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肾虚质大鼠学习记忆能力与海马NMDA受体表达的实验研究

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中国中西医结合杂志 2016年第5期36卷 597-601页

作者：孙瑜嬬孙耀光张琪王晓棣王兴孙理军陕西中医药大学基础医学院陕西712046 陕西中医药大学研究生院陕西712046

目的观察肾虚质大鼠学习记忆能力与海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体表达变化,探讨"肾藏志"中医学理论的物质基础与神经生物学机制。方法将40只SD大鼠随机分为模型组、左归丸、右归丸组及空白组(产自正常孕鼠)... 详细信息

目的观察肾虚质大鼠学习记忆能力与海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体表达变化,探讨"肾藏志"中医学理论的物质基础与神经生物学机制。方法将40只SD大鼠随机分为模型组、左归丸、右归丸组及空白组(产自正常孕鼠),每组10只,采用"猫吓鼠"经典造模法制备先天不足加后天失养复合型肾虚质仔鼠模型。对仔鼠恐吓同时开始给药,左归丸、右归丸组分别给予左归丸混悬液0.1875 g/mL、右归丸混悬液0.0938 g/mL灌胃,空白组及模型组给予等量生理盐水灌胃,每日1次,每周用药5天,连续2个月。通过Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组化法检测海马组织NMDA受体亚基NR2A、RN2B蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组Morris水迷宫实验潜伏期及总路程增加(P肾虚质大鼠学习记忆能力退化且海马NMDA受体表达低下,补肾药物左归丸、右归丸可上调NMDA受体表达,提高其学习记忆能力,从而改善肾虚质脑功能退化状态。

关键词：肾虚质学习记忆能力 N-甲基-D-天冬氨酸受体

肾虚质大鼠生长发育与海马蛋白激酶C表达的研究

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中华中医药杂志 2018年第3期33卷 1134-1136页

作者：孙理军孙耀光孙瑜嬬张琪刘熙如柏云飞陕西中医药大学咸阳712046

目的:通过观察肾虚质大鼠生长发育情况及海马蛋白激酶C(PKC)含量变化,探讨二者的相关性及补肾中药的药理作用机制。方法:12周龄雌鼠受孕后,采用"猫吓鼠"造模法恐吓至其产子,仔鼠4周龄时继续恐吓,造成先天不足加后天失养复合型肾虚质仔... 详细信息

目的:通过观察肾虚质大鼠生长发育情况及海马蛋白激酶C(PKC)含量变化,探讨二者的相关性及补肾中药的药理作用机制。方法:12周龄雌鼠受孕后,采用"猫吓鼠"造模法恐吓至其产子,仔鼠4周龄时继续恐吓,造成先天不足加后天失养复合型肾虚质仔鼠模型。继续恐吓仔鼠同时给予左、右归丸干预治疗;比较正常组、模型组与药物组生长发育情况并检测海马组织PKC含量。结果:(1)生长发育情况:仔鼠4月龄时,与正常组比较,肾虚质组体质量、脑重、肾重显著降低(P肾虚质组有所改善(P肾虚质组含量锐减(P肾虚质组有显著提高(P肾虚体质可致大鼠生长发育迟缓,其机制之一与海马组织中PKC含量的减少有关,同时补肾药物左、右归丸对其有改善治疗作用。

关键词：肾虚质生长发育海马蛋白激酶C

肾虚质小鼠血清TNF-α、TGF-β_1及骨代谢变化的实验研究

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时珍国医国药 2012年第8期23卷 2048-2049页

作者：李翠娟孙理军张喜德何靖霜王震党照丽陕西中医学院陕西咸阳712046

目的研究肾虚质小鼠血清TNF-α、TGF-β1及骨代谢的变化情况,探讨肾虚体质骨代谢紊乱的内在机理及补肾中药的干预作用。方法采用惊恐加房劳的方法,建立复合型肾虚质动物模型,研究肾虚质小鼠血清TNF-α、TGF-β1及骨代谢的变化及补肾中... 详细信息

