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肠细菌粘附和肠免疫力的调节 Ⅰ.细菌如何吸附和定殖于家禽的肠道

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养禽与禽病防治 2005年第7期 14-15页

作者：凌育遷广东省家禽科学研究所广州市石井镇510430

为减少集约化饲养场的致病微生物的感染,在饲料中限制使用抗生素已引起了日粮配合、饲养管理和饲养环境的种种改变.在更为基础的水平上,分子科学(molecular science)(如免疫学)的进步达到了这样的一个水平,即为减少动物疾病对动物生产... 详细信息

为减少集约化饲养场的致病微生物的感染,在饲料中限制使用抗生素已引起了日粮配合、饲养管理和饲养环境的种种改变.在更为基础的水平上,分子科学(molecular science)(如免疫学)的进步达到了这样的一个水平,即为减少动物疾病对动物生产的危害,我们能在饲养策略和使所饲养的动物获得较好的获得性免疫力方面应用这些知识.

关键词：肠细菌黏膜粘附肠免疫力获得性免疫糖生物学菌毛寡糖-受体类似物

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猪场内外环境中抗铜肠细菌及其抗性基因的研究

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猪场内外环境中抗铜肠细菌及其抗性基因的研究

作者：贡娇娜云南大学

学位级别：硕士

饲料中添加抗生素和重金属盐可预防畜禽生病、促进畜禽生长、提高饲料转化率,因此高剂量的重金属盐如硫酸铜和氧化锌被添加到猪饲料中。长期使用重金属盐作为饲料导致人们对重金属在畜禽产品中的残留和随粪便排入环境造成污染的关注。... 详细信息

饲料中添加抗生素和重金属盐可预防畜禽生病、促进畜禽生长、提高饲料转化率,因此高剂量的重金属盐如硫酸铜和氧化锌被添加到猪饲料中。长期使用重金属盐作为饲料导致人们对重金属在畜禽产品中的残留和随粪便排入环境造成污染的关注。欧盟国家首先禁止除治疗目的以外的抗生素添加到饲料中,但抗生素抗性细菌仍然在畜禽养殖环境中被分离到。对这些抗性细菌的研究了发现抗重金属的基因和抗生素抗性基因同时存在抗性质粒上。从这些研究结果可以推断在停止使用抗生素作为饲料添加剂后,重金属继续作为饲料添加剂使用选择并维持了畜禽养殖环境的抗生素抗性基因。欧盟国家目前已经把饲料中添加硫酸铜和氧化锌的量控制在营养需要的水平。我国猪场饲料中仍然添加高剂量的硫酸铜和氧化锌作为生长促进剂使用,但猪场环境中抗铜细菌的发生情况及这些抗性细菌是否带有抗铜基因、抗生素抗性基因和毒力基因未见研究报道。为了解猪场环境中抗性细菌的发生率,本论文研究从昆明地区9个饲料中添加不同量金属盐的规模化猪场中采集不同年龄段的猪粪样品及猪场周边的土壤样品分离抗铜细菌。从猪粪样品中共筛选出340株抗铜肠细菌,329株被鉴定为大肠杆菌(E. coli)、9株被鉴定为变形杆菌属(Proteus)细菌、2株被鉴定为志贺氏菌属(Shigella)细菌。完全使用预混饲料的养猪场抗铜大肠杆菌的发生率达到45.8%以上,使用50 %预混饲料的养猪场抗铜大肠杆菌的发生率达到28.3%以上,而未使用预混饲料的养猪场抗铜大肠杆菌发生率在3.3%以下。仔猪生长阶段猪粪中抗铜大肠杆菌出现的百分率在82.20%-47.5%之间,生长育肥猪阶段猪粪中抗铜大肠杆菌出现的百分率在60.0%-26.3%之间,出栏猪阶段猪粪中抗铜大肠杆菌出现的百分率在33.3%-13.8%之间。猪场周边的土壤样品中存在15%的抗铜肠细菌。结果表明:在饲料中添加金属盐的猪场猪粪中普遍存在具有铜抗性的肠细菌,不同养猪场猪粪中抗铜大肠杆菌的发生率与饲料中添加的硫酸铜量成正相关性,不同生长阶段猪粪中抗铜大肠杆菌的发生率与饲料中添加的硫酸铜量成正相关性;猪场中的抗性细菌有向周边环境扩散的趋势。为检测抗铜菌株中所携带的抗性基因和毒力基因,本研究用PCR方法在抗铜菌株(包括大肠杆菌、变形杆菌和志贺氏菌)中检测到了抗铜基因pcoA、pcoC、pcoD,进一步在携带抗铜基因pco的抗铜菌株中检测到了抗生素抗性基因strA、strB、tet(B)和毒力产生基因fimH、traT。这个研究结果表明:饲料中添加金属盐作为生长促进剂会导致猪肠道中铜抗性肠细菌发生,同时也会协同选择并维持了细菌的抗生素抗性和产毒素的能力。

