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芳香烃受体及肝脏代谢酶在饮用水有机提取物染毒大鼠肝脏中的表达及意义

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芳香烃受体及肝脏代谢酶在饮用水有机提取物染毒大鼠肝脏中的表达...

作者：桂晓玲贵阳医学院

学位级别：硕士

目的:利用课题组前期制备的饮用水有机提取物致大鼠肝损伤动物模型,对芳香烃受体及下游调控基因(肝脏代谢酶)的表达及活性进行观察,探讨饮用水有机污染物的异常肝脏生物转化在肝损伤中的作用。方法:于2012年7-9月(丰水期)采集该地的末... 详细信息

目的:利用课题组前期制备的饮用水有机提取物致大鼠肝损伤动物模型,对芳香烃受体及下游调控基因(肝脏代谢酶)的表达及活性进行观察,探讨饮用水有机污染物的异常肝脏生物转化在肝损伤中的作用。方法:于2012年7-9月(丰水期)采集该地的末梢水水样并制备有机提取物。将50只清洁级SD大鼠随机分为5组,分别为空白对照组、溶剂对照(玉米油)组和饮用水有机提取物低中高3个染毒组(剂量分别为5L/kg、20L/kg、80L/kg),每组10只,雌雄各半。采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,连续染毒12周。制备大鼠血清,采用分光光度法检测天冬氨酸转氨酶(Aspartate aminotransferas,AST)、丙氨酸转氨酶(Alanine amunotransferase,ALT)、胆碱酯酶(Cholinesterase,CHE)的活力及总蛋白(Total protein,TP)、白蛋白(Albumin,ALB)的含量;提取肝组织总RNA,采用实时荧光定量PCR(RT-q RCR)法检测芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,Ah R)、热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP90)、芳香烃受体核转位蛋白(aryl hydrocarbon nuclear translocator,ARNT)、细胞色素1A2(CYP1A2)、细胞色素2E1(CYP2E1)、谷胱甘肽-S-转移酶A1(glutathione-S-transferase A1,GSTA1)的m RNA表达情况;提取肝组织总蛋白,采用蛋白印记(Western Blot)法检测Ah R、HSP90、ARNT、CYP1A2、CYP2E1、GSTA1的蛋白表达情况;制备肝匀浆,采用分光光度法检测谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione-S-trans ferase,GSTs)活力;制备肝微粒体,荧光分光光度法和活性比色法分别测定CYP1A2与CYP2E1酶活性;采用Spearman相关对芳香烃受体和肝脏代谢酶及肝损伤的相关性进行分析。结果:(1)随着染毒剂量的增加,大鼠血清CHE活力在中、高剂量组明显升高,而ALT、AST活力仅在高剂量组升高(P酶活性在中剂量与高剂量组显著增加,而CYP2E1酶活性仅在高剂量组增加(P酶活性则明显降低(P肝脏代谢酶CYP1A2、GSTs酶活性与Ah R蛋白表达水平均呈正相关关系;染毒大鼠血清CHE水平与Ah R的蛋白表达水平及CYP1A2、CYP2E1、GSTs酶活性均呈正相关关系。结论:(1)在本实验条件下,较高剂量饮用水有机提取物暴露可活化芳香烃受体Ah R,从而诱导其配体HSP90及ARNT的转录表达和翻译表达。(2)芳香烃受体通路的异常上调,调控下游基因代谢酶CYP1A2与GSTA1的m RNA和蛋白表达增强,诱导代谢酶活性升高。(3)肝脏代谢酶活性异常升高,在对饮用水有机污染物解毒代谢的过程中,诱导自由基和毒性中间代谢物的产生,破坏细胞结构,造成肝细胞损伤。

关键词：饮用水有机提取物芳香烃受体及配体肝脏代谢酶细胞色素1A2 细胞色素2E1 谷胱甘肽-S-转移酶

二仙药对配伍对肾阳虚证小鼠肝脏代谢酶和肾离子转运体的影响

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二仙药对配伍对肾阳虚证小鼠肝脏代谢酶和肾离子转运体的影响

作者：朱芳芳浙江中医药大学

学位级别：硕士

目的在前期筛选优化并获得了较好的二仙增效减毒配伍方的基础上,进一步研究比较优化后的配伍方及其单味方对肾阳虚证小鼠的补肾壮阳作用的影响,并分析讨论二仙药对配伍改善肾阳虚症状可能的机制。方法取77只1CR小鼠,按体重值随机分为7组... 详细信息

