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亚低温对急性肺损伤大鼠肺泡表面活性蛋白a含量的影响

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中国危重病急救医学 2011年第4期23卷 236-238,I0002页

作者：汤展宏盘璇胡军涛季晓芳广西医科大学第一附属医院重症医学科南宁530021

目的探讨亚低温对内毒素脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡表面活性蛋白a（SP-A）含量的影响.方法按随机数字表法将40只雄性Wistar大鼠分组.采用气管内滴入LPS制备ALI动物模型;对照组气管内只滴人生理盐水.模型组和对照组... 详细信息

目的探讨亚低温对内毒素脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠肺泡表面活性蛋白a（SP-A）含量的影响.方法按随机数字表法将40只雄性Wistar大鼠分组.采用气管内滴入LPS制备ALI动物模型;对照组气管内只滴人生理盐水.模型组和对照组分别于术后1 h和8 h处死8只大鼠;亚低温组于滴入LPS 1 h后将体温降低并维持在32.5～33.0℃,8 h后处死8只大鼠.各组分别于术前及术后1 h、8 h测定动脉血气,并计算氧合指数（PaO2/FiO2）;采用酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中SP-A含量;光镜下观察肺组织形态结构的变化.结果气管内滴入LPS 1 h后,大鼠PaO2/FiO2均达到ALI的诊断标准.与对照1 h组比较,模型1 h组BALF中SP-A含量（μg/L）明显降低（53.27±1.95比74.81±6.55,P＜0.01）;模型8 h组和亚低温8 h组SP-A含量（4.35±2.76和51.36±2.33）均较对照8 h组（70.81±5.01）明显降低,但亚低温8 h组SP-A含量较模型8 h组明显增高（均P＜0.01）.光镜下观察,对照1 h和8 h组肺泡结构基本正常;模型8 h组肺组织炎症反应最重;模型1 h组和亚低温8 h组肺组织炎症反应较模型8 h组有所减轻.结论亚低温能延缓内毒素诱导的ALI大鼠早期肺泡内SP-A含量下降的程度,在一定程度上可减轻肺损伤.

关键词：亚低温脂多糖肺损伤,急性肺泡表面活性蛋白a

单肺通气对大鼠肺组织细胞凋亡及肺泡表面活性蛋白的影响

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单肺通气对大鼠肺组织细胞凋亡及肺泡表面活性蛋白的影响

作者：易娟广西医科大学

学位级别：硕士

目的研究单肺通气（OLV）大鼠肺组织细胞凋亡及肺泡表面活性蛋白a（SP-A）和肺泡表面活性蛋白B（SP-B）表达的变化,并探讨其在OLV所致肺损伤中所起的作用。方法42只雄性SD大鼠随机分成：单肺通气组（A组）、双肺通气对照组（B组）... 详细信息

目的研究单肺通气（OLV）大鼠肺组织细胞凋亡及肺泡表面活性蛋白a（SP-A）和肺泡表面活性蛋白B（SP-B）表达的变化,并探讨其在OLV所致肺损伤中所起的作用。方法42只雄性SD大鼠随机分成：单肺通气组（A组）、双肺通气对照组（B组）和空白对照组（C组）。C组为自主呼吸组,根据不同的通气时间,A组和B组分别分成三个亚组：A1组（OLV0.5h,恢复通气0.5h）,A2组（OLV1h,恢复通气0.5h）,A3组（OLV1.5h,恢复通气0.5h）和B1组（双肺通气1h）,B2组（双肺通气1.5h）,B3组（双肺通气2h）,将自制气管导管过深插管至右肺建立右肺OLV模型,分别取各组左侧肺组织,普通光学显微镜下观察其肺泡结构及肺间质的病理变化,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的末端标记（TUNEL）法检测肺组织细胞的凋亡,免疫印迹法检测肺组织凋亡执行蛋白Caspase-3以及SP-A和SP-B蛋白水平。结果与C组相比,A组和B组各亚组肺组织表现出肺泡充血水肿,肺间质逐渐增厚,且随着通气时间延长变化逐渐加重并且这些变化在A组中表现更为明显;细胞凋亡在A2、A3组明显增加（P＜0.05）,且随着OLV时间延长,增加更加明显（A2组＜A3组,P＜0.05）,与双肺通气对照组B组中对应各亚组比较,A2、A3组细胞凋亡率比B2、B3组显著增加（P＜0.05）,且在细胞凋亡执行阶段起关键作用的Caspase-3酶蛋白表达的变化趋势与凋亡率一致;与C组比较,A组各亚组SP-A和SP-B蛋白均表达减少（P＜0.05）,且随着OLV时间延长,减少更加明显（P＜0.05）;与B组中对应各亚组比较,A组中各亚组肺组织中SP-A和SP-B蛋白均表达减少（P＜0.05）。结论随着单肺时间的延长,OLV可导致肺组织结构的改变,并可导致细胞凋亡且SP-A和SP-B蛋白表达下调,由此推测细胞凋亡以及SP-A和SP-B蛋白表达的减少可能是OLV导致肺损伤的重要因素。

