检索结果-南通市图书馆

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

在肽库中进行小肽筛选的初步研究

高等学校化学学报 1996年第11期17卷 1738-1741页

作者：齐杰方锐周慧李惟沈家骢吉林大学分子生物系

以合成六肽ＤＧＧＳＡＡ为模型对在噬菌体肽库中进行小肽筛选做了初步研究。结果表明，含有可形成氢键和离子键残基的小肽能够在噬菌体肽库中进行筛选，并且明显提高了筛选的专一性。筛选收率由０．００１％降低到０．０００２２％。

关键词：肽库筛选噬菌体肽

利用肽库技术筛选成纤维细胞生长因子的短肽亲和配体

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高等学校化学学报 1999年第5期20卷 744-746页

作者：刘莹范洪宽周慧王丽萍石玉华李惟吉林大学生命科学学院

成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）具有促进血管和神经形成的功能［１］，但它在体内作用过度则经常伴随着肿瘤的发生［２］．当前，研制和开发ＦＧＦ拮抗剂，以有效地抑制ＦＧＦ与细胞受体的结合，已成为国际性前沿课题．一种可行方法是设... 详细信息

成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）具有促进血管和神经形成的功能［１］，但它在体内作用过度则经常伴随着肿瘤的发生［２］．当前，研制和开发ＦＧＦ拮抗剂，以有效地抑制ＦＧＦ与细胞受体的结合，已成为国际性前沿课题．一种可行方法是设计合成ＦＧＦ受体结合部位的亲和配体...

关键词：成纤维细胞生长因子肽库 FGF拮抗剂拮抗剂

噬菌体随机肽库中B型钠尿肽结合肽的筛选及鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2009年第9期29卷 1837-1839页

作者：张振辉刘世明吴文言张焕堂郑伟楠广州医学院第二附属医院危重病科广东广州510260 广州医学院第二附属医院心血管内科广东广州510260 中山大学生命科学学院广东广州510275

目的利用噬菌体表面展示技术筛选与人B型钠尿肽(BNP)结合的特异性单链噬菌体多肽,并鉴定多肽与BNP的结合力。方法以BNP为靶分子,筛选噬菌体线性12肽库,ELISA鉴定阳性克隆。结果经4轮淘选后,随机挑选16个噬菌体克隆,其中10个克隆与BNP有... 详细信息

目的利用噬菌体表面展示技术筛选与人B型钠尿肽(BNP)结合的特异性单链噬菌体多肽,并鉴定多肽与BNP的结合力。方法以BNP为靶分子,筛选噬菌体线性12肽库,ELISA鉴定阳性克隆。结果经4轮淘选后,随机挑选16个噬菌体克隆,其中10个克隆与BNP有较强的结合能力,序列测定得到5种氨基酸序列;阳性克隆与BNP结合的剂量依赖实验结果提示淘选获得的多肽能与BNP特异性结合。结论经筛选得到的12肽能与BNP特异性结合,为下一步多肽的表达纯化及制备BNP检测试剂盒提供了重要的基础。

关键词： B型钠尿肽噬菌体肽库多肽

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

噬菌体肽库中筛选NMDA受体抗原表位

生物化学与生物物理进展 2003年第4期30卷 599-604页

作者：康晓楠孙长凯范明薛沿宁邵宁生赵杰韩大跃施广霞大连医科大学脑疾病研究所大连116027 军事医学科学院基础医学研究所北京100850 解放军第210医院大连116021 大连医科大学病理生理学教研室大连116027

为了获得人N 甲基 D 天冬氨酸受体 (NR)主亚基 (NR1)M3 M4环B细胞表位 ,以人NR1分子M3 M4环单克隆抗体MAB36 3淘筛噬菌体展示随机 12肽库 ,对筛选克隆进行特异性ELISA检测和竞争结合实验分析 .从 30个克隆中得到一个阳性克隆序列“VHTN... 详细信息

为了获得人N 甲基 D 天冬氨酸受体 (NR)主亚基 (NR1)M3 M4环B细胞表位 ,以人NR1分子M3 M4环单克隆抗体MAB36 3淘筛噬菌体展示随机 12肽库 ,对筛选克隆进行特异性ELISA检测和竞争结合实验分析 .从 30个克隆中得到一个阳性克隆序列“VHTNPSTWQPIL” (克隆 1) ,原核表达的NR1M 3 M 4环可以与克隆 1竞争结合MAB36 3.固相合成 5个表位探针短肽 ,发现其中只有R (2 2 )LRNPSKD可以与M3 M4环竞争结合抗体 ,将NPS三个氨基酸残基逐一敲除 ,缺失N或NP的合成肽和M 3 M 4环竞争抗体的能力减弱 ,缺失NPS的合成肽完全没有竞争能力 ,证明MAB36 3的表位为NPS ,S可能是关键性残基 .