目的研究肾虚质小鼠血清TNF-α、TGF-β1及骨代谢的变化情况,探讨肾虚体质骨代谢紊乱的内在机理及补肾中药的干预作用。方法采用惊恐加房劳的方法,建立复合型肾虚质动物模型,研究肾虚质小鼠血清TNF-α、TGF-β1及骨代谢的变化及补肾中药的干预作用。结果与空白对照组比较,肾虚质模型组小鼠表现出精神萎靡,头部下垂,四肢无力,眼神黯淡,目光呆滞,喜卧恶动,摄食减少,体质量明显下降,皮毛松弛无泽等一系列肾虚之象,并且伴有血清ALP、TNF-α水平明显升高(P肾虚质动物模型,具有中医理论特色和操作的可行性。肾虚质小鼠存在骨代谢失衡的状态,其内在机理可能与细胞因子TNF-α、TGF-β1的异常有关,而补肾中药可以改善肾虚质小鼠骨代谢稳态的失衡状态。

关键词：肾虚质 TNF-α TGF-β1 骨代谢

肾虚质大鼠生长发育和学习记忆能力与肾藏志理论相关性研究

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中华中医药杂志 2016年第1期31卷 36-38页

作者：孙理军孙耀光张琪孙瑜嬬王晓棣王兴陕西中医药大学咸阳712046

目的:通过大鼠生长发育和学习记忆能力的改变,探讨其与肾藏象理论相关性及补肾药物的干预作用。方法:采用"猫吓鼠"造模法,建立先天不足、后天失养复合型肾虚质模型,以计分方式观察仔鼠体质量、毛发、尿量、精神状态各项指标的改变,通过M... 详细信息

目的:通过大鼠生长发育和学习记忆能力的改变,探讨其与肾藏象理论相关性及补肾药物的干预作用。方法:采用"猫吓鼠"造模法,建立先天不足、后天失养复合型肾虚质模型,以计分方式观察仔鼠体质量、毛发、尿量、精神状态各项指标的改变,通过Morris水迷宫测定肾虚质大鼠空间学习记忆能力变化。结果:1生长发育情况:与空白组相比,模型组体质量下降、毛发稀疏、尿量增多、精神状态异常明显,且各参数积分值均高于药物组(P肾虚质大鼠表现出体质量下降、毛发不荣、尿量增多及精神状态异常,学习记忆能力亦明显退化,补肾中药通过补肾、益精填髓、滋养肝肾而显著改善其学习记忆能力。

关键词：肾虚质生长发育认知记忆能力肾藏志

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肾虚质实验动物模型的构建方法与评价

时珍国医国药 2013年第1期24卷 247-249页

作者：孙理军李翠娟王震党照丽陕西中医学院陕西咸阳712046 商洛职业技术学院陕西商洛726000

在大量文献研究和临床研究,特别是在对肾虚证动物造模中证质混用现象深入探讨的基础上,提出了肾虚质实验动物模型的构建原则,初步建立了肾虚质的构建方法与评价方法,总结和思考了实验中存在的问题,造模刺激因素和实验环境的控制,以及评... 详细信息

在大量文献研究和临床研究,特别是在对肾虚证动物造模中证质混用现象深入探讨的基础上,提出了肾虚质实验动物模型的构建原则,初步建立了肾虚质的构建方法与评价方法,总结和思考了实验中存在的问题,造模刺激因素和实验环境的控制,以及评价体系的建立还需要进一步完善。

关键词：肾虚质动物模型构建方法评价

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老年生理性肾虚质大鼠牙周炎模型的建立

武汉大学学报（医学版） 2011年第1期32卷 65-68,143页

作者：杨艳王莉陈伟民张转武汉大学中南医院口腔科湖北武汉430071 武汉科技大学附属天佑医院口腔科湖北武汉430064

目的:建立符合中医理论的实验性肾虚质牙周炎动物模型,为研究牙周炎的中西医结合治疗奠定基础。方法:选用4月龄青年SD大鼠40只,12月龄老龄大鼠40只,随机分为4组:①青年对照组(YN,20只);②青年牙周病组(YP,20只);③老年对照组(ON,20只);... 详细信息

目的:建立符合中医理论的实验性肾虚质牙周炎动物模型,为研究牙周炎的中西医结合治疗奠定基础。方法:选用4月龄青年SD大鼠40只,12月龄老龄大鼠40只,随机分为4组:①青年对照组(YN,20只);②青年牙周病组(YP,20只);③老年对照组(ON,20只);④老年牙周病组(OP,20只)。YN组、ON组氯胺酮(100mg/kg)腹腔注射麻醉,常规喂养鼠料和水。YP组、OP组麻醉同对照组,麻醉后将0.2mm正畸钢丝结扎于牙颈部,然后用GC粘结固定,从实验当天开始饲以高糖饮食。结果:术后8周组织病理学检查显示YN组、ON组牙周组织无病理性改变。YP组牙周袋形成,破骨细胞增多,牙槽嵴顶吸收。OP组牙周袋形成,牙槽嵴顶及牙槽骨破坏吸收,牙槽骨吸收近根尖1/3。结论:老年大鼠较青年大鼠易感牙周炎,模拟了临床肾虚质牙周炎自然发生过程,为中西医结合治疗肾虚质牙周炎奠定了基础。

