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肝脏纤维化复合模型的改良及病理组织学评价

黑龙江畜牧兽医 2018年第1期 157-159,256页

作者：刘秋瑾原冬伟王晓雅张佳韧刘宏睿范文禄任永鑫黑龙江八一农垦大学动物科技学院

为了建立完善、快速、高效肝脏纤维化动物模型,试验采用乙醇灌胃、高脂饲料喂养、高糖饮水等复合因素,并结合腹腔注射CCl4建立大鼠肝脏纤维化模型,并对肝脏纤维化形成病变和相关指标进行评价。结果表明:复合因素的改良能够促进大鼠肝脏... 详细信息

为了建立完善、快速、高效肝脏纤维化动物模型,试验采用乙醇灌胃、高脂饲料喂养、高糖饮水等复合因素,并结合腹腔注射CCl4建立大鼠肝脏纤维化模型,并对肝脏纤维化形成病变和相关指标进行评价。结果表明:复合因素的改良能够促进大鼠肝脏纤维化的形成,造模8周大鼠肝脏细胞变性坏死,汇管区和肝小叶间纤维组织增生,可见胶原纤维沉积,形成典型肝脏纤维化的假小叶病变;大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、伽马谷氨酰胺转肽酶、白蛋白、总蛋白、胆固醇水平与对照组比较差异显著;与纤维化形成密切相关的转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白表达均呈阳性反应。说明试验建立的肝脏纤维化改良方法成功率高,形成时间短,模型稳定。

关键词：肝脏纤维化复合因素模型病理组织学免疫组织化学

神经酰胺和二氢神经酰胺SWATH-高分辨质谱法的建立及其在酒精性肝病肝脏纤维化中的应用

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神经酰胺和二氢神经酰胺SWATH-高分辨质谱法的建立及其在酒精性肝...

作者：史佳伟吉林大学

学位级别：硕士

背景和目的:临床上肝硬化患者日益增多,主要包括病毒性肝硬化、胆汁淤积性肝硬化、酒精性肝硬化、自身免疫性肝硬化、代谢性肝硬化、药物性肝硬化、原发性肝硬化等。其中酒精性肝硬化是临床最常见的肝硬化类型之一。而在肝脏病变早期,... 详细信息

