磁场的作用下 ,肿瘤细胞膜的表面环形波纹结... 详细信息

用扫描隧道显微镜技术研究肿瘤细胞膜的超分子结构以及外加纵向电磁场对其超分子结构的作用结果表明 ,在扫描隧道显微镜照片中 ,肿瘤细胞膜表面纳米结构的图象由环形波纹构成在外加纵向电磁场的作用下 ,肿瘤细胞膜的表面环形波纹结构消失 ,出现了一些损伤的痕迹

关键词：纳米结构肿瘤细胞膜电磁场扫描隧道显微镜超分子结构

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海藻多糖对肿瘤细胞膜流动性的影响

中草药 2002年第5期33卷 435-437页

作者：季宇彬高世勇孔琦哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站黑龙江哈尔滨150076

目的　研究海藻多糖的抗肿瘤作用机制。方法　采用荧光探针 DPH法 ,观察海藻多糖对 S1 80 和 H2 2 小鼠细胞膜流动性的影响。结果　海藻多糖可升高 S1 80 荷瘤小鼠肿瘤细胞的膜流动性 ,降低 H2 2 荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性。结论　海藻... 详细信息

目的　研究海藻多糖的抗肿瘤作用机制。方法　采用荧光探针 DPH法 ,观察海藻多糖对 S1 80 和 H2 2 小鼠细胞膜流动性的影响。结果　海藻多糖可升高 S1 80 荷瘤小鼠肿瘤细胞的膜流动性 ,降低 H2 2 荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性。结论　海藻多糖可恢复肿瘤细胞膜流动性至正常细胞膜流动性而达到抗肿瘤的作用。

关键词：肿瘤细胞膜海藻多糖细胞膜流动性抗肿瘤作用机制动物实验药理

基于肿瘤细胞膜的仿生纳米药物投递系统研究进展

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武汉大学学报（医学版） 2020年第6期41卷 944-948页

作者：王江团麦泽森丁晓雯周浩桐王媛张文婷黄清花金花广东医科大学医学技术学院广东东莞523808 广东医科大学药学院广东东莞523808

随着纳米科技的发展,纳米载药传输系统已被广泛用于肿瘤的诊断和治疗。而基于肿瘤细胞膜的仿生纳米药物投递系统,综合了纳米药物高度靶向性与肿瘤细胞生物相容性的特点。通过模拟癌细胞膜的微观结构及作用机制构建的智能仿生纳米载体,... 详细信息

随着纳米科技的发展,纳米载药传输系统已被广泛用于肿瘤的诊断和治疗。而基于肿瘤细胞膜的仿生纳米药物投递系统,综合了纳米药物高度靶向性与肿瘤细胞生物相容性的特点。通过模拟癌细胞膜的微观结构及作用机制构建的智能仿生纳米载体,具有提高药物的靶向性、促进药物免疫逃逸的优越性,为各种肿瘤治疗提供了可能性,且在与饥饿疗法或光热疗法等的联合治疗策略中表现出良好的治疗效果。本文就基于肿瘤细胞膜的仿生纳米药物投递系统的特点及用途进行综述。

关键词：肿瘤细胞膜仿生纳米药物联合治疗纳米药物投递系统混合膜

泌尿系肿瘤患者术后接种自体冷冻肿瘤细胞膜后血清T细胞亚群、细胞因子的变化及意义

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山东医药 1999年第23期39卷 23-24页

作者：田军徐忠华郑宝钟时庆山东医科大学附属医院 250012

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肿瘤细胞膜的分子生物学特性

河南医科大学学报 1987年第4期 435-440页

作者：孙继海张覃沐河南医科大学河南省医学科学研究所

细胞膜表面在正常动物细胞和肿瘤细胞生长、发育中起着重要的作用。细胞的许多生命过程都与细胞膜表面有着密切的关系。例如:物质的运输;细胞识别、发育和分化;能量转换;激素与药物的作用;神经传导;

关键词：肿瘤细胞膜膜表面唾液酸外源性 N-乙酰神经氨酸粘蛋白糖蛋白细胞表面肝癌细胞 ConA 己糖半乳糖钠泵活性糖基转移酶凝集素 6-脱氧-D-半乳糖岩藻糖寡聚糖 cAMP 细胞株糖脂大鼠肝癌动物细胞

糖基化磷脂酰肌醇锚定型人B7-1基因重组蛋白锚定自体肿瘤细胞膜提高抗肿瘤免疫反应的实验研究

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中国生物制品学杂志 2005年第6期18卷 474-476,482页

作者：张淑敏畅继武马富玲王海涛王馨张新刘凤勇天津市泌尿外科研究所肿瘤免疫室天津300211

目的研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗。方法用含目的基因的质粒pcDNA3-GPI-B7-1转染CHO/DHFR+细胞,提取膜蛋白GPI-B7-1,经Western blot鉴定后,用蛋白转化法锚定在肿瘤细胞膜上,免疫C57BL/6小鼠后,取小鼠脾细胞进行T细胞扩增和CTL功能检测,... 详细信息

目的研制抗肿瘤免疫治疗的新疫苗。方法用含目的基因的质粒pcDNA3-GPI-B7-1转染CHO/DHFR+细胞,提取膜蛋白GPI-B7-1,经Western blot鉴定后,用蛋白转化法锚定在肿瘤细胞膜上,免疫C57BL/6小鼠后,取小鼠脾细胞进行T细胞扩增和CTL功能检测,并检测细胞培养液和小鼠血清中IL-2、TNF-α和IFN-γ水平。结果用GPI-B7-1修饰的肿瘤细胞膜免疫小鼠后可诱发肿瘤特异性T细胞扩增和CTL活性增强,细胞培养液中细胞因子检测为阳性。结论该疫苗能激发小鼠的免疫功能,具有一定的保护小鼠免受肿瘤细胞侵袭的作用。

关键词：糖基化磷脂酰肌醇锚定型人B7-1 基因重组蛋白自体细胞肿瘤细胞膜抗肿瘤免疫反应免疫功能