关键词：牙周炎肾虚质动物模型

肾虚质大鼠免疫稳态失衡的分子机理及中药干预研究

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肾虚质大鼠免疫稳态失衡的分子机理及中药干预研究

作者：郝蕊陕西中医学院

学位级别：硕士

目的:完善肾虚质大鼠模型的建造方法,深入探讨肾虚质的体质特点;通过对免疫细胞因子、T淋巴细胞表达因子的检测,探讨肾虚质大鼠免疫稳态失衡的分子机理;通过补肾、补脾药物干预,观察其对肾虚质大鼠免疫稳态失衡的调节作用,为肾虚体质特... 详细信息

目的:完善肾虚质大鼠模型的建造方法,深入探讨肾虚质的体质特点;通过对免疫细胞因子、T淋巴细胞表达因子的检测,探讨肾虚质大鼠免疫稳态失衡的分子机理;通过补肾、补脾药物干预,观察其对肾虚质大鼠免疫稳态失衡的调节作用,为肾虚体质特征及相关病症的认识和防治提供实验依据。方法:以中医学“恐伤肾”的著名论点为依据,采用“猫吓鼠”的经典造模方法,造成母鼠肾精受损,子鼠先天不足的肾虚质动物模型。用补肾与补脾药物干预受孕母鼠,观察其对子鼠肾虚质形成的影响,检测子鼠免疫指标IL-10、IFN-γ及T淋巴细胞CD4+、CD8+分子的表达,进行统计学处理分析。结果:各组子代鼠血清IL-10、IFN-γ含量明显变化。血清白介素-10检测结果:恐吓模型组、药物对照组IL-10含量有所升高(P肾虚质子代鼠脾淋巴细胞悬液中CD4+、CD8+分子的百分率均低于正常空白对照组(P肾虚质大鼠动物模型,该模型具有中医理论特色和实践上的可行性。肾虚质大鼠表现出明显的免疫稳态失衡,IL-10、IFN-γ、CD4+、CD8+分子水平的异常是其免疫稳态失衡的分子机理。通过补肾、补脾中药的干预,证明补肾中药可以改善肾虚质大鼠失衡的免疫稳态。

关键词：肾虚质细胞因子 CD4+、CD8+分子

肾虚质大鼠细胞因子和T淋巴细胞亚群表达水平及中药干预研究

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肾虚质大鼠细胞因子和T淋巴细胞亚群表达水平及中药干预研究

作者：孙超越陕西中医学院

学位级别：硕士

目的:在前期研究的基础上,继续完善肾虚质大鼠模型的建立,深入探讨肾虚体质的特点;通过对免疫细胞因子白介素1β、白介素4(IL-1β,IL-4)、T淋巴细胞表达因子CD4+、CD8+的检测,进一步探讨肾虚质大鼠免疫稳态失衡的分子机理;通过两种补肾... 详细信息

目的:在前期研究的基础上,继续完善肾虚质大鼠模型的建立,深入探讨肾虚体质的特点;通过对免疫细胞因子白介素1β、白介素4(IL-1β,IL-4)、T淋巴细胞表达因子CD4+、CD8+的检测,进一步探讨肾虚质大鼠免疫稳态失衡的分子机理;通过两种补肾药物的干预,观察其对肾虚质大鼠免疫稳态失衡的调节作用,为肾虚体质特征及相关病症的认识和防治提供实验依据。方法:以中医学“恐伤肾”的著名观点为依据,采用“猫吓鼠”的经典造模方法,造成母鼠肾精受损,子鼠先天不足,待十周子代鼠性成熟,使其后天房劳伤肾,建立复合型肾虚质动物模型。再用两种补肾药物(金匮肾气丸和青娥丸)干预先天不足加后天房劳的子代鼠,观察其对肾虚质大鼠子代鼠的影响,检测其子鼠免疫指标IL-1β、IL-4及T淋巴细胞CD4+、CD8+分子的表达,进行统计学分析。结果:各组子鼠血清IL-1β、IL-4的含量差异明显。肾虚模型组与空白对照组比较,血清IL-1β、IL-4含量升高(P肾虚模型组比较,血清IL-1β、IL-4含量有所降低(P0.05)。CD4+、CD8+ T淋巴细胞亚群表达水平的检测:肾虚模型组CD4+、CD8+ T淋巴细胞百分率及CD4+/CD8+比值低于空白对照组(P肾虚质动物模型,具有中医理论特色和操作的可行性。肾虚质大鼠动物模型的生长发育迟缓,其免疫稳态失衡状态与免疫细胞因子IL-1β、IL-4,CD4+、CD8+等的异常有关。通过补肾中药对动物模型的干预,可以改善肾虚质大鼠免疫稳态失衡的状态。

