检索结果-南通市图书馆

肿瘤细胞三维培养支架、血管及细胞间的相互作用

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中国组织工程研究 2013年第42期17卷 7442-7448页

作者：胡雪峰郑立赵劲民广西医科大学广西壮族自治区南宁市530021

背景:肿瘤组织工程通过构建综合的培养模型,充分模拟肿瘤在体内生长的微环境,可以较好地研究肿瘤发生发展的动力学及相关治疗策略。目的:综述肿瘤工程技术中的肿瘤细胞三维培养。方法:以"tumor engineering;3D culture;biological mater... 详细信息

背景:肿瘤组织工程通过构建综合的培养模型,充分模拟肿瘤在体内生长的微环境,可以较好地研究肿瘤发生发展的动力学及相关治疗策略。目的:综述肿瘤工程技术中的肿瘤细胞三维培养。方法:以"tumor engineering;3D culture;biological materials;dynamic"为关键词,检索PubMed数据库1992年1月至2013年3月相关文献,纳入有关肿瘤工程、肿瘤细胞三维培养、生物支架材料及肿瘤微环境的相关文章。结果与结论:三维培养因其可再现组织细胞的体内生长情况,已成为研究肿瘤耐药性、侵袭性和肿瘤微环境的重要平台,在许多领域表现出逐步取代平面培养技术的趋势,为肿瘤研究提供了一个非常接近于体内真实情况的研究平台。近年来,随着肿瘤工程学的发展,多种新型高分子聚合材料被应用于肿瘤细胞的三维立体培养,三维培养技术逐渐成为肿瘤生物学领域研究的热点,其利用各种方法及材料使细胞呈空间立体方式生长,形成类似体内生长环境的生物支撑或基质,建立细胞间及细胞与胞外基质间的相互联系,并形成特定的类似组织样的三维空间结构。生物材料就是种子细胞生长的土壤,在肿瘤工程中起着替代细胞外基质或组织、器官的基质的作用。而随着三维细胞培养技术在肿瘤研究中的广泛应用,其已成为肿瘤耐药、血管形成、细胞间相互作用、信号转导、干细胞等方面研究不可或缺的有力工具。

关键词：生物相容性材料肿瘤细胞,培养的细胞培养技术支架

人泪腺腺样囊性癌肿瘤干细胞分离培养及特征研究

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中华眼科杂志 2015年第10期51卷 762-767页

作者：吕建美何彦津谢连凤刘勋朱利民天津医科大学眼科医院天津医科大学眼科研究所天津医科大学眼视光学院 300384 江西省赣南医学院附属医院眼科

目的分离、培养人泪腺腺样囊性癌（LACC）细胞系并研究其肿瘤干细胞（CSC）特性.方法实验研究.应用无血清悬浮培养法分离培养人LACC-CSC,显微镜下观察细胞形态学改变.实验分为两组,即LACC-CSC实验组和LACC对照组,应用流式细胞仪检测... 详细信息

