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肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体抑制胶质瘤生长的研究

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中华实验外科杂志 2012年第9期29卷 1843-1844页

作者：窦以河何裕超江水刘世海王衍刚孟庆海青岛大学医学院附属医院神经外科 266003 即墨市人民医院神经外科青岛大学医学院中心实验室

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL），是肿瘤坏死因子（TNF）家族成员中的一个新成员，最早由Wiley等从人心肌cDNA文库中克隆获得。与TNF其他成员不同的是，TRAIL仅诱导肿瘤细胞、病毒感染细胞发生凋亡，对正常细胞无凋亡诱导作用。

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体抑制胶质瘤生长 cDNA文库凋亡诱导作用 TRAIL 家族成员肿瘤细胞

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体及其受体与肝纤维化治疗

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解剖学杂志 2010年第3期33卷 404-406页

作者：吴江锋张艳琼三峡大学医学院宜昌443002

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL），也称Apo-2L，是1995年发现的一种肿瘤坏死因子超家族成员。近年研究表明，在活化的肝星形细胞（hepatic stellate cell，HSC）表面TRAIL受体表达增... 详细信息

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL），也称Apo-2L，是1995年发现的一种肿瘤坏死因子超家族成员。近年研究表明，在活化的肝星形细胞（hepatic stellate cell，HSC）表面TRAIL受体表达增加，且HSC对TRAIL介导的细胞凋亡敏感性也随之增强。激活状态HSC的清除对肝纤维化的逆转起着关键性作用，

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体肝纤维化受体表达细胞凋亡敏感性 TRAIL 治疗 ligand 肝星形细胞

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中国糖尿病杂志 2014年第6期22卷 560-564页

作者：刘敏向光大卢俊颜董靖向林南方医科大学研究生学院广州510515 广州军区武汉总医院内分泌科

目的观察TNF相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对T2DM大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响及其可能的机制。方法选取4周龄雄性SD大鼠,分为正常对照组(NC,n=10)与模型组(n=40),随机将模型组分为T2DM亚组(n=10)与TRAIL亚组(TRAIL,n=10)。TRAI... 详细信息

目的观察TNF相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对T2DM大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响及其可能的机制。方法选取4周龄雄性SD大鼠,分为正常对照组(NC,n=10)与模型组(n=40),随机将模型组分为T2DM亚组(n=10)与TRAIL亚组(TRAIL,n=10)。TRAIL干预6周后,检测各组FPG及FIns水平,计算ISI。检测NC组与TRAIL亚组血清TRAIL水平。观察大鼠离体主动脉内皮依赖性血管舒张反应,并检测主动脉一氧化氮(NO)含量、内皮型一氧化氮合酶活性(eNOS)。结果与NC组比较,T2DM亚组FPG、FIns水平升高(P<0.01),ISI降低(P<0.01),血清TRAIL水平降低(P<0.01);血管内皮功能失调,乙酰胆碱(Ach)引起的血管最大舒张率降低(P<0.01),血管中NO含量及eNOS阳性表达降低(P<0.01或P<0.01)。TRAIL亚组血管Ach的舒张反应改善(P<0.01);血管中NO含量增加且eNOS阳性表达上调(P<0.05或P<0.01);FPG、FIns降低,ISI提高(P<0.01)。结论 TRAIL改善T2DM大鼠内皮依赖性血管舒张功能的同时,可促进具有血管保护作用的NO生成。

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体糖尿病 2型血管功能一氧化氮大鼠

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体通过激活P-Smad2/3调控肺动脉细...