背景和目的:临床上肝硬化患者日益增多,主要包括病毒性肝硬化、胆汁淤积性肝硬化、酒精性肝硬化、自身免疫性肝硬化、代谢性肝硬化、药物性肝硬化、原发性肝硬化等。其中酒精性肝硬化是临床最常见的肝硬化类型之一。而在肝脏病变早期,即肝脏纤维化期病变过程是可逆的。肝脏活检是诊断病毒性肝硬化与酒精性肝硬化的金标准。酒精性肝病的发生和发展涉及重大的代谢变化,包括内质网应激,线粒体功能障碍和炎症,胰岛素抵抗以及激素变化也对疾病的发展产生影响。近年来,鞘脂代谢和神经酰胺蓄积的紊乱作为酒精性和非酒精性肝病的病因得到了越来越多的关注,乙醇摄入的后果部分归因于鞘脂的作用。代谢组学的兴起有助于在小分子层面理解和阐述疾病的病理机制。应用靶向代谢组学探究神经酰胺在酒精性肝病肝脏纤维化疾病进展中的变化情况,能够对疾病早期发现、早期治疗。因此,本实验旨在建立鞘脂神经酰胺与二氢神经酰胺的高分辨质谱检测方法,探究不同神经酰胺与酒精性肝病肝脏纤维化疾病进展的临床价值。方法:应用SWATH-高分辨质谱法建立神经酰胺与二氢神经酰胺的检测方法,并对方法进行方法学验证。并对311例受试者进行检测,其中健康对照82例,酒精性肝病88例(纤维化F1-F2期为酒精性肝病轻度纤维化组共35例,纤维化F3-F4期为酒精性肝病重度纤维化组共53例),慢性乙型肝炎纤维化患者141例(纤维化F1-F2期为乙肝轻度纤维化组共52例,纤维化F3-F4期为乙肝重度纤维化组共89例)。根据曼-惠特尼(Mann-Whitney U)检验和克鲁斯卡尔-沃利斯(Kruskal-Wallis K-W)检验进行组间和组内评估。应用受试者操作特征曲线(ROC)分析酒精性肝病中7个神经酰胺和4个二氢神经酰胺与纤维化的关系。Spss 26.0和Graph Pad Prism 9版软件进行图形绘制。P纤维化组、酒精性肝病重度纤维化组之间两两比较均有显著差异,其中神经酰胺C22、C24随着酒精性肝病肝脏纤维化的疾病进展下降,二氢神经酰胺C24:1随着酒精性肝病肝脏纤维化的疾病进展升高。在诊断酒精性肝病轻度纤维化中神经酰胺C24和二氢神经酰胺C24:1具有较好的敏感性和特异性ROC曲线下面积分别为0.76[95%(CI)0.66-0.85]、0.75[95%(CI)0.65-0.85],在诊断酒精性肝病重度纤维化中神经酰胺C22、C24和二氢神经酰胺C24:1具有较好的敏感性和特异性ROC曲线下面积分别为0.95[95%(CI)0.91-0.99]、0.97[95%(CI)0.94-0.99]、0.83[95%(CI)0.75-0.90]。(2)神经酰胺C20、C22、C24在健康对照组、乙肝轻度纤维化组、乙肝重度纤维化组之间两两比较均有显著差异,且神经酰胺C20、C22、C24伴随乙肝纤维化的疾病进展下降。在诊断乙肝轻度纤维化中神经酰胺C24、C24:1具有较好的敏感性和特异性ROC曲线下面积分别为0.81[95%(CI)0.74-0.89]、0.71[95%(CI)0.62-0.80]。在诊断乙肝重度纤维化中神经酰胺C20、C22、C24具有较好的敏感性和特异性ROC曲线下面积分别为0.82[95%(CI)0.75-0.88]、0.88[95%(CI)0.83-0.93]、0.96[95%(CI)0.93-0.99]。结论:(1)本研究利用SWATH-HRMS建立了同时检测7种神经酰胺和4种二氢神经酰胺的方法并应用于酒精性肝病肝脏纤维化的测定。(2)神经酰胺C22、C24随着肝脏纤维化的疾病进展下降,二氢神经酰胺C24:1在酒精性肝病肝脏纤维化的疾病进展中升高,神经酰胺C20伴随乙肝纤维化的疾病进展下降,以上鞘脂均有较好的诊断效能。(3)神经酰胺C22、C24有望成为酒精性肝病和慢性乙型肝炎肝脏纤维化潜在的诊断标志物,二氢神经酰胺C24:1有望成为酒精性肝病肝脏纤维化潜在的特异性诊断标志物。

关键词：酒精性肝病肝脏纤维化鞘脂神经酰胺高分辨质谱

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肝脏纤维化无创性诊断模型的建立及性能验证

肝脏纤维化无创性诊断模型的建立及性能验证

作者：李涛广州中医药大学

学位级别：硕士

目的：建立适用于本地区肝脏纤维化病人的非侵入性诊断模型,并验证该诊断模型的诊断效能。方法：收集2011年至2014年于广东省中医院住院并进行肝穿检查的病例,同时检索病例的血清学检查结果,包括HA, PIIINP, LN, CIV, ALT, AST, GGT, AL... 详细信息

目的：建立适用于本地区肝脏纤维化病人的非侵入性诊断模型,并验证该诊断模型的诊断效能。方法：收集2011年至2014年于广东省中医院住院并进行肝穿检查的病例,同时检索病例的血清学检查结果,包括HA, PIIINP, LN, CIV, ALT, AST, GGT, ALB, TBIL, DBIL, ADA, UREA, ALP, APOA1, PT, PLTO共收集资料完备病例354例。对血清学指标与病理诊断之间进行二元logistic回归分析,得出诊断模型。另收集资料完备病例进行模型诊断效能验证。成果：通过回归模型分析,得出诊断模型的预测公式组合为：In (pt/1-p1)=12.445+0.061×LN-0.011×CIV-0.313×ALB+0.313×ADA-0.011×PLT In (p2/1-p2)=6.443+0.098×PIIINP-0.002×CIV+0.014×GGT-0.161×ALB +0.148×ADA-0.01×PLT In (p3/1-p3)=-0.215+0.022×HA+0.113×PIIINP-0.004×AST-0.01I×ALB +0.015×ALP-0.017×PLT In (p4/1-p4)=0.394+0.011×HA+0.002×CIV-0.012×ALB+0.013×ALP-0.02×PLT结论：通过诊断模型的建立,能够有效降低肝脏纤维化病人的穿刺诊断概率。