关键词：单肺通气细胞凋亡肺泡表面活性蛋白a 肺泡表面活性蛋白B

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单肺通气大鼠肺泡表面活性蛋白表达的研究

中国癌症防治杂志 2012年第1期4卷 42-45页

作者：易娟黄冰黎阳阮林彭丹晖林飞顾永辉黄宇陈锡华广西医科大学研究生学院广西医科大学附属肿瘤医院麻醉科南宁530021

目的研究单肺通气(OLV)大鼠肺组织肺泡表面活性蛋白a(SP-A)和肺泡表面活性蛋白B(SP-B)表达的变化。方法 42只SD大鼠随机分成单肺通气组(A组)、双肺通气对照组(B组)和空白对照组(C组)。A组和B组根据不同的通气时间分成亚组A1、A2、A3组... 详细信息

目的研究单肺通气(OLV)大鼠肺组织肺泡表面活性蛋白a(SP-A)和肺泡表面活性蛋白B(SP-B)表达的变化。方法 42只SD大鼠随机分成单肺通气组(A组)、双肺通气对照组(B组)和空白对照组(C组)。A组和B组根据不同的通气时间分成亚组A1、A2、A3组和B1、B2、B3组,将气管导管过深插管至右肺建立右肺OLV模型。分别取各组左右两侧肺组织,光镜下观察其肺泡结构及肺间质的病理变化,免疫印迹法检测肺组织中SP-A和SP-B蛋白水平。结果与C组相比较,随着通气时间的延长,A组和B组肺组织逐渐表现出肺泡充血水肿、肺间质逐渐增厚,且在A组非通气侧这些病理变化更为严重。与C组比较,A组各亚组SP-A和SP-B蛋白表达均减少(P蛋白表达减少更加明显(P蛋白表达均减少(P蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),右侧肺SP-B蛋白表达在A1、A2组差异无统计学意义(P>0.05),而在A3组则比B3组蛋白表达减少(P蛋白在A组各亚组左侧肺均比右侧肺蛋白表达减少(P<0.05)。结论 OLV可致SP-A和SP-B表达下调,且非通气侧比相同时间的双肺通气肺组织下调更明显,这可能是OLV所致肺损伤更加严重的重要因素。

关键词：单肺通气肺泡表面活性蛋白a 肺泡表面活性蛋白B

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肺泡表面活性物质A在淹溺性肺损伤中的作用

国际呼吸杂志 2007年第15期27卷 1184-1187页

作者：米晓燕金发光第四军医大学附属唐都医院呼吸内科西安710038

淹溺会导致Ⅱ型肺泡上皮细胞功能受损，影响肺泡表面活性物质的合成和分泌，可进一步发展为AL1、ARDS。表面活性物质由脂质和蛋白构成，SP—A是最早发现，信号最为丰富的蛋白，是表面活性物质的重要组成部分，在疾病的鉴别、诊断、发展... 详细信息

淹溺会导致Ⅱ型肺泡上皮细胞功能受损，影响肺泡表面活性物质的合成和分泌，可进一步发展为AL1、ARDS。表面活性物质由脂质和蛋白构成，SP—A是最早发现，信号最为丰富的蛋白，是表面活性物质的重要组成部分，在疾病的鉴别、诊断、发展和预后中占有重要地位。本文就近年来SP—A在肺损伤中的变化特点和临床意义作一综述。

关键词：淹溺急性肺损伤急性呼吸窘迫综合症肺泡表面活性蛋白a

SP-A通过抑制TSLP激活DC的过程参与缓解哮喘气道炎症反应

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SP-A通过抑制TSLP激活DC的过程参与缓解哮喘气道炎症反应

作者：薛明慧上海交通大学

学位级别：硕士

哮喘(Asthma)是一类由多种非免疫细胞和免疫细胞及细胞组分共同参与的慢性变应性疾病,临床表现为发作性的喘息和气促,严重者可出现呼吸困难的症状,病理改变主要为黏膜水肿,嗜酸性粒细胞和中性粒细胞等的浸润和黏液增多等等。哮喘发病机... 详细信息

