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lncRNA ITSN1-2靶向miR-140-3p对高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症因子表达和细胞凋亡的影响

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解剖学研究 2025年第1期47卷 32-36,42页

作者：周密李伟高明松武汉市第一医院内分泌科湖北武汉430030

目的探讨lncRNA ITSN1-2在高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的作用及分子机制。方法将肾小管上皮细胞HK-2随机分为正常对照组(Con)、高糖组(HG)、HG+si-ITSN1-2组、HG+si-NC组、HG+miR-140-3p组、HG+miR-NC组、HG+si-ITSN1-2+anti-miR-140-3p组、HG+si-ITSN1-2+anti-miR-NC组。ITSN1-2和miR-140-3p表达被RT-qPCR分析;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-6、TNF-α水平;流式细胞术和蛋白质印迹法分别检测细胞凋亡和蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证了ITSN1-2靶向miR-140-3p。结果高糖处理后,ITSN1-2表达,IL-6和TNF-α水平、细胞凋亡率和Bax表达在肾小管上皮细胞HK-2中上调,而miR-140-3p和Bcl-2水平减少(P肾小管上皮细胞中IL-6,TNF-α,凋亡率和Bax表达显著减少,而Bcl-2表达提高(P细胞炎症因子表达和细胞凋亡,而下调miR-140-3p缓解了这些影响。结论干扰lncRNA ITSN1-2可能抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症因子分泌和细胞凋亡部分通过靶向上调miR-140-3p。

关键词：肾小管上皮细胞 lncRNA ITSN1-2 miR-140-3p 炎症因子凋亡 HK细胞

肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达的体外调节

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复旦学报（医学版） 2007年第3期34卷 364-367,377页

作者：金慰芳王洪复许莹莹顾淑珠高建军复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室上海200032

目的观察近端肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达的直接调节作用。方法体外分离培养大鼠近端肾小管上皮细胞与头盖骨成骨细胞;用甲状旁腺激素(PTH)、137Cs-γ射线及25(OH)D3预作用前者,再与后者分为4组共培养:①单培养组(成骨... 详细信息

目的观察近端肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达的直接调节作用。方法体外分离培养大鼠近端肾小管上皮细胞与头盖骨成骨细胞;用甲状旁腺激素(PTH)、137Cs-γ射线及25(OH)D3预作用前者,再与后者分为4组共培养:①单培养组(成骨细胞单培养)、②共培养组(肾小管上皮细胞与成骨细胞共培养)、③刺激共培养组(肾小管上皮细胞经PTH+25(OH)D3处理,再与成骨细胞共培养)、④抑制共培养组(肾小管上皮细胞经137Cs-γ射线照射+25(OH)D3处理,再与成骨细胞共培养);并用RT-PCR方法检测共培养体系中成骨细胞的BGP、ALP、ColI、RANKL与OPG mRNA表达。结果共培养组成骨细胞的骨形成相关基因BGP、ALP、Col I mRNA表达较单培养组显著降低(P肾小管上皮细胞对成骨细胞骨代谢相关基因表达具有直接的调节作用。建立的共培养体系可用于骨代谢相关药物筛选及作用机制研究。

关键词：肾小管上皮细胞成骨细胞共培养体系骨代谢基因表达

肾小管上皮细胞程序性死亡在草酸钙结石形成中的作用

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中华泌尿外科杂志 2024年第6期45卷 485-488页

作者：董才韬廖文彪杨嗣星武汉大学人民医院泌尿外科武汉430061

草酸钙结石是肾结石最主要的类型。草酸钙晶体或高草酸尿诱导的肾小管上皮细胞损伤和程序性死亡是草酸钙结石形成的关键因素。肾小管上皮细胞程序性死亡可为草酸钙晶体提供附着位点、参与构成结石成分和加剧周边组织损伤。多种细胞程序... 详细信息

草酸钙结石是肾结石最主要的类型。草酸钙晶体或高草酸尿诱导的肾小管上皮细胞损伤和程序性死亡是草酸钙结石形成的关键因素。肾小管上皮细胞程序性死亡可为草酸钙晶体提供附着位点、参与构成结石成分和加剧周边组织损伤。多种细胞程序性死亡模式可同时参与损伤过程,调节其中串联点,有望达到多层级调控。本文就肾小管上皮细胞程序性死亡与草酸钙结石形成机制间的联系,以及不同的程序性死亡模式参与草酸钙结石发病机制的相关研究进行总结和探讨。