关键词：肝脏纤维化诊断模型 logistic回归诊断效能

声辐射力脉冲弹性成像技术与二维剪切波弹性成像技术在评估兔肝脏纤维化等级中的作用

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中国医学科学院学报 2015年第2期37卷 157-162页

作者：李楠罗渝昆唐文博中国人民解放军总医院超声诊断科北京100853

目的探讨声辐射力脉冲成像技术(ARFI)及二维剪切波弹性成像技术(2D-SWE)在诊断肝脏纤维化等级(LF)方面的差异。方法新西兰大白兔60只,随机分为对照组(10只,无处理)和LF组(50只,注射四氯化碳以建立不同程度的LF模型)。利用ARFI及2D-SWE... 详细信息

目的探讨声辐射力脉冲成像技术(ARFI)及二维剪切波弹性成像技术(2D-SWE)在诊断肝脏纤维化等级(LF)方面的差异。方法新西兰大白兔60只,随机分为对照组(10只,无处理)和LF组(50只,注射四氯化碳以建立不同程度的LF模型)。利用ARFI及2D-SWE对所有动物进行肝脏硬度(LS)的测定,并取相同部位肝脏组织进行病理学分析,根据Spearman等级相关分析LF及LS之间相关性,通过构建受试者工作特性曲线比较两种技术在诊断效能方面的差异。结果共成功取得37只动物的实验数据,其中F0级14处、F1级11处、F2级15处、F3级12处、F4级22处。所有动物均成功进行LS的测定,LF与ARFI测定结果之间呈线性相关(r=0.802,PF0、F1、F2、F3的曲线下面积分别为0.809、0.916、0.938、0.934;2D-SWE诊断LF>F0、F1、F2、F3的曲线下面积分别为0.917、0.935、0.976、0.974。结论 ARFI及2D-SWE技术均能较为准确地反应LF的等级,且2D-SWE技术的诊断效能优于ARFI技术。

关键词：声辐射力脉冲成像技术二维剪切波弹性成像技术肝脏纤维化肝脏硬度

不同活度不同剂量(125)~I粒子植入对兔肝脏纤维化的影响

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介入放射学杂志 2018年第7期27卷 655-659页

作者：孙柏潘天帆陆建王超王勇常晓峰郭金和东南大学附属中大医院介入与血管外科南京210009

目的评价不同活度、不同剂量(125)~I粒子植入对兔肝脏纤维化的影响。方法 16只新西兰大白兔(雌雄不拘)随机分为A、B、C、D组,每组4只。每只实验兔在CT引导下分别植入4颗(125)~I粒子,粒子按照2×2排列,间隔1 cm。A组植入空仓粒子,B组粒... 详细信息

目的评价不同活度、不同剂量(125)~I粒子植入对兔肝脏纤维化的影响。方法 16只新西兰大白兔(雌雄不拘)随机分为A、B、C、D组,每组4只。每只实验兔在CT引导下分别植入4颗(125)~I粒子,粒子按照2×2排列,间隔1 cm。A组植入空仓粒子,B组粒子活度为2.22 MBq,C组为2.96 MBq,D组为3.70 MBq;术前及术后6个月分别取实验兔血行实验室检查(血常规、肝功能、肝纤维化4项),术后第6个月利用计算机治疗计划系统(TPS)分别勾画B、C、D组120 Gy、140 Gy、160 Gy等剂量曲线图,计算与中心点距离,并取对应辐射区边缘肝脏组织,行病理学检查。结果所有植入操作均顺利完成。粒子植入前后各组丙氨酸转氨酶(ALT)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)、APRI指数等指标之间差异有统计学意义(P肝脏纤维化。所有实验兔肝脏组织大体标本均未见明显肝脏损伤。病理结果显示,随着粒子活度增加,Knodell HAI评分有升高的趋势,但各组评分均小于2分,提示不存在肝脏纤维化。结论(125)~I粒子植入是一种安全的治疗方式,在本实验剂量及活度范围内,不同剂量、不同活度的(125)~I粒子肝脏植入,不会导致肝脏纤维化。