关键词：肠细菌抗铜性抗生素抗基因毒力基因协同选择

猪粪中抗锌肠细菌及抗锌基因、抗生素抗性基因和毒力基因研究

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猪粪中抗锌肠细菌及抗锌基因、抗生素抗性基因和毒力基因研究

作者：窦秋燕云南大学

学位级别：硕士

饲料中添加高剂量锌在减少断奶仔猪腹泻、促进生长和提高饲料利用率的同时也造成猪肠道中产生抗性菌株和抗性基因。这些抗性细菌进入环境后其携带的抗性基因有可能被传递到人体对人类的健康构成潜在威胁。国外已经有研究报道说明禁止使... 详细信息

饲料中添加高剂量锌在减少断奶仔猪腹泻、促进生长和提高饲料利用率的同时也造成猪肠道中产生抗性菌株和抗性基因。这些抗性细菌进入环境后其携带的抗性基因有可能被传递到人体对人类的健康构成潜在威胁。国外已经有研究报道说明禁止使用抗生素作为生长促进剂添加到猪饲料中后,在养猪场环境中抗生素抗性细菌仍然保持高发生率的原因可能是由于铜盐和锌盐仍然被作为生长促进剂添加到猪饲料中。我国猪场的预混饲料中仍然添加铜盐和锌盐作为生长促进剂使用,但来自猪场环境中抗锌细菌发生率及这些抗锌细菌是否带有抗生素抗性基因及毒力产生基因未见研究报道。本研究从云南昆明周边9个饲料中添加不同量金属盐的规模化猪场中采集不同年龄段的猪粪样品,分离筛选鉴定了抗锌肠细菌并检测这些抗锌菌株中是否携带抗锌基因、抗生素抗性基因和毒力产生基因。从样品中共筛选出301株抗锌肠细菌,包括246株大肠杆菌（E. coli）、53株变形杆菌属（Proteus）细菌、2株志贺氏菌属（Shigella）细菌。完全使用预混饲料养猪场抗锌大肠杆菌的发生率达48.9%以上,使用50 %预混饲料养猪场抗锌大肠杆菌的发生率达25.6%以上,未使用预混饲料的养猪场抗锌大肠杆菌发生率在3.33%以下。仔猪生长阶段猪粪中抗锌大肠杆菌的发生率在48.3%～72.0%之间,生长育肥猪阶段猪粪中抗锌大肠杆菌的发生率在25.0%～47.5%之间,出栏猪阶段猪粪中抗锌大肠杆菌出现的百分率在8.3%～27.8%之间。在抗锌菌株（包括大肠杆菌、变形杆菌和志贺氏菌）中检测到了抗锌基因zntA,进一步在携带抗锌基因zntA的抗锌菌株中检测到了抗生素抗性基因strA、strB、tet（B）和毒力产生基因fimH、traT。本论文的研究结果表明:在饲料中添加金属盐的猪场猪粪中普遍存在具有锌抗性的肠细菌;不同养猪场猪粪中抗锌大肠杆菌的发生率与饲料中添加的氧化锌量成正相关性,不同生长阶段猪粪中抗锌大肠杆菌的发生率与饲料中添加的氧化锌量成正相关性;饲料中添加金属盐作为生长促进剂会导致猪肠道中锌抗性肠细菌发生,同时也会协同选择并维持细菌的抗生素抗性和产毒素的能力。