关键词：草酸钙结石程序性细胞死亡细胞凋亡肾小管上皮细胞

肾小管上皮细胞应激性衰老在糖尿病肾病中的研究进展

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四川大学学报（医学版） 2023年第6期54卷 1085-1090页

作者：易香伶何娅妮陈客宏陆军军医大学大坪医院肾内科重庆400042

糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)是导致终末期肾脏疾病的首要病因。肾小管间质损伤是DN进展为终末期肾脏疾病的重要病理生理基础。肾小管上皮细胞应激性衰老是引起肾小管间质损伤的关键环节。近年来,研究发现肾小管上皮细胞中的... 详细信息

糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)是导致终末期肾脏疾病的首要病因。肾小管间质损伤是DN进展为终末期肾脏疾病的重要病理生理基础。肾小管上皮细胞应激性衰老是引起肾小管间质损伤的关键环节。近年来,研究发现肾小管上皮细胞中的内质网、线粒体及溶酶体等细胞器在DN中受到不同程度的损伤,并且它们的功能失衡可以通过引起肾小管上皮细胞应激性衰老导致细胞和组织器官的持续损伤,进而推动疾病进展。然而目前DN中肾小管上皮细胞应激性衰老导致衰老微环境变化的核心机制尚不清楚,且其细胞器失去稳态的发生机制尚待进一步研究。本综述总结了DN背景下的肾小管损伤、肾小管上皮细胞应激性衰老及其与细胞器的特定病理生理机制,以便为下一步研究以及开发新治疗策略提供参考。

关键词：肾小管上皮细胞应激性衰老糖尿病肾病综述

肾小管上皮细胞C/EBPα条件性敲除小鼠的构建及鉴定

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上海交通大学学报（医学版） 2016年第10期36卷 1403-1407页

作者：应霁刘剑张沥文仲芳周芳芳王伟铭上海交通大学医学院附属瑞金医院肾脏科上海200025

目的·构建肾小管上皮细胞C/EBPα条件性敲除小鼠,并进行表型鉴定,为进一步研究C/EBPα在肾间质纤维化中的作用奠定基础。方法·利用C/EBPα^(flox/flox)和pepck-Cre^+转基因小鼠进行饲养和杂交;将繁殖产生的第1代小鼠再次进行交配,得到... 详细信息

目的·构建肾小管上皮细胞C/EBPα条件性敲除小鼠,并进行表型鉴定,为进一步研究C/EBPα在肾间质纤维化中的作用奠定基础。方法·利用C/EBPα^(flox/flox)和pepck-Cre^+转基因小鼠进行饲养和杂交;将繁殖产生的第1代小鼠再次进行交配,得到第2代小鼠。通过PCR鉴定出基因型为C/EBPα^(flox/flox).pepck-Cre^+的小鼠(C/EBPα^(-/-)小鼠)。采用RT-q PCR及免疫组织化学法分别检测肾组织中C/EBPαmRNA和蛋白表达水平。应用H-E染色、Masson染色观察6~8周龄C/EBPα^(-/-)小鼠及野生型(WT)小鼠肾脏组织形态学改变。结果·2种转基因小鼠繁殖产生的第2代小鼠基因型符合孟德尔遗传定律,交配后获得C/EBPα^(-/-)小鼠。与WT小鼠相比,C/EBPα^(-/-)小鼠肾脏中C/EBPαmRNA及蛋白表达水平下降,光学显微镜下肾脏组织形态无明显改变。结论·应用Cre-loxp系统可以成功地敲除小鼠肾小管上皮细胞中C/EBPα基因,且在基础情况下C/EBPα^(-/-)小鼠肾脏组织无明显形态学改变。

关键词： Cre-loxp系统 C/EBPα 条件性敲除肾小管上皮细胞

尿液肾小管上皮细胞和病理管型检测对高胆红素血症肾损伤的诊断价值

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现代检验医学杂志 2025年第1期40卷 185-188页

作者：王婉妮陈雅斌苗杰福建医科大学附属泉州第一医院检验科福建泉州362000 联勤保障部队第970医院威海医疗区检验科山东威海264200

目的研究Sysmex UF5000尿液分析仪检测尿液中的肾小管上皮细胞(RTEC)和病理管型(***)筛查高胆红素血症肾损伤的诊断价值。方法回顾性分析2023年2月~2024年1月就诊于泉州市第一医院的高胆红素血症患者尿液有形成分的分析结果。根据是... 详细信息