关键词：肝脏纤维化碘放射性核素活度剂量

miR-181通过抑制Egr1在肝脏纤维化中的作用

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现代预防医学 2020年第6期47卷 1091-1096页

作者：徐艺丹韩银淑厦门医学院医学技术系

目的研究miR-181在肝脏纤维化中发挥的作用及其机制,为肝脏纤维化诊断与治疗提供参考。方法 q RTPCR检测miR-181在正常人和肝脏纤维化患者血清中的表达量;micro RNA靶基因数据库及双荧光素酶报告基因实验预测并验证早期生长应答蛋白1 (r... 详细信息

目的研究miR-181在肝脏纤维化中发挥的作用及其机制,为肝脏纤维化诊断与治疗提供参考。方法 q RTPCR检测miR-181在正常人和肝脏纤维化患者血清中的表达量;micro RNA靶基因数据库及双荧光素酶报告基因实验预测并验证早期生长应答蛋白1 (rarly growth oresponse protein-1,Egr1)是否为miR-181的靶基因;qRT-PCR和Western blot检测在肝星状细胞(hepatic stellated cell, HSC)中转染miR-181mimics或miR-181inhibitor对Egr1表达水平的影响;q RT-PCR检测血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)刺激HSC细胞后miR-181表达水平的变化;CCK8法检测Ang Ⅱ和miR-181对HSC细胞增殖的影响;q RT-PCR和western blot检测Ang Ⅱ和miR-181对HSC细胞中纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle Actin,α-SMA),成纤维细胞特异性标记(FSP1)和Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)表达的影响;HE染色和Masson’s trichrome染色观察miR-181对CCL4小鼠肝脏纤维化的影响。结果肝脏纤维化患者血清中miR-181的表达量较正常对照组显著降低并伴随病理分期程度升高呈下降趋势;miR-181可直接靶向作用于Egr1,在HSC细胞中上调miR-181可以抑制Egr1的mRNA和蛋白的表达,而下调miR-181则出现相反的结果;Ang Ⅱ刺激HSC细胞可下调miR-181,而过表达miR-181可抑制Ang Ⅱ诱导的HSC细胞增殖;在HSC细胞中上调miR-181能抑制α-SMA,FSP1和Collagen Ⅰ的表达;miR-181过表达能抑制CCL4小鼠肝脏纤维化损伤。结论miR-181通过抑制Egr1从而抑制肝脏纤维化的进程,为肝脏纤维化诊断及治疗提供一种新靶点。

关键词：肝脏纤维化 miR-181 Egr1 AngⅡ CCL4

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基于多模态融合的肝脏纤维化自动分类的算法

计算机与数字工程 2023年第4期51卷 791-797,837页

作者：曹鹏徐军张腾查俊豪李子昂南京信息工程大学人工智能学院智慧医疗研究院南京210044 东南大学医学院南京210009

针对传统临床检查中血清生化物指标诊断精度较低,以及视觉评估磁共振图像无法精确对肝脏纤维化程度分级的缺点,设计了一种肝脏纤维化分级的多模态多通道融合的深度学习算法(MCMD-Resnet18)。该算法充分利用磁共振图像数据和临床文本数... 详细信息

针对传统临床检查中血清生化物指标诊断精度较低,以及视觉评估磁共振图像无法精确对肝脏纤维化程度分级的缺点,设计了一种肝脏纤维化分级的多模态多通道融合的深度学习算法(MCMD-Resnet18)。该算法充分利用磁共振图像数据和临床文本数据二者之间的语义信息,在网络的分类器阶段将图像文本两个通道数据实现融合,结合了两种模态的特性信息,最后对深度特征进行可视化,使得分类模型具有可解释性。实验证明,与单一模态的数据和临床通用方法相比,该算法在受试者工作特征曲线下的面积、准确率等指标上有更好的结果,模型性能更加稳定。该算法可以有效实现无创评估患者临床显著肝脏纤维化,具有广泛应用的价值。

关键词：多模态融合深度学习肝脏纤维化多通道

基于体素内不相干运动扩散加权成像（IVIM-DWI）的肝脏纤维化检测方法

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基于体素内不相干运动扩散加权成像（IVIM-DWI）的肝脏纤维化检测...