关键词：肠细菌锌抗性抗生素抗性基因毒力产生基因协同选择

固氮阴沟肠细菌(Enterobacter cloacae)某些生理特性的研究

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植物生理与分子生物学 1981年第1期 43-48页

作者：尤崇构里景伟宋未张荣菊周淑萍叶松广中国农业科学院原子能利用研究所广东省微生物研究所

从广东省水稻根际分离出的阴沟肠细菌是一种兼性厌氧细菌。它具有较高的固氮能力。在培养过程中产生乳酸和氢、二氧化碳、氨等大量气体,并能排出一些含肽物质。在好气条件下,介质中硝酸盐能诱导形成硝酸还原酶,其活性随硝酸盐浓度增加... 详细信息

从广东省水稻根际分离出的阴沟肠细菌是一种兼性厌氧细菌。它具有较高的固氮能力。在培养过程中产生乳酸和氢、二氧化碳、氨等大量气体,并能排出一些含肽物质。在好气条件下,介质中硝酸盐能诱导形成硝酸还原酶,其活性随硝酸盐浓度增加而升高,硝酸盐浓度过高时抑制其活性。固氮酶活性则相反,随硝酸盐浓度增加而急剧下降,直至全部丧失。在厌氧条件下E.cloacae具有需硝酸的固氮活性。

关键词：亚硝酸盐氮化合物固氮活性 Enterobacter cloacae 硝酸还原酶厌氧条件生理特性阴沟肠细菌肠道细菌

Ileocecal valve dysfunction in small intestinal bacterial overgrowth: A pilot study

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World Journal of Gastroenterology 2012年第46期18卷 6801-6808页

作者： Larry S Miller Anil K Vegesna Aiswerya Madanam Sampath Shital Prabhu Sesha Krishna Kotapati Kian Makipour Department of Medicine Section of Gastroenterology Hofstra Northshore Long Island Jewish Hospital School of Medicine at Hofstra University Department of Medicine Section of Gastroenterology Temple University Hospital

AIM: To explore whether patients with a defective ileocecal valve (ICV)/cecal distension reflex have small intestinal bacterial overgrowth. METHODS: Using a colonoscope, under conscious sedation, the ICV was intubated and the colonoscope was placed within the terminal ileum (TI). A manometry catheter with 4 pressure channels, spaced 1 cm apart, was passed through the biopsy channel of the colonoscope into the TI. The colonoscope was slowly withdrawn from the TI while the manometry catheter was advanced. The catheter was placed across the ICV so that at least one pressure port was within the TI, ICV and the cecum respectively. Pressures were continuously measured during air insufflation into the cecum, under direct endoscopic visualization, in 19 volunteers. Air was insufflated to a maximum of 40 mmHg to prevent barotrauma. All subjects underwent lactulose breath testing one month after the colonoscopy. The results of the breath tests were compared with the results of the pressures within the ICV during air insufflation. RESULTS: Nineteen subjects underwent colonoscopy with measurements of the ICV pressures after intubation of the ICV with a colonoscope. Initial baseline readings showed no statistical difference in the pressures of the TI and ICV, between subjects with positive lactulose breath tests and normal lactulose breath tests. The average peak ICV pressure during air insufflation into the cecum in subjects with normal lactu-lose breath tests was significantly higher than cecal pressures during air insufflation (49.33 ± 7.99 mmHg vs 16.40 ± 2.14 mmHg, P = 0.0011). The average percentage difference of the area under the pressure curve of the ICV from the cecum during air insufflations in subjects with normal lactulose breath tests was significantly higher (280.72% ± 43.29% vs 100% ± 0%, P = 0.0006). The average peak ICV pressure during air insufflation into the cecum in subjects with positive lactulose breath tests was not significantly different than cecal pressures during air insufflation 21.23 ± 3.52 mmHg