目的研究Sysmex UF5000尿液分析仪检测尿液中的肾小管上皮细胞(RTEC)和病理管型(***)筛查高胆红素血症肾损伤的诊断价值。方法回顾性分析2023年2月~2024年1月就诊于泉州市第一医院的高胆红素血症患者尿液有形成分的分析结果。根据是否发生肾损伤分为非肾损伤组(n=174)和肾损伤组(n=84),比较两组尿液中RTEC水平和***阳性率的差异,受试者工作特征(ROC)曲线分析评估RTEC筛查高胆红素血症肾损伤的诊断性能。并进一步分析RTEC,***单项目或联合用于筛查的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果肾损伤组RTEC水平[5.2(3.2~12.3)/μl],***阳性率(36.90%)明显高于非肾损伤组[1.3(0.7~2.2)/μl,3.45%],差异具有统计学意义(Z/χ^(2)=-10.215,51.620,均P3.15/μl或***阳性时,其筛查高胆红素血症肾损伤时的敏感度和阴性预测值最高,分别为83.33%和91.57%。而以***阳性为筛查条件时,其特异度和阳性预测值最高,分别为96.55%和83.78%。结论尿RTEC可有效地筛查高胆红素血症肾损伤,当RTEC≤3.15/μl或***阴性时,可以基本排除高胆红素血症发生肾损伤的可能。

关键词：肾小管上皮细胞病理管型高胆红素血症肾损伤

肾小管上皮细胞在镉诱导的肾脏纤维化中的作用研究

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中华劳动卫生职业病杂志 2021年第12期39卷 903-909页

作者：丑欣刘杰马鲲鹏沈悦孙道远闵珍同济大学附属上海市肺科医院中毒科理化实验室上海200433 复旦大学上海医学院公共卫生学院职业卫生与毒理学教研室上海200032 苏州市第五人民医院职业病科 215505

目的探究肾小管上皮细胞在镉诱导的肾脏纤维化中的作用。方法于2018年3月,将24只C57BL/6小鼠随机分为对照组、低剂量组(100 mg/L)中剂量组(200 mg/L)和高剂量组(400 mg/L),每组6只,每日自由饮用含不同浓度CdCl2的饮用水,24周后处死后进... 详细信息

目的探究肾小管上皮细胞在镉诱导的肾脏纤维化中的作用。方法于2018年3月,将24只C57BL/6小鼠随机分为对照组、低剂量组(100 mg/L)中剂量组(200 mg/L)和高剂量组(400 mg/L),每组6只,每日自由饮用含不同浓度CdCl2的饮用水,24周后处死后进行实验。通过马松(Masson)染色和免疫组织化学方法分析镉暴露诱导的肾脏纤维化进展状况。建立肾小管上皮细胞和肾脏成纤维细胞共培养体系,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以及免疫印迹法(Western blotting)检测肾脏成纤维细胞增殖和活化情况。结果与对照组比较,各染毒组亚慢性镉染毒导致小鼠体重下降(P肾小管结构,引起炎症细胞浸润,Masson染色显示胶原纤维明显增加(P肾小管上皮细胞明显促进肾脏成纤维细胞(collagen)和α-SMA的蛋白表达(P肾小管上皮细胞加速肾脏成纤维细胞合成胶原蛋白的能力。结论镉暴露诱导肾脏纤维化的进程中,镉引起的肾小管上皮细胞损伤可激活肾脏成纤维细胞,加重镉引起的肾脏纤维化。

关键词：镉肾小管上皮细胞肾脏成纤维细胞肾脏纤维化

肾小管上皮细胞白细胞介素13和白细胞介素4受体的表达及其在肾小管损伤中的作用

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肾脏病与透析肾移植杂志 2009年第1期18卷 27-34页

作者：芦怡舟刘志红陈朝红郑春霞张明超黎磊石第二军医大学临床学院硕士研究生南京军区南京总医院解放军肾脏病研究所南京210002

目的:研究肾小管上皮细胞IL-4受体和IL-13受体的表达及IL-4和IL-13对肾小管上皮细胞形态和功能的影响,并探讨其作用机制。方法:借助人近端肾小管上皮细胞系(HK2),采用RT-PCR,免疫荧光方法检测HK2上IL-4受体和IL-13受体的表达。免疫荧光... 详细信息