关键词：肾虚质 IL-1β、IL-4 CD4+、CD8+分子

肾虚质大鼠免疫基因表达与肾藏象理论相关性研究

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肾虚质大鼠免疫基因表达与肾藏象理论相关性研究

作者：党照丽陕西中医学院

学位级别：硕士

目的本课题根据肾虚质的生理病理特点，从差异性角度研究肾藏象理论，在前期研究的基础上，继续完善具有中医体质理论特色的肾虚质大鼠造模方法;筛选肾虚质大鼠的特异性免疫分子标志物，以及免疫相关差异表达基因，深入探讨肾虚质与免... 详细信息

目的本课题根据肾虚质的生理病理特点，从差异性角度研究肾藏象理论，在前期研究的基础上，继续完善具有中医体质理论特色的肾虚质大鼠造模方法;筛选肾虚质大鼠的特异性免疫分子标志物，以及免疫相关差异表达基因，深入探讨肾虚质与免疫的相关性，以及改善肾虚质的有效药物，为肾藏象理论的现代研究提供新的思路与方法，以期丰富和发展肾藏象理论。方法以中医“恐伤肾”理论为指导，采用“猫吓鼠”的方法，先造成母鼠肾精受损，子鼠先天不足，再对先天不足的子鼠进行惊吓，造成先天不足、后天失养的复合型肾虚质动物模型，并选用桂附地黄丸（0.9375g/kg）对肾虚质动物进行调理。采用ELISA法检测大鼠血清IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α含量的变化，运用流式细胞仪检测脾脏T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分率及CD4+/CD8+比值的变化，应用基因芯片技术比较分析肾虚质大鼠与正常质大鼠及补肾药物干预后的肾虚质大鼠脾脏淋巴细胞免疫相关差异表达基因谱。结果1外周血清细胞因子含量的检测：与空白组比较，模型组IL-2、IL-10、IFN-γ的含量均降低，IL-6、TNF-α的含量升高，其中IL-2、IFN-γ的降低和TNF-α的升高有统计学意义（p＜0.05）;与模型组比较，药物组IL-2、IL-10、IFN-γ的含量均升高，IL-6，TNF-α的含量降低。2脾脏T淋巴细胞亚群的检测：与空白组相比，模型组CD3+、CD4+百分率下降，CD8+百分率升高，CD4+/CD8+比值小于1.0，其中CD4+百分率、CD4+/CD8+比值降低有统计学意义（p＜0.05）;与模型组比，药物组CD3+、CD4+百分率升高，CD8+百分率降低，CD4+/CD8+比值大于1.0。3免疫相关差异表达基因的筛选：模型组与空白组大鼠脾脏淋巴细胞mRNA杂交得到了149条差异表达基因，其中免疫相关的基因77条;药物干预后与模型组杂交得到了45条差异表达基因，其中免疫相关的基因有26条。通过对以上免疫相关的基因的统计分析，发现有12条基因在两次杂交中均有差异，其中有5条基因在模型组表达上调，经药物干预后表达下调;有7条基因在模型组表达下调，经药物干预后表达上调。结论本实验建立的先天不足+后天惊恐之复合型肾虚质动物模型，具有中医体质理论特色和操作的可行性，符合肾虚质形成的多因素特点;肾虚质大鼠存在着免疫稳态失衡，外周血清中细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IFN-γ、TNF-α的含量变化与肾虚质有一定的相关性，脾脏T淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+、CD8+百分率及CD4+/CD8+比值的变化可能是判断肾虚质的客观指标，在两次杂交中均有差异的12条基因可能是与肾虚质直接相关的免疫基因，桂附地黄丸可以通过调节CD4+/CD8+的比值和免疫基因的表达来改善肾虚质大鼠的免疫功能。

关键词：肾藏象理论肾虚质恐伤肾免疫免疫相关差异表达基因