关键词：肠细菌试验生长过度盲肠扩张压力范围注气过程毫米汞柱

Small intestine bacterial overgrowth and irritable bowel syndrome-related symptoms:Experience with Rifaximin

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World Journal of Gastroenterology 2009年第21期15卷 2628-2631页

作者： Sergio Peralta Claudia Cottone Tiziana Doveri Piero Luigi Almasio Antonio Craxi Operative Unit of Gastroenterology and Hepatology

AIM:To estimate the prevalence of small intestinal bacterial overgrowth(SIBO) in our geographical area(Western Sicily,Italy) by means of an observational study,and to gather information on the use of locally active,non-absorbable antibiotics for treatment of SIBO.METHODS:Our survey included 115 patients fulfilling the Rome □ criteria for diagnosis of irritable bowel syndrome(IBS);a total of 97 patients accepted to perform a breath test with lactulose(BTLact),and those who had a positive test,received Rifaximin(Normix,Alfa Wassermann) 1200 mg/d for 7 d;3 wk after the end of treatment,the BTLact was repeated.RESULTS:Based on the BTLact results,SIBO was present in about 56% of IBS patients,and it was responsible for some IBS-related symptoms,such as abdominal bloating and discomfort,and diarrhoea.1-wk treatment with Rifaximin turned the BTLact to negative in about 50% of patients and significantly reduced the symptoms,especially in those patients with an alternated constipation/diarrhoea-variant IBS.CONCLUSION:SIBO should be always suspected in patients with IBS,and a differential diagnosis is done by means of a "breath test".Rifaximin may represent a valid approach to the treatment of SIBO.

关键词：肠细菌综合征症状生长过度抗生素治疗鉴别诊断锡伯族

Methane production and small intestinal bacterial overgrowth in children living in a slum

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World Journal of Gastroenterology 2012年第41期18卷 5932-5939页

作者： Carolina Santos Mello Soraia Tahan Lígia Cristina FL Melli Mirian Silva do Carmo Rodrigues Ricardo Martin Pereira de Mello Isabel Cristina Affonso Scaletsky Mauro Batista de Morais Pediatric Gastroenterology Division Federal University of Sao Paulo04039-031 Sao PauloBrazil Center Foundation Institute of Education for Osasco 06020-190 Sao PauloBrazil Infectology Division Federal University of Sao Paulo04025-010 Sao PauloBrazil Microbiology Immunology and Parasitology DivisionFederal University of Sao Paulo 04023-062 Sao PauloBrazil

AIM:To analyze small intestinal bacterial overgrowth in school-aged children and the relationship between hydrogen and methane production in breath tests.METHODS:This transversal study included 85 children residing in a slum and 43 children from a private school,all aged between 6 and 10 years,in Osasco,Brazil.For characterization of the groups,data regarding the socioeconomic status and basic housing sanitary conditions were collected.Anthropometric data was obtained in children from both groups.All children completed the hydrogen(H 2) and methane(CH 4) breath test in order to assess small intestinal bacterial overgrowth(SIBO).SIBO was diagnosed when there was an increase in H 2 ≥ 20 ppm or CH 4 ≥ 10 ppm with regard to the fasting value until 60 min after lactulose ingestion.RESULTS:Children from the slum group had worse living conditions and lower nutritional indices than children from the private school.SIBO was found in 30.9%(26/84) of the children from the slum group and in 2.4%(1/41) from the private school group(P = 0.0007).Greater hydrogen production in the small intestine was observed in children from the slum group when compared to children from the private school(P = 0.007).A higher concentration of hydrogen in the small intestine(P < 0.001) and in the colon(P < 0.001) was observed among the children from the slum group with SIBO when compared to children from the slum group without SIBO.Methane production was observed in 63.1%(53/84) of the children from the slum group and in 19.5%(8/41) of the children from the private school group(P < 0.0001).Methane production was observed in 38/58(65.5%) of the children without SIBO and in 15/26(57.7%) of the children with SIBO from the slum.Colonic production of hydrogen was lower in methaneproducing children(P = 0.017).CONCLUSION:Children who live in inadequate environmental conditions are at risk of bacterial overgrowth and methane production.Hydrogen is a substrate for methane production in the colon.