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作者：张晓贝安徽医科大学

学位级别：硕士

背景肺动脉高压(PAH)是一种进行性、难治性和极度恶性的肺血管疾病,以血管重塑和细胞增殖而致肺细小动脉狭窄和阻塞为病理特征,最终导致右心衰竭和死亡,其发病率在逐年增加。当前药物显示了在降低肺动脉压、增加运动耐量和提高生活质量... 详细信息

背景肺动脉高压(PAH)是一种进行性、难治性和极度恶性的肺血管疾病,以血管重塑和细胞增殖而致肺细小动脉狭窄和阻塞为病理特征,最终导致右心衰竭和死亡,其发病率在逐年增加。当前药物显示了在降低肺动脉压、增加运动耐量和提高生活质量方面的近期疗效,但是未能改善远期疗效和生存率。PH的血管重塑已逐渐被认为是影响其疾病进展和预后最重要的发病机制,主要表现为内皮细胞、膜平滑肌细胞和外膜成纤维细胞的增生和肥大,以及管壁细胞外基质(ECM)的沉积。研究证实肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)的m RNA和蛋白在正常人肺动脉血管内皮细胞及平滑肌细胞均有丰富表达,人和小鼠体内TRAIL浓度与肺高压的严重程度成正相关。TRAIL基因敲除及给予TRAIL抑制剂均可通过减少ECM的表达和沉积减轻肺血管重塑从而阻碍哺乳动物肺高压的进展。但是,TRAIL是通过何种信号通路和分子机制影响ECM的表达一直未见报道。有实验表明TGF-β和BMP信号通路的激活对ECM的表达起主要的促进作用,细胞外有活性的TGF-β和BMP可使下游的Smad2/3和Smad1/5/8磷酸化,影响目的基因的转录和目的蛋白的表达。目的本研究探讨在体外培养肺动脉平滑肌细胞低氧条件下TRAIL影响TGF-β及BMP下游磷酸化受体p-Smad2/3及p-Smad1/5/8促进细胞外基质表达的情况。方法(1)在体外:选取8周龄C57BL6野生型雄性小鼠分为4组:第一组为低氧(10%O2,90%N2)暴露3周(hypoxia-induced PAH组),第二组为低氧暴露3周后将抗TRAIL抗体用渗透泵给药4周(TRAIL-Ab组),第三组为低氧暴露3周后将Ig G抗体用渗透泵给药4周(Ig G组),第四组为常氧暴露3周(对照组),利用HE染色和免疫荧光实验技术比较四组小鼠在体内细胞外基质表达及肺动脉血管壁狭窄的情况。(2)在体内:将用于实验的肺动脉平滑肌细胞分为三组,第一组为经低氧(1%O2,5%CO2,94%N2)处理24小时(hypoxia-induced组),第二组为经低氧处理24小时后加入抗TRAIL抗体(TRAIL-Ab组),第三组为经常氧(95%O2,5%CO2)处理24小时(对照组),分别加入细胞裂解液和Trizol,提取细胞蛋白,利用Western blotting实验技术定量比较三组细胞在体外细胞外基质表达及p-Smad2/3、p-Smad1/5/8表达的情况。结果在体内,hypoxia-induced PAH组的右室收缩压、右心室肥大、肺动脉血管壁狭窄程度、细胞外基质表达均显著高于对照组,TRAIL-Ab组的右室收缩压、右心室肥大、肺动脉血管壁狭窄程度、细胞外基质表达均显著低于hypoxia-induced PAH组。在体外,hypoxia-induced组的细胞外基质及p-Smad2/3的表达均高于对照组,TRAIL-Ab组的细胞外基质及p-Smad2/3的表达均低于hypoxia-induced组。结论抗TRAIL抗体可通过减少细胞外基质的表达和沉积减轻肺血管重塑。体外培养肺动脉平滑肌细胞低氧条件下,TRAIL可通过激活p-Smad2/3影响肺动脉细胞外基质的表达。这些研究结果为肺动脉高压在分子信号传导通路方面的治疗提供了理论基础,并为后续研究和临床转化提供实验依据。

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体细胞外基质肺动脉平滑肌细胞 pSmad2/3

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）基因的改造及其在毕赤...