哮喘(Asthma)是一类由多种非免疫细胞和免疫细胞及细胞组分共同参与的慢性变应性疾病,临床表现为发作性的喘息和气促,严重者可出现呼吸困难的症状,病理改变主要为黏膜水肿,嗜酸性粒细胞和中性粒细胞等的浸润和黏液增多等等。哮喘发病机制复杂,过程中多以由Th2型细胞和细胞因子参与的Th2型免疫反应为主。临床上常选用糖皮质激素、β受体激动剂、抗组胺类药物、白三烯和茶碱类药物等控制哮喘症状,但上述药物通常对部分严重哮喘患者和对药物耐受患者治疗效果不佳。因此寻找新的治疗靶点和更有效的哮喘药物仍然需要进行不断探索和研究。肺泡表面活性蛋白a(Surfactant Protein A,SP-A)主要来源于II型肺泡上皮细胞,在有关小鼠哮喘和其他肺部炎症性疾病的研究中发现,SP-A基因的敲除可导致更为严重的炎症细胞浸润和局部炎症细胞因子的升高,而在部分疾病模型中给予外源性SP-A补充对于炎症表现能够起到一定的治疗效果。树突状细胞(Dendritic Cells,DC)是体内抗原提呈能力最强的细胞之一,滤泡辅助性T细胞(T Follicular Cells,Tfh)是CD4T细胞的一种,高表达CXCR5(C-X-C Chemokine Receptor Type 5,CXCR5),可进入生发中心辅助B细胞完成体细胞高频突变、抗体类转换及抗体亲和力的成熟。胸腺基质淋巴生成素(Thymic Stromal Lymphopoietin,TSLP)属于IL-2细胞因子家族,具有刺激胸腺细胞增殖和体外促进B淋巴细胞生成的功能,在T细胞的增殖分化中有重要作用,参与哮喘发病过程中的气道慢性炎症、气道高反应。TSLP受体在多种细胞表面均有分布,DC细胞就是TSLP作用的靶细胞之一,TSLP可通过激活DC参与T细胞分化。曾有研究发现,哮喘患者血浆中TSLP水平升高和Tfh细胞亚群分布异常。基于上述研究背景可推测SP-A是否可以通过抑制TSLP激活DC这一过程影响Tfh细胞亚群比例,从而在哮喘炎症过程中起到一定的缓解作用。本研究将通过动物实验和临床研究相结合的方式对以上推测进行证实,为缓解哮喘症状寻找新的靶点和治疗思路提供一些参考。第一部分:哮喘患者与健康供体外周血Tfh亚群比例和血清SP-A水平及功能检测。共纳入54例哮喘患者和39例性别年龄均与之匹配的健康对照者的抗凝血标本,通过流式细胞术检测外周血循环Tfh比例及各Tfh亚群比例,通过ELISA检测血清SP-A和Ig E水平,分析哮喘患者组和健康对照组之间上述检测结果是否具有统计学差异。对比分离来源于重症哮喘患者和健康志愿者肺泡灌洗液中的SP-A,通过刺激DC细胞,DC与T细胞共培养结果分析哮喘患者来源的SP-A在调节TSLP刺激DC从而影响T细胞分化这一过程中功能相较于健康对照组是否有改变,以及SP-A参与调节上述过程的方式。流式分析结果显示,外周血循环总Tfh比例在哮喘患者组和健康对照组之间不具统计学差异(P>0.05),Tfh1亚群在哮喘患者组中相对降低但没有统计学差异(P>0.05),Tfh2亚群在哮喘患者组中升高且具有显著性差异(P0.05)。应用分别来源于哮喘患者和健康对照者的SP-A来干预TSLP刺激DC这一过程的结果显示,添加哮喘患者源SP-A与TSLP共同刺激的DC诱导T细胞分化的IL-4Tfh比例相对较高,这表示哮喘患者SP-A拮抗TSLP功能相对健康对照缺失。根据以上结果可推测哮喘患者的SP-A功能异常,这种改变能够影响Tfh亚群比例。第二部分:SP-A对TSLP活化DC介导变应性炎症的影响。使用Sp-a和同系背景的c57 BL/6品系的野生型小鼠建模,通过尾静脉注射经TSLP和鸡卵清蛋白(Chicken Ovalbumin,OVA)刺激的CD11cDC致敏小鼠,鼻内滴注OVA激发方法构建小鼠模型。激发后,通过检测受试小鼠肺部炎症细胞浸润程度、支气管肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎症细胞计数及炎症细胞因子等的表达反映小鼠炎症发作水平。通过流式分析小鼠纵隔淋巴结Tfh细胞分群,ELISA检测血清Ova-specific Ig E和Ig E等免疫球蛋白水平,分析对照组和实验组之间上述结果是否有显著性差异。通过对比Sp-a小鼠和野生型小鼠来源的Tfh细胞与同系小鼠B细胞共培养,ELISA检测共培养结束后上清液的抗体浓度的差异,评估Sp-a小鼠Tfh辅助B细胞合成抗体的能力。Sp-a小鼠骨髓细胞来源DC细胞在体外经添加或不添加SP-A与TSLP刺激后,经多色流式细胞术检测其表面共刺激分子和胞内细胞因子的表达。将上述分组刺激的DC与同系小鼠的CD4T细胞共培养,流式细胞术检测Tfh细胞的分化与组成。诱导分化的Tfh细胞与同系小鼠的B细胞共培养,通过ELIS