目的:研究肾小管上皮细胞IL-4受体和IL-13受体的表达及IL-4和IL-13对肾小管上皮细胞形态和功能的影响,并探讨其作用机制。方法:借助人近端肾小管上皮细胞系(HK2),采用RT-PCR,免疫荧光方法检测HK2上IL-4受体和IL-13受体的表达。免疫荧光方法观察不同浓度IL-4和IL-13干预HK2细胞12～48h后HK2损伤标志物RANTES的变化情况。Western blot方法检测IL-4和IL-13干预HK2细胞后,JAK-STAT6信号通路的活化以及JAK-STAT6信号通路特异性抑制剂来氟米特对IL-4和IL-13作用HK2细胞的影响。结果:(1)RT-PCR和免疫荧光结果显示HK2有IL-4II型受体和IL-13I型受体mRNA和蛋白质表达。(2)IL-4和IL-13呈时间-剂量依赖性影响上皮细胞RANTES的表达。100ng/mlIL-4、50ng/mlIL-13作用48h对HK2的损伤作用最为明显。正常HK2细胞RANTES呈阴性,100ng/mlIL-4和50ng/mlIL-13干预48h后,阳性细胞显著增多。(3)Western blot方法结果显示JAK-STAT6磷酸化水平均在IL-4和IL-1350ng/ml作用10min时开始升高,IL-4100ng/ml作用20min达高峰,IL-1350ng/ml20min达高峰。JAK-STAT6信号通路特异性抑制剂来氟米特可阻断JAK-STAT6信号通路的活化,拮抗IL-4和IL-13诱导的HK2细胞RANTES表达。结论:(1)本研究首次证实人近端肾小管上皮细胞存在IL-4和IL-13受体的表达。(2)IL-4和IL-13可通过人近端肾小管上皮细胞上的相应受体造成细胞损伤,表现为RANTES表达增加。(3)IL-4和IL-13的上述作用与细胞内JAK-STAT6信号通路活化密切相关。

关键词：白细胞介素4 白细胞介素13 肾小管上皮细胞局灶节段性肾小球硬化 RANTES 信号转导子和转录激活子

肾小管上皮细胞转分化在慢性移植肾肾病中的作用

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中华泌尿外科杂志 2006年第10期27卷 667-669页

作者：刘勇杨亦荣郑少玲夏鹏吴存造温州医学院附属第一医院移植中心 325000

目的探讨肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化在慢性移植肾肾病(CAN)的发生、发展中的作用。方法36例移植肾穿刺标本分为正常组(N组),CAN组(C组),依Banff 97标准将C组按CANⅠ、Ⅱ、Ⅲ级分为C_1、C_2、C_3组,每组9例。免疫组化染色半定量... 详细信息

目的探讨肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化在慢性移植肾肾病(CAN)的发生、发展中的作用。方法36例移植肾穿刺标本分为正常组(N组),CAN组(C组),依Banff 97标准将C组按CANⅠ、Ⅱ、Ⅲ级分为C_1、C_2、C_3组,每组9例。免疫组化染色半定量分析比较α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(VIM)、角质蛋白(CK_(AEI/AE3))和转化生长因子β1(TGF-β1)在各组中的表达,线性相关分析TGF—β1和α-SMA、VIM、CK_(AE1/AE3)表达的相关性。结果C_1、C_2、C_3组α-SMA表达积分分别为0．95±0．07、1．78±0．12、2．42±0．31,VIM表达积分分别为0．74±0．05、1．31±0．18、2．34±0．25,组间呈递增趋势,均明显高于N组α-SMA表达积分0．07±0．02、VIM表达积分0．09±0．02(P＜0．05)；移植肾组织中TGF-β1表达与α-SMA、VIM呈正相关(r分别为0．73、0．68,P＜0．05),而与CKAE1/AE3表达呈负相关(r=-0．71,P＜0．05)。结论肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化参与了CAN的发生、发展,而局部肾组织中TGF-β1的表达上调可能是介导肾小管上皮细胞转分化的重要原因。

关键词：慢性移植肾肾病肾小管上皮细胞转分化