目的分离、培养人泪腺腺样囊性癌（LACC）细胞系并研究其肿瘤干细胞（CSC）特性.方法实验研究.应用无血清悬浮培养法分离培养人LACC-CSC,显微镜下观察细胞形态学改变.实验分为两组,即LACC-CSC实验组和LACC对照组,应用流式细胞仪检测干细胞标记CD133、ATP结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）的表达,Tanswell小室检测CSC侵袭力,并诱导CSC向血管内皮细胞分化,体外异种移植检测CSC致瘤力.实验组与对照组组间比较采用t检验.结果 LACC接种于无血清培养基后悬浮成球生长,10～ 12 d可形成形态规则的肿瘤微球体.流式细胞仪检测示LACC-CSC表达CD133比率为（35.67±6.86）％,LACC为（0.46±0.48）％,二者比较差异具有统计学意义（t=-8.867,P＜0.05）;LACC-CSC表达ABCG2为（39.99±4.54）％,LACC为（6.75±1.34）％,二者比较差异具有统计学意义（t=-9.932, P＜0.05）.Transwell体外侵袭实验示,培养24 h后,LACC-CSC穿过Matrigel基底膜平均为（32.60±8.79）个/高倍镜视野,LACC为（10.20±2.77）个/高倍镜视野,两组比较差异有统计学意义（t=5.433,P＜0.05）;培养48 h后LACC-CSC穿过Matrigel基底膜平均为（62.60±4.83）个/HP,LACC为（44.00±5.34）个/HP,两组比较差异有统计学意义（t=5.779,P＜0.05）.应用含VEGF和bFGF等的血清培养基低氧诱导,LACC-CSC呈贴壁生长,细胞形态改变,连续诱导后三维基质胶中可形成血管腔样结构,表达血管内皮标记CD31、CD34.体外移植瘤实验LACC-CSC组9d时全部出瘤,LACC组12d全部出瘤,两组成瘤率均为100％.结论通过无血清培养法获得的LACC-CSC悬浮成球生长,表达经典干细胞标记CD133及ABCG2,具有更强的迁移侵袭力以及体内致瘤力,并具有多向分化潜能,具有干细胞的一般特性.

关键词：癌,腺样囊性泪器眼肿瘤肿瘤干细胞肿瘤细胞,培养的

维甲酸诱导基因G抑制肿瘤细胞增殖的分子机制研究

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中华医学杂志 2008年第2期88卷 110-113页

作者：李冬楼叶江肖澍潘晓蓉贾培敏童建华上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所 200025

目的探讨维甲酸诱导基因G（RIG—G）抑制肿瘤细胞增殖的分子机制。方法应用转染实验、Western印迹法、免疫共沉淀和免疫荧光共定位等技术验证RIG—G蛋白与JAB1蛋白之间的相互作用，并研究RIG—G蛋白对JAB1蛋白功能的影响。结果RIG—G蛋... 详细信息

目的探讨维甲酸诱导基因G（RIG—G）抑制肿瘤细胞增殖的分子机制。方法应用转染实验、Western印迹法、免疫共沉淀和免疫荧光共定位等技术验证RIG—G蛋白与JAB1蛋白之间的相互作用，并研究RIG—G蛋白对JAB1蛋白功能的影响。结果RIG—G蛋白可以与JAB1蛋白发生相互作用，并影响JAB1蛋白在细胞内的定位和分布。实验发现，在NIH3T3细胞中单独转染JAB1时，JAB1蛋白在细胞核和细胞质内呈弥散分布，而当与RIG—G共同转染后，JAB1蛋白在细胞核内的含量明显减少，而改变为主要在胞质内分布，并与RIG—G蛋白发生部分共定位。此外，RIG—G蛋白还具有抑制JAB1对细胞周期抑制因子p27的辅助降解功能。结论RIG—G可以通过和JAB1的相互作用，使后者部分滞留在细胞质内，从而影响JAB1发挥正常功能，干扰其对p27的辅助降解，维持细胞内p27的稳定性，促进细胞退出增殖周期，抑制细胞增殖。

关键词：肿瘤细胞,培养的维甲酸维甲酸诱导基因-G PrP27-30蛋白质 JAB1

头颈部鳞状细胞癌瞬时受体电位M7通道蛋白与肿瘤细胞增生的关系

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2008年第6期43卷 451-455页

作者：姜捷雷文斌史剑波苏振忠熊志刚广东省人民医院耳鼻咽喉科广州510080 中山大学第一附属医院耳鼻咽喉科医院中山大学耳鼻咽喉科研究所 Legacy Clinical Research Centre Portland OR97232 USA

目的探测头颈鳞状细胞癌（简称鳞癌）细胞中可能存在的离子通道蛋白瞬时受体电位通道M7（transient receptor potential melastatin 7，TRPM7），了解离子通道与肿瘤细胞生长和增生的关系。方法运用免疫组化方法对人类头颈鳞癌SCC-25细... 详细信息