关键词：哮喘肺泡表面活性蛋白a 胸腺基质淋巴细胞生成素树突状细胞滤泡辅助性T细胞

血清sRAGE、HMGB1及SP-A在新生儿急性呼吸窘迫综合征诊断及预后评估中的价值研究

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国际检验医学杂志 2022年第10期43卷 1221-1225,1233页

作者：金少娟茅红英苏州大学附属张家港医院/张家港市第一人民医院新生儿科江苏苏州215600

目的探讨血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和肺泡表面活性蛋白a(SP-A)在新生儿急性呼吸窘迫综合征(ARDS)诊断及预后评估中的应用价值。方法选择2018年10月至2020年10月于该院确诊ARDS的新生儿80例作... 详细信息

目的探讨血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和肺泡表面活性蛋白a(SP-A)在新生儿急性呼吸窘迫综合征(ARDS)诊断及预后评估中的应用价值。方法选择2018年10月至2020年10月于该院确诊ARDS的新生儿80例作为ARDS组,同期选择健康新生儿50例作为对照组,ARDS患儿根据治疗结局分为存活组和死亡组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测新生儿入院时的血清sRAGE、HMGB1和SP-A水平,比较ARDS不同分级患儿血清sRAGE、HMGB1和SP-A水平;采用多因素Logistic回归分析筛选死亡的独立预测因子;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sRAGE、HMGB1和SP-A水平预测死亡的效能。结果 ARDS组比对照组,死亡患儿比存活患儿,ARDSⅢ~Ⅳ级患儿比ARDSⅠ~Ⅱ级患儿血清sRAGE、HMGB1和SP-A水平明显升高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,ARDSⅢ~Ⅳ级及血清sRAGE、HMGB1和SP-A水平升高是死亡的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清sRAGE、HMGB1、SP-A水平及联合诊断预测ARDS新生儿死亡的曲线下面积分别为0.834、0.855、0.869和0.899(P<0.05)。结论 ARDS新生儿血清sRAGE、HMGB1和SP-A水平明显升高与疾病严重程度和生存预后密切相关,联合诊断可提高预测死亡结局的准确性。

关键词：急性呼吸窘迫综合征可溶性晚期糖基化终末产物受体高迁移率族蛋白B1 肺泡表面活性蛋白a

单肺通气期间延长吸气时间对患者肺损伤的影响

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南通大学学报（医学版） 2023年第4期43卷 319-322页

作者：蔡雪姣杜敏杜伯祥江苏省南通市第一人民医院南通大学第二附属医院麻醉科南通226014

目的:观察胸科胸腔镜下肺叶切除术中,单肺通气期间延长吸气时间对患者肺损伤的影响。方法:选择南通市第一人民医院2020年9月—2021年9月同组医师手术的患者50例,年龄20~65岁,ASAⅠ~Ⅱ级,均在全麻机械通气胸腔镜下行肺叶切除术,采用随机... 详细信息

目的:观察胸科胸腔镜下肺叶切除术中,单肺通气期间延长吸气时间对患者肺损伤的影响。方法:选择南通市第一人民医院2020年9月—2021年9月同组医师手术的患者50例,年龄20~65岁,ASAⅠ~Ⅱ级,均在全麻机械通气胸腔镜下行肺叶切除术,采用随机数表法分为对照组(C组,n=25)和观察组(E组,n=25)。单肺通气期间,C组吸呼比(inspiratory-to-expiratory ratio,I∶E)=1∶2;E组I∶E=1∶1。取单肺通气后切皮前(T_(0))、侧卧单肺通气后30 min(T_(1))、1 h(T_(2))3个时间点,抽取患者桡动脉血2 mL进行血气分析;抽取中心静脉血5 mL检测TNF-α、IL-6、IL-10水平,同时检测患者支气管肺泡灌洗液肺泡表面活性蛋白(surfactant protein,SP)-A、SP-D水平。结果:(1)与T_(0)相比,两组患者T_(2)时TNF-α明显升高(P肺泡灌洗液中的SP-A水平在T_(1)、T_(2)时明显升高,SP-D水平在T_(2)时明显升高(P<0.05);E组患者的SP-A及SP-D在T_(2)时明显较C组降低(P<0.05)。结论:单肺通气时延长吸气时间(I∶E=1∶1)可有效改善氧合,并在一定程度上减轻术中相关肺损伤。