作者：肖本亨华南理工大学

学位级别：硕士

肝脏纤维化的早期发现,是进行及时干预治疗、阻止病情进一步恶化的关键。采用体素内不相干运动扩散加权成像技术,采集来自深圳市第三人民医院45名被试,包括26例健康志愿者与19例肝脏纤维化患者（4例F0期,5例F1期,3例F2期,7例F3-4期）的... 详细信息

肝脏纤维化的早期发现,是进行及时干预治疗、阻止病情进一步恶化的关键。采用体素内不相干运动扩散加权成像技术,采集来自深圳市第三人民医院45名被试,包括26例健康志愿者与19例肝脏纤维化患者（4例F0期,5例F1期,3例F2期,7例F3-4期）的多b值IVIM影像数据。应用双指数参数拟合法,计算扩散参数,利用低b值IVIM图像,计算扩散衍生血管密度（Diffusion-derived Vessel Density,DDVD）,比较不同组Dfast、Dslow、Pf与DDVD的差异,发现F0组的扩散参数高于健康志愿者,随着肝脏纤维化及纤维化程度逐渐加深,其扩散参数值呈逐渐降低的趋势,主要源于肝脏纤维化患者的肝脏水分子灌注与弥散效应均减弱。通过扩散参数散点图,进一步比较不同参数在区分健康志愿者和不同纤维化分期患者的能力,DDVD联合其它扩散参数,可以提升不同纤维化分期的区分度。论文还重点研究了肝区感兴趣区域（region of interest,ROI）的自动分割与应用影像特征进行纤维化检测问题。通过建立U-net模型,实现右叶肝脏区域的自动分割,分割模型的Dice值为0.9136。应用Ma Zda软件提取肝区ROI的灰度直方图、灰度绝对梯度、游程矩阵、灰度共生矩阵,以及自回归模型和小波变换等特征,应用支持向量机（Support Vector Machine,SVM）分类器进行纤维化检测。实验结果表明,基于ROI影像学特征的方法,在区分纤维化与健康志愿者方面的能力（准确率0.9,AUC 0.88～1.0,F1 0.86～0.89）,优于扩散参数法（准确率0.7～0.8,AUC 0.38～0.75,F1 0.57～0.75）,且基于U-net网络自动分割提取影像学特征的方法,检测肝脏纤维化的能力,优于人工勾画ROI法。研究证明,基于IVIM技术的扩散参数与影像特征信息,能有效地应用于肝脏纤维化检测,对早期肝脏纤维化的识别亦具有一定潜力。

关键词：肝脏纤维化体素内不相干运动成像扩散参数 U-net 支持向量机

瞬时弹性成像技术(FibroScan)检测和血miR-21水平与乙肝肝硬化患者肝脏纤维化程度的关系及对预后的预测

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影像科学与光化学 2020年第6期38卷 956-961页

作者：栗红江胡素玲何久胜何福亮刘震霞保定市人民医院河北保定071000 保定市中心血站河北保定071000 首都医科大学附属北京友谊医院北京100050

选取乙肝所致肝硬化(HBC)患者92例为病例组,同期92例慢性乙型肝炎患者为对照组,探讨瞬时弹性成像技术(FibroScan)和血miR-21水平与HBC患者肝脏纤维化程度的关系及对预后的预测价值。结果显示,病例组脾脏/肝脏硬度值、血miR-21水平、肝... 详细信息

选取乙肝所致肝硬化(HBC)患者92例为病例组,同期92例慢性乙型肝炎患者为对照组,探讨瞬时弹性成像技术(FibroScan)和血miR-21水平与HBC患者肝脏纤维化程度的关系及对预后的预测价值。结果显示,病例组脾脏/肝脏硬度值、血miR-21水平、肝脏纤维化程度均高于对照组,脾脏/肝脏硬度值、血miR-21水平与HBC患者肝脏纤维化程度呈正相关,二者联合预测时对应敏感度为68.42%,特异度为97.26%,控制患者年龄、体质量、性别等基线资料后,脾脏/肝脏硬度值、血miR-21仍是HBC患者预后死亡的重要危险因素(P化与肝脏纤维化程度关系密切,是患者预后死亡的独立危险因素,联合检测可从宏观及微观层面为临床评价预后提供参考。

关键词：瞬时弹性成像技术 miR-21 乙型肝炎肝硬化肝脏纤维化脾脏硬度值