目的在前期筛选优化并获得了较好的二仙增效减毒配伍方的基础上,进一步研究比较优化后的配伍方及其单味方对肾阳虚证小鼠的补肾壮阳作用的影响,并分析讨论二仙药对配伍改善肾阳虚症状可能的机制。方法取77只1CR小鼠,按体重值随机分为7组,即正常组、模型组、阳性组、仙-淫1：2组、仙-淫1：1组、仙-淫1：0组、仙-淫0：1组。除正常组外,其余各组小鼠均每天灌胃给予腺嘌呤混悬液,1h后,各给药组给予相应的药物,正常组、模型组给予等量的蒸馏水,连续给药4周。每周检测各组小鼠体重、摄食量、饮水量;给药2周、4周时,检测小鼠体温;实验结束时,各组小鼠眼眶取血,完整剖取小鼠肝脏、双侧肾脏、胸腺、双侧睾丸组织,称重并计算脏器指数,检测血清ACTH含量和肝脏CYP活性等指标。运用荧光定量RT-PCR和Western Blot法,分别测定各组小鼠肝脏CYP1A2、 CYP2E1、CYP3A11和肾脏OAT1、OAT3、OCT2的mRNA和蛋白表达量。结果与正常组比较,模型组小鼠体重、摄食量、体温、脏器(肝、肾、胸腺、睾丸)重量、脏器指数(胸腺)、血清ACTH含量、酶(CYP1A2、CYP3A11)活性、蛋白(CYP1A2、CYP3A11、OCT2)表达量等指标均明显下降,而酶(CYP2E1)活性、蛋白(CYP2E1、OAT1、OAT3)表达量升高。与模型组相比,配伍方组小鼠体重、脏器(肝、肾、睾丸)重量及脏器(胸腺)指数、体温、血清ACTH含量、酶(CYP1A2、 CYP2E1)活性、蛋白(CYP1A2、OCT2)表达大量等指标均有所上升,而酶(CYP2E1)活性、蛋白(CYP2E1、OAT1、OAT3)表达量等指标有所下降;单味方组小鼠脏器(肝、肾、睾丸)重量及脏器(胸腺)指数、蛋白(CYP1A2、CYP3A11、OCT2)表达量等指标均有所上升,而蛋白(CYP2E1、OAT1、OAT3)表达量等指标有所下降。与单味方组相比,配伍方组小鼠体温、肝脏重量、蛋白(CYP1A2、OCT2)表达量等指标有所上升,而蛋白(OAT1、OAT3、CYP2E1)表达量均有所下降。结论配伍方对肾阳虚证的治疗效果优于单味方,其最佳配伍比例为仙-淫1：2,其改善肾阳虚症状的机制可能是通过以下两种情况共同调节：①通过调节肾上腺皮质类固醇激素、酶(肝CYP1A2、CYP2E1)而发挥作用的;②通过下调肾离子转运体OAT1、OAT3的表达和上调OCT2的表达,减少阴离子物质在肾小管上皮细胞中累积,从而起到对肾脏的保护作用;同时实验结果表明肝脏代谢酶CYP1A2和CYP2E1可能存在拮抗的药理毒理作用,二仙药对配伍可能通过影响两种酶之间的动态平衡,改善小鼠的肾阳虚症状。

关键词：二仙药对配伍肾阳虚肝脏代谢酶肾离子转运体

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黄酒饮后对小鼠血脂和肝脏代谢酶指标的影响

酿酒科技 2021年第12期 17-21页

作者：史瑛周志磊许锡彪章国强胡志明毛健江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室江苏无锡214122 江南大学(绍兴)产业技术研究院浙江绍兴312000 绍兴女儿红酿酒有限公司浙江绍兴312352

黄酒是极具中国民族特色的传统酿造酒,其酒精度低,同时含有包括氨基酸、多肽、多糖、低聚糖、酚类等在内的多种生物活性物质。为探究适量饮用传统绍兴黄酒对血清和肝脏理化指标的影响,本研究建立了为期8周适量饮用黄酒的小鼠模型,比较... 详细信息