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作者：朱明月华南热带农业大学

学位级别：硕士

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis inducing ligand, TRAIL）是肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF）基因超家族众多成员之一,能通过死亡受体的参与而诱导细胞凋亡。 TRAIL与肿瘤细胞膜表面特殊的复杂... 详细信息

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis inducing ligand, TRAIL）是肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor, TNF）基因超家族众多成员之一,能通过死亡受体的参与而诱导细胞凋亡。 TRAIL与肿瘤细胞膜表面特殊的复杂的受体系统（两个死亡受体和三个诱骗受体）相互作用。由于它的三聚体形式能诱导许多转化细胞凋亡却不会杀伤正常细胞的特性而有望成为极有潜力的治疗肿瘤的药物,引起研究者极大的兴趣。本研究利用甲醇毕赤氏酵母表达系统对TRAIL基因进行了表达研究和高效表达菌株的筛选。以pGEM-TRAIL为模板,设计了三对引物P1、P2、P3、P4、P5、P6,利用套叠PCR技术成功地获得了含有KEX2位点和ATTTA位点以及同时含有这两个突变位点的可溶性TRAIL基因片段,并成功地克隆到*** DH5α中扩增。将改造后的TRAIL基因连接到甲醇毕赤酵母Pichia pastoris的YIP型表达载体上,通过Zeocin抗生素筛选,Xba Ⅰ/Xho Ⅰ双酶切鉴定,获得重组表达载体pPICZα-A-TRAILunmodified、pPICZα-A-TRAILKEX2 mutation、pPICZα-A-TRAILATTTA mutation、pPICZα-A-TRAILKA double mutation。利用电转化技术将重组表达载体转化毕赤酵母GS115,经Zeocin抗生素筛选、PCR检测获得阳性的酵母工程菌株pPICZα-A-TRAILunmodified/GS115、pPICZα-A-TRAILKEX2 mutation/GS115、pPICZα-A-TRAILATTTA mutation/GS115、pPICZα-A-TRAILKA double mutation/GS115。摇瓶培养确定毕赤酵母工程菌摇瓶最适pH值为5.5-6.5;最佳甲醇诱导浓度为1%;最适诱导周期为96 h。利用SDS-PAGE进行高表达菌株的筛选,得到高表达菌株,表达水平分别达到71.5 mg/L（对照）、127.5 mg/L、114 mg/L和183 mg/L,这说明改造后的菌株表达量比未突变的菌株表达量有较明显的提高。利用CM-柱层析对重组蛋白进行了初步纯化研究。用Western blot检测表明重组蛋白具有TRAIL抗原活性。MTT法检测表达菌株发酵产物显示重组蛋白具有生物活性。

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体甲醇毕赤酵母高效表达筛选

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国外医学（输血及血液学分册） 2004年第6期27卷 535-538页

作者：冯丽华李大启崔为发潍坊医学院血液学教研室 261042

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)是TNF超家族新成员,它可以选择性诱导肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞无毒性作用,这种特性使其可能在肿瘤治疗中发挥巨大潜力。本文就TRAIL及其在骨髓增生异常综合征和白血病方面的研究进展作一综述。

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体骨髓增生异常综合征白血病细胞凋亡白血病

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肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体与肿瘤治疗

安徽医药 2008年第2期12卷 97-99页

作者：张霄翔纪文婷张庆林合肥工业大学化工学院制药工程系安徽合肥230009 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo2 ligand,Apo-2L)是1995年发现的TNF超家族的新成员。它的最大特点是可以选择性诱导肿瘤细胞和转化细胞发生凋亡,但对正常组织和细胞没有显著毒性效应。本文从TRAIL的结构、... 详细信息

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)或称凋亡素2配体(Apo2 ligand,Apo-2L)是1995年发现的TNF超家族的新成员。它的最大特点是可以选择性诱导肿瘤细胞和转化细胞发生凋亡,但对正常组织和细胞没有显著毒性效应。本文从TRAIL的结构、受体、凋亡机制及其在肿瘤治疗中的应用等方面对其进行了介绍。TRAIL很可能在肿瘤治疗方面发挥重要作用。

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体受体凋亡抗肿瘤

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

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肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