目的探测头颈鳞状细胞癌（简称鳞癌）细胞中可能存在的离子通道蛋白瞬时受体电位通道M7（transient receptor potential melastatin 7，TRPM7），了解离子通道与肿瘤细胞生长和增生的关系。方法运用免疫组化方法对人类头颈鳞癌SCC-25细胞株进行TRPM7抗体检测，结合被检测到的离子通道蛋白，运用非特异性离子通道阻断剂钆离子（Gd^3＋）和2-氨基乙氧基苯硼酸（2-aminoethoxydiphenyl borate，2-APB）阻断离子通道，并运用特异性TRPM7-siRNA抑制通道的表达，以了解该通道与细胞生长和增生的关系。细胞数量的评估选用乳酸脱氢酶实验。结果所有被检测的SCC-25细胞均对1：100稀释比例的TRPM7抗体呈阳性反应，阴性对照组未能检测到免疫反应。非特异性离子通道阻断剂Gd^3＋对SCC-25细胞生长具有明显的抑制作用，10μmol／L Gd^3＋（n=16）及100μmol／LGd^3＋（n=16）均可显著抑制SCC-25细胞的生长，与不加药的空白对照组比较差异有统计学意义（t值分别为4．1414和6．2661，P值分别为0．0256和0．0082）。离子通道阻断剂2-APB对SCC-25细胞生长的抑制作用十分强大，100μmol／L2-APB（n=16）几乎使SCC-25细胞生长完全停止，与不加药的空白对照组比较差异有统计学意义（t=13．4493，P=0．0008）。特异性TRPM7-siRNA能明显抑制SCC-25细胞的生长，在TRPM7-siRNA的终浓度为30nmol／L时，细胞乳酸脱氢酶释放实验结果显示TRPM7-siRNA能显著降低SCC-25细胞的生长速率（t=4．3446，P=0．0002，n=32），而阴性对照siRNA则不影响细胞的生长。结论人类头颈鳞癌SCC-25细胞株中存在TRPM7通道；运用离子通道阻断剂或运用特异性TRPM7-siRNA抑制该通道的表达均能明显抑制肿瘤细胞的生长；2-APB对人类头颈鳞癌细胞生长的强大抑制作用表明TRPM7通道蛋白将来可能成为头颈鳞癌治疗的重要靶点之一。

关键词：离子通道肿瘤细胞,培养的癌,鳞状细胞头颈部肿瘤

三维细胞培养技术的进展及其在肿瘤研究中的应用

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肿瘤 2018年第5期38卷 502-507页

作者：卓志远陈刚刘华复旦大学附属金山医院泌尿外科上海201508 复旦大学附属中山医院肿瘤生物治疗研究室上海200032

肿瘤细胞的体外培养对研究肿瘤复杂的病理生理机制做出了巨大的贡献。近年来,三维细胞培养广泛应用于生物医学研究的各个领域,尤其是在肿瘤研究中发展迅速。肿瘤细胞的三维培养可以更准确地在体外模拟体内肿瘤真实的生长环境,肿瘤细胞... 详细信息

肿瘤细胞的体外培养对研究肿瘤复杂的病理生理机制做出了巨大的贡献。近年来,三维细胞培养广泛应用于生物医学研究的各个领域,尤其是在肿瘤研究中发展迅速。肿瘤细胞的三维培养可以更准确地在体外模拟体内肿瘤真实的生长环境,肿瘤细胞在各种三维培养装置中呈立体球状生长,表现出与体内肿瘤相似的形态学和细胞生物学特性。应用三维细胞培养技术在体外构建肿瘤模型逐渐成为连接体外肿瘤细胞二维培养和体内肿瘤动物模型之间的桥梁,目前已广泛应用于研究肿瘤生物学行为、肿瘤微环境、肿瘤干细胞、肿瘤血管生成和抗肿瘤药物筛选等方面。本文就近年来三维细胞培养的进展及其在肿瘤研究中的应用作一综述。

