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中华实验和临床感染病杂志（电子版） 2021年第3期15卷 209-215页

作者：陈光炼刘海英高坎坎关小珊钟华敏邓秋连谌亚星梁文怡蒋莹谢永强黄莲芬广州医科大学广州市妇女儿童医疗中心检验科广州市510120 广州医科大学儿科学院广州市511483

目的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析验证既往发现的B族链球菌(GBS)序列分型(ST)、血清型蛋白指纹特征肽峰及D试验阳性相关肽峰,为临床GBS快速分型和有效诊疗提供依据。方法选取2015年1月至2017年12月全国多中心新... 详细信息

目的基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析验证既往发现的B族链球菌(GBS)序列分型(ST)、血清型蛋白指纹特征肽峰及D试验阳性相关肽峰,为临床GBS快速分型和有效诊疗提供依据。方法选取2015年1月至2017年12月全国多中心新生儿侵袭感染分离的237株GBS,均已知血清分型及多序列分型(MLST),运用Bruker微生物质谱仪采集菌体蛋白的肽指纹图谱,纸片扩散法分析菌株对红霉素和克林霉素耐药表型及红霉素诱导克林霉素的耐药发生率,用FlexAnalysis 3.0软件分析和验证特征肽峰。结果分子分型相关特征肽峰分析示,237株GBS均未见m/z 7 625肽峰,但48.3%ST17型菌株中(41/85)有m/z 7 620肽峰;所有ST1型菌株(2/2)均检出m/z 6 250肽峰且无m/z 6 888肽峰,即肽峰对(m/z 6 250+/6 888-),该峰对亦见于所有ST10菌株(31株)及ST2(2株)、ST4(1株)、ST156(1株)和ST579(1株)菌株。血清分型相关特征肽峰示,m/z 6 891在血清Ⅲ型(96.4%、133/138)和Ⅰb型(81.2%、56/69)常见,但在Ⅰa(90.5%、19/21)和Ⅴ型(87.5%、7/8)亦常见,故m/z 6 891肽峰无血清型特异性;m/z 7 620处小肽峰可见于29.7%Ⅲ型菌株(41/138),且均为ST17型,于其他血清型中偶见,包括Ⅴ型(12.5%、1/8)、Ⅰa型(9.5%、2/21)和Ⅰb(2.9%、2/69)。m/z 7620肽峰对Ⅲ/ST17型GBS判断的灵敏度和特异性分别可达48.2%和93.1%。D-试验阳性耐药相关特征峰,红霉素为中介或耐药,克林霉素敏感的菌株占33.76%(80/237),其中D-试验阳性占77.5%(62/80)。主要克隆亚型D试验阳性率从高到低依次为ST10/Ⅰb(100%、9/9)和ST12/Ⅰb或ST12/Ⅲ(100%、13/13)、ST17/Ⅲ(90%、27/30)、ST19/Ⅲ(40%、4/10)、ST23/Ⅰa(16.67%、1/6),ST10、ST12和ST17亚型D试验阳性率高达94.23%(49/52)。结论肽峰对(m/z 6 250+/6 888-)为ST1、ST10及少许罕见ST型GBS菌共有特征峰,m/z 6 891为不同血清型共有肽峰,而非Ⅲ/Ⅰb特异;m/z 7 620则为Ⅲ/ST17型菌特征肽峰,提示其可用于高毒力GBS的快速鉴定;100%ST10、ST12和90%ST17 D-试验阳性,其ST型特征肽峰可用于预测GBS D实验阳性。

关键词： B族链球菌基质辅助激光解析电离飞行时间质谱肽峰 D-试验

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基于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱的B组链球菌血清型预测模型验证

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中华生物医学工程杂志 2021年第2期27卷 134-141页

作者：黄莲芬陈光炼高坎坎李姿娴关小珊钟华敏邓秋连谢永强刘海英广州医科大学广州市妇女儿童医疗中心检验科 510120 广州医科大学附属脑科医院检验科 510370

目的验证基于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术的B组链球菌(Group B streptococcus,GBS)在线血清型预测模型的分型效能,为临床GBS菌血清型快速分型提供参考。方法选取2015至2018年全国多中心新生儿侵袭感染分离GBS菌... 详细信息

目的验证基于基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术的B组链球菌(Group B streptococcus,GBS)在线血清型预测模型的分型效能,为临床GBS菌血清型快速分型提供参考。方法选取2015至2018年全国多中心新生儿侵袭感染分离GBS菌237株,均已经应用血清凝集试验结合PCR法确认血清型和多重PCR法多位点序列分型(MLST),包括Ⅰa型18株、Ⅰb型70株、Ⅲ型140株、Ⅴ型8株、Ⅵ型1株。运用乙醇灭活-甲酸(乙腈)提取法提取蛋白,用微生物质谱仪采集蛋白指纹图谱,将图谱以m/z和峰强度数据格式输入GBSTyper,以传统血清凝集法血清型为金标准,采用召回率、精确率、F值(精确率和召回率的调和平均值)来评价GBSTyper分型效果。结果GBSTyper对120株(50.63%)GBS菌血清型分型正确,各血清型召回率从高到低依次为Ⅲ型(71.43%)、Ⅴ型(37.50%)、Ⅰb型(21.43%)、Ⅰa型(11.11%),Ⅲ型精确率最高(86.96%),血清型分型精确率仅为3.57%~46.88%,Ⅲ型F值最高(78.43%),Ⅰa、Ⅰb、Ⅴ型等F值仅为6.52%~29.41%。结论GBSTyper血清型快速分型模型对Ⅲ型血清型菌株分型有效性较高,而对Ⅰa、Ⅰb、Ⅴ型分型有效性很低。该模型能快速识别高危Ⅲ型GBS,对于围产期新生儿GBS感染预防及患儿的临床管理有重要指导意义。

关键词：无乳链球菌光谱法,质量,基质辅助激光解吸电离肽峰预测模型

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