黄酒是极具中国民族特色的传统酿造酒,其酒精度低,同时含有包括氨基酸、多肽、多糖、低聚糖、酚类等在内的多种生物活性物质。为探究适量饮用传统绍兴黄酒对血清和肝脏理化指标的影响,本研究建立了为期8周适量饮用黄酒的小鼠模型,比较纯酒精、黄酒1和黄酒2对脂质代谢的影响程度。结果表明,为期8周的纯酒精灌胃导致乙醇组的血清胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量显著增加,而高密度脂蛋白(HDL-C)显著降低,同时引起了小鼠肝脏代谢酶天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量的显著升高。黄酒2组小鼠的血清TC、TG含量相比于乙醇组显著降低,并且可以显著缓解乙醇导致的AST和ALT指标升高,表明黄酒2摄入两个月后相比于乙醇组未导致肝脏指标异常变化,对酒精摄入引起的小鼠血脂水平调控起到了一定的改善作用,且比黄酒1组更加有效。因此,黄酒2饮用8周可缓解纯酒精导致的血清和肝脏脂质指标异常情况,相比黄酒1更具有恢复脂质代谢异常的作用。

关键词：黄酒脂质代谢血清指标肝脏代谢酶

2,2',4,4'-四溴联苯醚对鲫鱼(Carassius auratus)肝脏代谢酶及甲状腺激素的影响

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2,2',4,4'-四溴联苯醚对鲫鱼(Carassius auratus)肝脏代谢酶及甲...

饲料中添加水飞蓟素对吉富罗非鱼生长性能、肝脏脂肪代谢酶和抗氧化能力的影响

中国毒理学会环境与生态毒理学专业委员会第二届学术研讨会暨中国环境科学学会环境标准与基准专业委员会2011年学术研讨会

作者：沈梦楠高士祥程杰吴若函南京大学环境学院污染控制与资源化研究国家重点实验室

多溴联苯醚作为一种溴代阻燃剂被广泛应用,并且大量存在于环境中。这类化合物已经被证明对啮齿类动物和哺乳动物具有亚急性毒性,本文旨在研究其对淡水生物的毒性。2,2′,4,4′-四溴联苯醚(BDE-47)对鲫鱼(Carassius auratus)染毒后测定... 详细信息

多溴联苯醚作为一种溴代阻燃剂被广泛应用,并且大量存在于环境中。这类化合物已经被证明对啮齿类动物和哺乳动物具有亚急性毒性,本文旨在研究其对淡水生物的毒性。2,2′,4,4′-四溴联苯醚(BDE-47)对鲫鱼(Carassius auratus)染毒后测定其肝脏代谢酶的活性和甲状腺激素水平的变化,以及肝脏组织的损伤情况。在实验室条件下,腹腔注射法对鲫鱼进行BDE-47染毒,染毒浓度分别为(0,0.0025,0.025和0.25mg/kg b.w./day),连续注射7天后,移入清水中净化7天。分别在第1、3、5、7、8、10、12、14天时取肝脏和血清样品检测肝脏EROD、ECOD和GST活性以及血清T、T含量。结果表明EROD活性被显著的抑制,并且随时间其活性呈U型趋势变化。相反,三个剂量染毒组中鲫鱼肝脏ECOD活性均被BDE-47显著诱导,且最大诱导效应发生在第12天的低剂量染毒组。GST活性在最初阶段显示出"低促高抑"的特性,在随后的时间里呈现出诱导效应,但并没有显著的剂量效应关系。BDE-47暴露后引起了T和T含量明显降低,但是T降低程度小于T。相关性分析发现T和T含量以及ECOD活性与T含量之间显著正相关,这些数据表明BDE-47引起的T含量下降可能是和CYP450氧化途径代谢生成的产物有关。组织学损伤研究表明BDE-47能够引起鲫鱼的肝脏损伤,且在短时间内难以恢复。

关键词： BDE-47 鲫鱼肝脏代谢酶甲状腺激素

来源： cnki会议评论

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水产学报 2016年第9期40卷 1309-1320页

作者：苟庚午蒋明文华吴凡刘伟田娟杨长庚中国水产科学研究院长江水产研究所农业部淡水生物多样性保护与鮰利用重点开放实验室上海海洋大学水产与生命学院

为评估饲料中添加水飞蓟素对吉富罗非鱼生长性能、肝脏脂肪代谢酶和抗氧化能力的影响,分别在5组等氮等能的吉富罗非鱼饲料中添加不同水平的水飞蓟素[0(对照组)、100、200、400和800 mg/kg],饲喂初始体质量为(8.17±0.31)g的吉富罗非鱼幼... 详细信息