关键词：肿瘤细胞,培养的肿瘤微环境三维

冻融肿瘤细胞和肿瘤细胞培养上清对淋巴细胞活化能力的影响

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肿瘤研究与临床 2012年第5期24卷 291-294页

作者：崔莹莹冯盼盼张祥宇秦迎松徐州医学院病理实验室 221002 徐州医学院病理生理学教研室 221002

目的比较冻融肿瘤细胞和肿瘤细胞培养上清对淋巴细胞活化能力影响的差异。方法常规冻融法制备恶性黑色素瘤B16细胞全肿瘤细胞抗原，收集培养不同时间的肿瘤细胞培养上清；利用Transwell法检测冻融肿瘤细胞以及肿瘤细胞培养上清对淋巴细... 详细信息

目的比较冻融肿瘤细胞和肿瘤细胞培养上清对淋巴细胞活化能力影响的差异。方法常规冻融法制备恶性黑色素瘤B16细胞全肿瘤细胞抗原，收集培养不同时间的肿瘤细胞培养上清；利用Transwell法检测冻融肿瘤细胞以及肿瘤细胞培养上清对淋巴细胞的趋化能力；用CCK-8法检测各组趋化淋巴细胞的肿瘤杀伤活性。结果冻融肿瘤细胞及培养2h以上的肿瘤上清液对淋巴细胞均有趋化作用；培养4h以上的肿瘤上清液的趋化能力明显强于冻融瘤细胞。各组趋化的淋巴细胞均具有肿瘤杀伤活性；培养4h以上的肿瘤上清液组淋巴细胞的杀伤能力明显强于冻融肿瘤细胞组。在一定范围内，培养上清对淋巴细胞的趋化和活化能力随时间延长而增强。结论培养一定时间的肿瘤上清液对淋巴细胞的趋化和活化能力均强于冻融肿瘤细胞，用培养上清液代替冻融肿瘤细胞抗原作为抗原活化淋巴细胞可获得更好的免疫效果。

关键词：癌症疫苗抗原,肿瘤肿瘤细胞,培养的冻融肿瘤细胞细胞培养技术

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浙江大学学报（医学版） 2006年第1期35卷 45-49页

作者：陈斌何超劳伟峰黄学锋方炳良浙江大学医学院附属邵逸夫医院美国MD Anderson癌症中心

目的:探讨在端粒酶(hTERT)启动子驱动下TRA IL基因在大肠癌细胞HT-29的表达及其杀细胞作用。方法:通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TNF相关凋亡诱导配体(TRA IL)基因转入大肠癌细胞HT-29,流式细胞仪检测GFP/TRA IL的表达和HT-29... 详细信息

目的:探讨在端粒酶(hTERT)启动子驱动下TRA IL基因在大肠癌细胞HT-29的表达及其杀细胞作用。方法:通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TNF相关凋亡诱导配体(TRA IL)基因转入大肠癌细胞HT-29,流式细胞仪检测GFP/TRA IL的表达和HT-29细胞凋亡率。结果:端粒酶启动子驱动的GFP/TRA IL基因和CMV启动子驱动的GFP(绿色荧光蛋白)基因在HT-29内的表达率分别达31.4%和67.0%;GFP/TRA IL基因对HT-29细胞的生长抑制率和凋亡率分别达74.2%和25.8%,与PBS和A d/CMV-GFP比差异都有显著性意义(P细胞中有效表达;TRA IL基因对大肠癌细胞HT-29有明显的抑制生长和促凋亡作用。

关键词：肿瘤坏死因子/分析端粒,末端转移酶/遗传学肿瘤细胞,培养的蛋白质类/化学结肠直肠肿瘤/病理学基因疗法细胞凋亡

转录介导融合基因RBM6-RBM5在肿瘤细胞及组织中的表达

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吉林大学学报（医学版） 2009年第6期35卷 1068-1073页