关键词：噬菌体肽库 NMDA受体抗原表位 N-甲基-D天冬氨酸受体

从噬菌体展示随机肽库中筛选豌豆凝集素的结合肽

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江大学学报（医学版） 2005年第5期34卷 412-416页

作者：周翔詹金彪毛献荣王克夷浙江大学医学院生物化学教研室浙江杭州310006 中科院上海生化与细胞研究所上海200031

目的:从噬菌体展示随机肽库中筛选能与豌豆凝集素(PSA)特异结合的短肽。方法:①用豌豆凝集素(PSA)作为靶蛋白,对噬菌体展示的随机六肽库进行亲和筛选;②α-甲基-D-甘露糖苷对筛选出的噬菌体和PSA结合的影响实验(点印迹法);③选择性地合... 详细信息

目的:从噬菌体展示随机肽库中筛选能与豌豆凝集素(PSA)特异结合的短肽。方法:①用豌豆凝集素(PSA)作为靶蛋白,对噬菌体展示的随机六肽库进行亲和筛选;②α-甲基-D-甘露糖苷对筛选出的噬菌体和PSA结合的影响实验(点印迹法);③选择性地合成了3条6肽ARMWSF、RYDYSY、LRLRQL,用不同浓度的6肽对PSA、ConA与HRP的结合进行竞争抑制实验。结果:经过三轮筛选后,这些噬菌体展示肽有明显的富集,从第三轮挑选的22个克隆的插入氨基酸序列可分为三大类;点印迹结果表明,这些噬菌体展示肽能与PSA特异结合,而α-甲基-D-甘露糖苷不同程度地抑制这种结合;LRLRQL不溶于水,ARMWSF和RYDYSY对PSA和HRP的结合有抑制,而对ConA和HRP的结合没有明显抑制。结论:人工合成的2条6肽和PSA的结合部位与α-甲基-D-甘露糖苷和PSA结合的部位并非相同。

关键词：噬菌体肽库肽类/分离提纯模拟肽外源凝集素类/遗传学植物噬菌体展示随机肽库豌豆凝集素亲和筛选结合肽

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

噬菌体展示随机十五肽库的构建

中国药科大学学报 2014年第2期45卷 242-246页

作者：王筱蒙邱郑张芳王旻中国药科大学天然药物活性物质与功能国家重点实验室南京210009 南京中医药大学中药学南京210023

为了满足药物筛选的需要,本实验以pCANTAB 5E噬菌粒为载体,构建表达于丝状噬菌体尾丝蛋白P3N末端的随机十五肽库。通过自行设计引物与模板,人工合成编码随机十五肽的寡核苷酸片段及含有酶切位点的引物。通过PCR技术进行模板扩增获得编... 详细信息

为了满足药物筛选的需要,本实验以pCANTAB 5E噬菌粒为载体,构建表达于丝状噬菌体尾丝蛋白P3N末端的随机十五肽库。通过自行设计引物与模板,人工合成编码随机十五肽的寡核苷酸片段及含有酶切位点的引物。通过PCR技术进行模板扩增获得编码随机十五肽的基因。将扩增后的目的基因经过SfiΙ,NotΙ两个限制性内切酶双酶切后,与经同样双酶切的5'去磷酸化的噬菌粒载体连接,将重组产物电转入大肠埃希菌TG1感受态细胞。集合菌落后进行库容和多样性检验。所建肽库库容可达5×108。随机挑取20个克隆测序,其核苷酸序列及推断出的氨基酸序列均随机。成功构建了库容量与多样性都满足筛选要求的噬菌体展示随机十五肽库。

关键词：噬菌体展示肽库随机十五肽

大肠癌噬菌体展示肽库的构建及大肠癌早期检测分子的筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

第二军医大学学报 2010年第5期31卷 549-552页

作者：吴玲玲曹付傲常文军傅传刚曹广文第二军医大学基础部流行病学教研室上海200433 第二军医大学长海医院肛肠外科上海200433

目的构建大肠癌噬菌体展示肽库,筛选用于大肠癌早期检测的分子标志。方法选取30例第二军医大学长海医院肛肠外科手术后立刻冻存的大肠癌组织标本构建T7噬菌体展示肽库;用结合protein-A/G的琼脂糖珠分别富集大肠癌组及非肿瘤对照组血清... 详细信息