关键词：氢气生产贫民窟产甲烷肠细菌儿童生长过度生活

酸鱼中产胺菌的氨基酸脱羧酶基因及功能特性研究

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酸鱼中产胺菌的氨基酸脱羧酶基因及功能特性研究

作者：杨琴贵州大学

学位级别：硕士

生物胺形成是酸鱼重要的安全隐患,肠细菌是非常重要的产生物胺菌,其分泌多种氨基酸脱羧酶脱羧对应氨基酸产生相应的生物胺。目前国内外对鲜鱼中产胺微生物研究较多,但对于发酵鱼制品中发酵过程中产胺微生物研究较少。本研究通过聚合酶... 详细信息

生物胺形成是酸鱼重要的安全隐患,肠细菌是非常重要的产生物胺菌,其分泌多种氨基酸脱羧酶脱羧对应氨基酸产生相应的生物胺。目前国内外对鲜鱼中产胺微生物研究较多,但对于发酵鱼制品中发酵过程中产胺微生物研究较少。本研究通过聚合酶链氏反应（PCR）对中国传统发酵酸鱼中肠细菌进行氨基酸脱羧酶基因多样性检测,利用反相高效液相色谱（RP-HPLC）检测生物胺含量;研究了pH对肠细菌产生物胺类型和能力的影响,以及酸胁迫下各产胺途径的关系;研究K.aerogenes 10C2组氨酸脱羧酶的酶学性质;研究K.aerogenes10C2组氨酸脱羧酶基因克隆和生物信息学分析。具体内容及结果如下:（1）本研究测定了酸鱼中97株肠细菌的生物胺形成能力。研究结果表明,97株菌产大量腐胺、尸胺、组胺。将97株菌按产生物胺能力的强弱分为4个等级,大肠菌产腐胺最多,其次是组胺、尸胺。在产腐胺方面,产腐胺含量大于900 mg/l的占33.0%（32/97）,产腐胺含量大于500 mg/l的占81.4%（79/97）。产组胺含量在100-500 mg/L之间占41.2%（40/97）。然而,没有一个产尸胺大于500 mg/L的,产尸胺含量在100-500 mg/L的占16.5%（16/97）,低于100 mg/L的占83.5%（81/97）。对27株菌的16S rDNA序列比对,比对结果得2株Enterobacter asburiae,2株Klebsiella aerogenes,3株Klebsiella oxytoca,1株Klebsiella pneumoniae,5株Enterobacter hormaechei,3株Enterobacter ludwigii,7株Morganella morganii,1株Citrobacter youngae,2株Enterobacter cloacae,1株Enterobacter sp。检测了27株高产生物胺的氨基酸脱羧酶基因型27株菌携带odc、speA、speB、adiA和ldc基因,13株携带hdc基因。（2）不同pH对27株菌产胺类型及能力影响。研究结果表明,pH显著影响了产胺菌的产胺类型和能力。odc、adiA、spe B、ldc、和hdc在细胞抵抗酸胁迫中扮演重要角色,各产胺途径相互协作抵抗酸环境。在pH 6.70,pH 6.00时大部分肠细菌以产腐胺、尸胺、组胺去调节细胞外酸环境以适应生长;在pH 5.00,pH 4.50时产腐胺和尸胺为主去调节细胞外酸环境以适应生长,也有少部分菌以腐胺和组胺为主去调节细胞外酸环境。酸胁迫会造成微生物生长滞后但是会增加腐胺、组胺、尸胺的含量。氨基酸脱羧酶具有菌株特异性而不是菌种特异性。（3）研究了K.aerogenes 10C2组氨酸脱羧酶酶学性质。该组氨酸脱羧酶最适温度是45℃,最适pH是6.00,保持组氨酸脱羧酶高酶活性热稳定性范围在4-30℃,pH稳定性范围是p H 5.00-8.00。Mg2+可以提高该菌的组氨酸脱羧酶活,相对酶活106%,Ca2+、Mn2+、K+、Pb2+对该酶的酶活基本没有影响,Fe2+、Fe3+降低了部分酶活性,但酶活性仍然保持在89%以上。而Zn2+、Cu2+极大地抑制了酶活性,剩余相对酶活分别为28%、1%。（4）基因克隆和生物信息学分析。编码该酶的核酸序列长度为1137 bp,蛋白质大小约为44 KDa。该酶位于细胞质,分子式为C1905H2914N510O558S17,分子质量为42434.20,该蛋白等电点理论值为5.86＜7.0,因此该蛋白为酸性蛋白,脂肪系数是84.68。总平均亲水性为-0.176＜0,由此可知该蛋白易溶,具有较强的亲水性。该酶由378个氨基酸组成的,包含了20中氨基酸。其中丙氨酸（Ala）、异亮氨酸（Ile）在该组氨酸脱羧酶的编码氨基酸中使用最多,均占氨基酸总数的8.7%,其次是丝氨酸（Ser）7.7%,天冬氨酸（Asp）7.4%。吡咯赖氨酸（Pyl）、硒代半胱氨酸（Sec）这两种特殊的氨基酸不被包含在内。该酶有11个激酶磷酸化位点、无信号肽、无跨膜结构。二级结构预测可知,该蛋白主要包含有Alpha helix（Hh）α-螺旋、Extended strand（Ee）延伸链、Beta turn（Tt）β-转角、Random coil（Cc）无规则卷曲。α-螺旋、延伸链、β-转角、无规则卷曲结构贯穿整个氨基酸链,且均衡分布。其中最多的是α-螺旋（Hh）和无规则卷曲结构（Cc）,Hh有151个氨基酸,占39.95%,Cc有150个氨基酸,占39.68%。其次是延伸链（Ee）,有59个氨基酸,占15.61%。最少的是β-转角（Tt）,只有18个氨基酸,占4.76%。