第十二次全国中西医结合肝病学术会议

作者：周慧明陈智浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所

研究背景:原发性肝癌是危害人类健康的常见恶性肿瘤。流行病学调查发现原发性肝癌与HBV、HCV慢性感染密切相关。我国是病毒性肝炎的高发区,目前已有超过一亿的HBV和HCV的感染者,因而导致肝癌的发病率居高不下。据卫生部统计,原发性肝癌... 详细信息

研究背景:原发性肝癌是危害人类健康的常见恶性肿瘤。流行病学调查发现原发性肝癌与HBV、HCV慢性感染密切相关。我国是病毒性肝炎的高发区,目前已有超过一亿的HBV和HCV的感染者,因而导致肝癌的发病率居高不下。据卫生部统计,原发性肝癌是所有肿瘤中的第二位致死因素,在城市中仅次于肺癌,在农村中仅次于胃癌。因此研究肝癌的治疗刻不容缓。目前主要用外科手术,化学治疗,放射治疗和生物治疗四种方式。近年来,随着肝癌的发病机理和治疗研究的进展,人们认识到细胞凋亡机制的异常在肝癌发生和抗肿瘤治疗中起重要作用。现有的研究提示很多抗肿瘤治疗是诱导肿瘤细胞的凋亡起作用。肿瘤坏死因子相关凋亡配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)是Ⅱ型跨膜蛋白,是最近发现的能诱导多种转化细胞凋亡的TNF家族成员。在3个死亡配体中,TNF,FasL和TRAIL中,TRAIL能有效地诱导细胞凋亡,而对正常细胞无明显的杀伤作用。这一特性预示着其在治疗病毒感染以及肿瘤患者中有广泛的应用前景。但是,最近研究发现人重组LZ—TRAIL在体外能诱导人正常肝细胞凋亡。TRAIL对肝细胞严重的毒性作用,使它的肿瘤治疗作用受到了限制。研究也发现,许多病毒可引起感染细胞发生凋亡,如人免疫缺陷病毒、麻疹病毒、流感病毒等RAN病毒;而某些DNA病毒,包括疱疹病毒、腺病毒、人乳头瘤病毒等则抑制感染细胞凋亡。目的:探讨重组人TRAIL蛋白及其联合化疗药物的抗肝癌效应,Caspase—9抑制剂(Z—LEHD—FMK)对正常肝细胞的保护作用,HBV感染对TRAIL诱导细胞凋亡的影响。

关键词：肝癌细胞凋亡胎牛血清抑制剂肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 Caspase 杀伤率人正常肝细胞原发性肝癌化疗药物肝癌细胞株拉米夫定丝裂霉素培养液凋亡率

来源： cnki会议评论

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解剖学杂志 2013年第2期36卷 163-165页

作者：李京敏宁巍巍李笑岩刘同慎白咸勇滨州医学院人体解剖学与组织学胚胎学研究所烟台264003

目的：探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）及核转录因子-κB（NF-κB）在大鼠肝癌发生过程中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学SP法，对二乙基亚硝胺（DEN）诱发的大鼠肝癌发生过程中TRAIL及NF-κB的动态表达进行检测。... 详细信息

目的：探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）及核转录因子-κB（NF-κB）在大鼠肝癌发生过程中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学SP法，对二乙基亚硝胺（DEN）诱发的大鼠肝癌发生过程中TRAIL及NF-κB的动态表达进行检测。结果：二乙基亚硝胺诱发的肝癌为肝细胞癌，大鼠肝癌癌变过程大致经过肝细胞损伤期、肝细胞增生-硬化期和肝细胞癌变期3个阶段。在正常大鼠肝、损伤期及增生硬化期偶见少量肝细胞呈TRAIL阳性表达，进入癌变期，TRAIL阳性细胞数量增多，主要位于癌结节内。在正常大鼠肝，偶见少量肝细胞呈NF-κB阳性表达，随着肝癌发生发展，阳性表达细胞逐渐增多，至诱癌晚期，可见大量NF-κB阳性表达细胞，均比正常肝组织表达高。结论：TRAIL及NF-κB可能与肝癌的发生发展密切相关。

关键词：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体核转录因子-κB 肝癌发生免疫组织化学大鼠