关键词：单肺通气吸呼比肿瘤坏死因子-α 白细胞介素6 白细胞介素10 肺泡表面活性蛋白a 肺泡表面活性蛋白D

TTF-1、SP-A在肺腺癌诊断及鉴别诊断中的价值

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临床与实验病理学杂志 2008年第3期24卷 280-283页

作者：王彩霞王晓吕淑慧聂美楠王桂梅佳木斯大学附属第一医院病理科佳木斯154002

目的评价甲状腺转录因子-1(TTF-1)、肺泡表面活性蛋白a(SP-A)在肺腺癌中表达的敏感性和特异性,探讨他们在肺腺癌诊断及鉴别诊断中的价值。方法选择经组织学和临床资料证实的肺原发性腺癌40例、转移性腺癌13例,采用免疫组化EnV ision法检... 详细信息

目的评价甲状腺转录因子-1(TTF-1)、肺泡表面活性蛋白a(SP-A)在肺腺癌中表达的敏感性和特异性,探讨他们在肺腺癌诊断及鉴别诊断中的价值。方法选择经组织学和临床资料证实的肺原发性腺癌40例、转移性腺癌13例,采用免疫组化EnV ision法检测TTF-1及SP-A的表达情况。结果40例肺腺癌中有32例表达TTF-1、27例表达SP-A;13例转移性腺癌中只有1例肝细胞癌胞质表达TTF-1、无SP-A表达。TTF-1和SP-A在肺腺癌中表达的敏感性分别为80%和67.5%、特异性均为100%。结论TTF-1在肺腺癌中表达有较高的敏感性和特异性,在排除甲状腺癌可能后,可作为鉴别肺原发性和转移性腺癌的可靠标记;而SP-A敏感性较低且随分化程度降低表达下降,故TTF-1对肺腺癌鉴别诊断的价值优于SP-A。

关键词：肺腺癌甲状腺转录因子-1 肺泡表面活性蛋白a 免疫组织化学鉴别诊断

多巴胺和去甲肾上腺素对脓毒症休克兔急性肺损伤的保护作用

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南京医科大学学报（自然科学版） 2014年第5期34卷 617-620页

作者：宋杨张铮秦海东沈华鲍磊南京医科大学附属南京医院急诊科江苏南京210006

目的:评价多巴胺和去甲肾上腺素对脓毒症休克兔急性肺损伤的保护作用。方法:采用盲肠结扎穿孔(CLP)联合静脉注入内毒素的方法复制脓毒症休克动物模型,将63只新西兰大白兔分为假手术对照组(A组,n=7)、模型组(B组,n=14)、多巴胺治疗组(C组... 详细信息

目的:评价多巴胺和去甲肾上腺素对脓毒症休克兔急性肺损伤的保护作用。方法:采用盲肠结扎穿孔(CLP)联合静脉注入内毒素的方法复制脓毒症休克动物模型,将63只新西兰大白兔分为假手术对照组(A组,n=7)、模型组(B组,n=14)、多巴胺治疗组(C组,n=14)、去甲肾上腺素治疗组(D组,n=14)、多巴胺联合去甲肾上腺素治疗组(E组,n=14),各组分别于造模后3、6 h处死7只。留取血清标本,用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各时相点血清中肺泡表面活性蛋白a与肺泡表面活性蛋白D(surfactant protein A and surfactant protein D,SP-A and SP-D)的浓度值,并留取肺组织标本做光镜和电镜检查。结果:各组血清中SP-A与SP-D的浓度值在各时相点均高于A组(P0.05);D、E组血清中SP-A与SP-D的浓度值在3、6 h均显著低于B组(P<0.05)。形态学观察发现D、E组肺组织损伤明显轻于B、C组。结论:脓毒症休克时肺组织损伤严重;单独应用去甲肾上腺素或联合应用去甲肾上腺素和多巴胺可以有效减轻脓毒症休克引起的肺组织损伤,对肺组织起保护作用。

关键词：脓毒症休克急性肺损伤肺泡表面活性蛋白a 肺泡表面活性蛋白D