作者：王珂张捷李然伟吉林大学第二医院呼吸内科吉林长春130041 吉林大学第二医院泌尿外科吉林长春130041

目的:鉴定RBM6-RBM5融合基因的存在,研究其与肿瘤发生的关系。方法:采用GLC20、MDA、MB、231、Jurkat、TF-1、MCF-7、Hela、BT-474、A431、K562及Raji10种肿瘤细胞株,肺、卵巢、骨骼肌、皮肤、脾脏、子宫、心脏、骨、脑、淋巴结、胰腺... 详细信息

目的:鉴定RBM6-RBM5融合基因的存在,研究其与肿瘤发生的关系。方法:采用GLC20、MDA、MB、231、Jurkat、TF-1、MCF-7、Hela、BT-474、A431、K562及Raji10种肿瘤细胞株,肺、卵巢、骨骼肌、皮肤、脾脏、子宫、心脏、骨、脑、淋巴结、胰腺、前列腺及睾丸等肿瘤组织及其相应正常对照组织的cDNA,5例乳腺癌组织,以巢式PCR方法检测融合基因的存在,并通过QPCR方法研究融合基因的产生与RBM6、RBM5基因表达水平之间的关系。结果:RBM6-RBM5融合基因首次在MDA、MB、231细胞株中获得鉴定,序列分析发现该基因为RBM6和RBM5的融合体,该融合体不包括RBM6的外显子20、21以及RBM5的外显子1。该融合基因在10种肿瘤细胞株及部分肿瘤组织中表达,但在正常组织中却未见表达。融合基因的表达与RBM6和RBM5 mRNA的表达有关;RBM6和RBM5 mRNA的表达水平在融合基因阳性的肿瘤组织中明显高于融合基因阴性的肿瘤组织。结论:融合基因的表达与肿瘤发生有关,高水平的RBM6和RBM5 mRNA水平可能是融合基因产生的原因之一。

关键词： RNA结合基序蛋白转录介导融合基因肿瘤细胞,培养的

肝脏可溶性复合物不同剂量、不同途径移植对肿瘤细胞增殖抑制的体内外实验

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第51期11卷 10230-10233页

作者：杨洪亮张洁刘战培林苹王修杰任婧婧熊竹娟宁其志四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室实验肿瘤研究室四川省成都市610041 四川大学华西医院普外一科四川省成都市610041

目的:肝脏可溶性复合物具有保护肝脏、刺激肝组织再生等生物学活性,观察天然物质肝脏可溶性复合物对肿瘤细胞生长增殖的抑制作用。方法:实验于2006-05/2007-02在四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室实验肿瘤研究室完成。①分离人胚... 详细信息

目的:肝脏可溶性复合物具有保护肝脏、刺激肝组织再生等生物学活性,观察天然物质肝脏可溶性复合物对肿瘤细胞生长增殖的抑制作用。方法:实验于2006-05/2007-02在四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室实验肿瘤研究室完成。①分离人胚胎、成年及新生小鼠肝脏组织,生理盐水清洗、剪碎、筛网过滤,用生理盐水制备混悬液,3000r/min离心,收集上清,制备肝脏可溶性复合物。②体外实验:用上述不同来源的肝脏可溶性复合物体外处理肿瘤细胞,四甲基偶氮唑盐比色法测定其对乳腺癌细胞EMT6增殖的影响。③体内实验:观察成年鼠肝脏可溶物质对乳腺癌细胞EMT6体内生长的抑制作用及其对荷瘤鼠生存状况的影响,包括不同给药剂量及不同给药途径两个实验,给药途径包括在接种肿瘤细胞部位的对侧腋下、同侧腋下、腹腔注射及灌胃等。结果:①体外实验显示不同来源的肝脏可溶性复合物能明显抑制肿瘤细胞EMT6增殖率,肿瘤增殖抑制率均显著高于血清白蛋白处理组(P肿瘤细胞生长的作用,并且呈一定的剂量依赖性。不同的给药途径中,在接种肿瘤细胞部位的同侧腋下给药抑瘤效果最好。

关键词：细胞移植肝肿瘤细胞,培养的