目的构建大肠癌噬菌体展示肽库,筛选用于大肠癌早期检测的分子标志。方法选取30例第二军医大学长海医院肛肠外科手术后立刻冻存的大肠癌组织标本构建T7噬菌体展示肽库;用结合protein-A/G的琼脂糖珠分别富集大肠癌组及非肿瘤对照组血清中的抗体进行5轮亲和筛选,富集大肠癌相关肽;随机挑取5轮筛选后的2000个噬菌体克隆,用ELISA方法进一步筛选与大肠癌患者血清和对照血清反应性存在差异的大肠癌相关标志物克隆,进行基因序列测定。应用通过Chilibot文献挖掘方法预测各克隆的蛋白功能,反证筛选结果。结果 (1)所建大肠癌噬菌体展示肽库的滴度为3.0×106pfu,经PCR鉴定其重组率为60%,库容为1.8×106pfu。(2)共筛选出18个有意义的噬菌体,测序后,预测其蛋白功能,其中12个与肿瘤的发生相关。结论应用ELISA对肿瘤重组抗原的噬菌体展示肽库进行筛选的方法 ,可以用来发现差异表达的抗原。所筛选出的噬菌体克隆所表达的抗原可用于早期筛检大肠癌。

关键词：肽库结直肠肿瘤生物学肿瘤标志

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

从噬菌体肽库中筛选弓形虫抗原模拟表位初探

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第6期25卷 515-517页

作者：何艳燕张述义朱民钱旻谭红岩上海市疾病预防控制中心上海200336 华东师范大学生命科学院上海200062

以弓形虫感染兔血清免疫球蛋白(Ig)作为靶分子,免疫筛选噬菌体随机7肽库和12肽库。经3轮筛选,随机挑取70个噬菌体克隆用ELISA检测其特异性,共获得43个阳性克隆。对23个ELISA反应较强的克隆进行测序,根据序列分析选择有代表性的克隆A7作... 详细信息

以弓形虫感染兔血清免疫球蛋白(Ig)作为靶分子,免疫筛选噬菌体随机7肽库和12肽库。经3轮筛选,随机挑取70个噬菌体克隆用ELISA检测其特异性,共获得43个阳性克隆。对23个ELISA反应较强的克隆进行测序,根据序列分析选择有代表性的克隆A7作为模拟表位抗原进行ELISA检测。对47份弓形虫感染兔血清进行ELISA检测,结果32份为阳性,敏感性为68.1%;155份健康人血清中弓形虫抗体呈阳性者10份,特异性为93.5%。从噬菌体随机肽库中能筛选到弓形虫抗原模拟表位有诊断弓形虫病的潜在价值。

关键词：弓形虫噬菌体肽库

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

从随机肽库中筛选血管内皮生长因子的抑制剂

中华肿瘤杂志 2002年第6期24卷 540-543页

作者：武婕张宏斌王捷杨太成冼江杨传红郑文岭陈惠鹏王清明广州军区总医院医学实验科 510010 军事医学科学院放射医学研究所

目的　从随机噬菌体肽库中筛选血管内皮生长因子 (VEGF1 6 5)的抑制剂 ,研究治疗实体瘤生长的小分子药物。方法　以VEGF1 6 5分子的受体KDR为靶分子 ,筛选随机噬菌体环 7肽库 ,通过竞争性洗脱得到能特异结合KDR的阳性噬菌体 ,以ELISA、... 详细信息

目的　从随机噬菌体肽库中筛选血管内皮生长因子 (VEGF1 6 5)的抑制剂 ,研究治疗实体瘤生长的小分子药物。方法　以VEGF1 6 5分子的受体KDR为靶分子 ,筛选随机噬菌体环 7肽库 ,通过竞争性洗脱得到能特异结合KDR的阳性噬菌体 ,以ELISA、细胞免疫组化、细胞ELISA、鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和MTT法 ,鉴定其结合活性和抑制活性。结果　得到 5个能特异结合靶分子的阳性噬菌体克隆 ,它们均可以与表面有KDR表达的细胞结合 ,其中噬菌体克隆 3和 13还能抑制VEGF1 6 5诱导鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成的活性。但MTT法结果显示 ,这两种噬菌体小肽对高表达KDR的阳性细胞生长没有明显的抑制活性。结论　从随机噬菌体肽库筛选到了能抑制VEGF1 6 5生物活性的克隆 ,为进一步研究小分子抑瘤药物提供了一定基础。

关键词：血管内皮生长因子肽库血管内皮生长因子抑制剂实体瘤肿瘤治疗