关键词：生物胺肠细菌氨基酸脱羧酶基因 pH 酶学性质生物信息学分析

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微生态与临床

实用内科杂志 1989年第12期9卷 634-636页

作者：曾忠铭康白华西医科大学附属第一医院大连医学院微生态学研究室

抗生素在临床上的应用极为普遍,但也存在着严重的滥用问题。我们感到滥用抗生素的原因主要有以下四方面:一是我国目前缺乏有关抗生素合理使用的政策和管理制度;二是有些临床医生对抗生素合理使用认识不足;三是有些临床医生存在着重诊断... 详细信息

抗生素在临床上的应用极为普遍,但也存在着严重的滥用问题。我们感到滥用抗生素的原因主要有以下四方面:一是我国目前缺乏有关抗生素合理使用的政策和管理制度;二是有些临床医生对抗生素合理使用认识不足;三是有些临床医生存在着重诊断、轻治疗的倾向;四是忽视临床效果,单纯从经济效益出发有贵药不用贱药,并尽可能多种药物联合应用。为了提高临床医生对抗生素合理使用的认识,澄清一些是非观念,我们组织了一组“抗生素的合理使用”的文章,这些文章从基础药理到临床药理,到临床实践,理论结合实际,对临床医生很有指导意义。考虑到基层医生的实际需要,组织稿件中我们没有排除非抗生素的抗菌药物,特此说明。

关键词：抗生素宿主专性菌群微生态学感染症杆菌致病菌病原微生物二重感染肠细菌肠道细菌脂肪痢脂肪泻肠疾病微生物种群肠球菌临床医生