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胱抑素C肾功检测仪的研制及检测试剂的研究

胱抑素C肾功检测仪的研制及检测试剂的研究

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作者：谷金雨长春工业大学

学位级别：硕士

首次得到高纯度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂(胱抑素C,Cyst C)是从蛋清中分离纯化而来,由于胱抑素C产生速率恒定这一特点,在1985年已被认定为评价肾脏功能的良好医学指标,也是近年来评估肾脏功能的一种特异性高的金指标。目前,胱抑素C的研究... 详细信息

首次得到高纯度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂(胱抑素C,Cyst C)是从蛋清中分离纯化而来,由于胱抑素C产生速率恒定这一特点,在1985年已被认定为评价肾脏功能的良好医学指标,也是近年来评估肾脏功能的一种特异性高的金指标。目前,胱抑素C的研究主要集中于与其他指标联合检测肾脏的受损程度,对胱抑素C肾功检测仪及检测试剂的研究还不够深入。目前,我国成年慢性病患者已经超过了1亿,但肾脏疾病的知晓率却只有12.5%,并且,肾脏疾病在早期没有明显的症状,许多患者直到疾病发展为尿毒症才知道自己生病了,基于此种情况,如何提高肾脏病的知晓率,如何预防早期肾脏疾病成为现代研究热点之一。本文对胱抑素C肾功检测仪及检测试剂做了研究,并对其进行临床效果评价,为肾脏病患者的早期预防提供参考依据。(1)胱抑素C肾功检测仪的研制胱抑素C肾功检测仪可实现家庭化检测,获得直接数据,医院中生化仪设备笨重,不易移动,自制胱抑素C肾功检测仪可实现便携式,家庭化,操作简单。胱抑素C肾功检测仪以散射比浊法为原理,利用光电检测技术来测量血液中胱抑素C的含量,使整套仪器可以实现一键式测量,有利于肾脏疾病的检测工作。胱抑素C肾功检测仪通过光路与电路的整体设计,选用了光源、电源、接收装置、无线射频卡、触屏显示器等来研制检测仪器,并对检测仪器进行系统整体性能分析,评价性能测试结果,仪器的性能指标检测范围:0.2～8mg/L内线性回归方程为y(28)1.001x(10)0.011,R值为0.999>0.990;最低检测限度为0.030mg/L。临床项目精密度的批内差变异系数结果小于8%,批间差相对偏差小于10%,准确度为2.60%,稳定性检测值为0.00786,在合格范围内,均达到预期的指标要求。(2)胱抑素C检测试剂的研究传统检测试剂在运输和保存中都有很高的要求,检测试剂大多为液体状态,需要冷链运输,且在储存过程中也需冷藏保存,本研究中胱抑素C检测试剂采用乳胶增强免疫比浊技术与真空冷冻干燥技术相结合的方式,可实现常温储存,降低了保存及运输成本,且冻干的检测试剂性质较液体试剂稳定,使用时,按照要求进行复融即可。胱抑素C检测试剂运用单因素分析的方法分别考察了胶乳直径、偶联剂含量、胶乳抗体比、搅拌时间等参数对胱抑素C检测试剂制备的影响。胱抑素C检测试剂最佳工艺参数为:最佳乳胶粒径为100nm、最佳偶联剂的含量为10%、最佳胶乳抗体比4:1、最佳搅拌时间2h、检测试剂的制备需要进行两次干燥,干燥时间及温度分别为9h,-45℃和6h,-30℃。按照《胱抑素C测定试剂(盒)》YY/T1230-2014行业标准对胱抑素C检测试剂进行性能评价,评价结果:试剂空白吸光度结果为0.2071、分析灵敏度为0.030、线性区间为0.9999、重复性和批间差分别为2.90%、3.30%,准确度为4.2%及试剂有效期1年,各项结果均达到预期的指标要求。(3)胱抑素C肾功检测仪及检测试剂临床应用效果评价本研究选取吉林大学第一医院收治的100例患者,按照盲法分为待评价检测仪器及检测试剂和对比检测仪器与试剂,将测试进行平行操作,每组50例,待评价检测仪器及试剂为自主开发的胱抑素C肾功检测仪及冻干型检测试剂,对比测试组为市售生化检测仪及试剂,试验周期4周,通过统计学方法分析,评价肾脏病患者使用的自主开发的胱抑素C肾功检测仪及检测试剂是否具有统计学意义,计算P值,从而确定自主开发仪器及检测试剂临床效果是否显著,是否可进行推广,应用于医药领域,为肾脏病患者提供早期预防。经线性相关分析r=0.9959,P肾功检测仪及检测试剂适用肾脏病患者进行自我监测,通过对胱抑素C浓度的检测能够有效及时的反映早期肾功能的受损程度,从而进行治疗,控制病情,避免病情发展,因此本研究胱抑素C肾功检测仪及胱抑素C检测试剂具有广阔的发展前景。

关键词：胱抑素C 肾功检测仪检测试剂真空冷冻干燥临床效果评价

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