为评估饲料中添加水飞蓟素对吉富罗非鱼生长性能、肝脏脂肪代谢酶和抗氧化能力的影响,分别在5组等氮等能的吉富罗非鱼饲料中添加不同水平的水飞蓟素[0(对照组)、100、200、400和800 mg/kg],饲喂初始体质量为(8.17±0.31)g的吉富罗非鱼幼鱼9周,测定实验鱼的生长性能、血清生化指标、肝脏脂肪代谢酶活性及抗氧化酶活性。结果显示,随饲料中水飞蓟素添加水平增加,吉富罗非鱼终末体质量、增重率、特定生长率和肥满度均呈先增加后降低的趋势,各指标均在100mg/kg实验组达到最大,100mg/kg实验组的饲料系数显著低于对照组。饲料中添加水飞蓟素显著降低了实验鱼肝体比和脏体比。100mg/kg实验组全鱼、肌肉和肝脏的粗脂肪含量显著低于对照组。血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性随水飞蓟素水平增加呈先降低后升高的趋势,分别在200和100 mg/kg实验组达到最低,两组之间无显著性差异。饲料中添加水飞蓟素后,血清中的甘油三酯含量显著低于对照组;肝脏中的脂蛋白脂酶和总酯酶活性显著高于对照组;肝脏脂肪酶活性呈先上升后降低趋势,在200 mg/kg实验组最高,且与对照组有显著性差异。饲料中添加水飞蓟素后,肝脏谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于对照组,肝脏过氧化氢酶活性显著低于对照组;肝脏丙二醛含量显著低于对照组。100 mg/kg实验组罗非鱼的肝细胞界限清晰,无核偏移,空泡较少。研究表明,饲料中添加适量水飞蓟素提高了吉富罗非鱼生长性能,调节了肝脏脂肪代谢酶活性和抗氧化能力,对防治肝脏细胞损伤有积极作用。在本实验条件下,推荐吉富罗非鱼幼鱼饲料中水飞蓟素添加水平为100 mg/kg。

关键词：吉富罗非鱼水飞蓟素生长性能肝脏代谢酶抗氧化

大毒中药对机体的不良反应和肝脏药物代谢酶调节研究进展

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世界中医药 2020年第23期15卷 3593-3598页

作者：吕新尹航阎明睿范晓宇贾艳艳姜丽丽刘勇大连理工大学生命科学与药学学院盘锦124221

近十几年来,随着中药在世界的应用范围不断扩大,中华人民共和国药典中所记载的10种大毒中药也逐渐被应用于临床。但人体服用此类药物后,在肝脏药物代谢酶的介导下达到治疗效果的同时,也可能会对代谢酶产生影响,从而造成机体器官的损伤... 详细信息

近十几年来,随着中药在世界的应用范围不断扩大,中华人民共和国药典中所记载的10种大毒中药也逐渐被应用于临床。但人体服用此类药物后,在肝脏药物代谢酶的介导下达到治疗效果的同时,也可能会对代谢酶产生影响,从而造成机体器官的损伤等不良反应,严重时会危及到人的生命。因此,对大毒中药的不良反应和肝脏代谢酶研究极为重要。本文将10种大毒中药国内外的相关研究资料进行总结,为大毒中药的研究和临床的合理应用提供科学依据。

关键词：大毒中药毒性成分不良反应肝脏代谢酶细胞色素P450酶尿苷二磷酸-葡萄糖醛酸转移酶研究进展

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盐度骤降对云纹石斑鱼肝脏代谢酶活力的影响

海洋渔业 2016年第2期38卷 174-181页

作者：施兆鸿廖雅丽王孝杉高权新彭士明张晨捷上海海洋大学水产与生命学院上海201306 中国水产科学研究院东海水产研究所上海200090

为探讨云纹石斑鱼(Epinephelus moara)肝脏代谢酶活力对盐度骤降的响应,设置27(对照组)、21、15、9共4个盐度梯度对云纹石斑鱼进行盐度骤降胁迫实验。分别在0、1、2、3、7 d时取样,测定其肝脏中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、谷丙... 详细信息

为探讨云纹石斑鱼(Epinephelus moara)肝脏代谢酶活力对盐度骤降的响应,设置27(对照组)、21、15、9共4个盐度梯度对云纹石斑鱼进行盐度骤降胁迫实验。分别在0、1、2、3、7 d时取样,测定其肝脏中酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)以及乳酸脱氢酶(LDH)活力。结果显示,ACP活力盐度21组先波动变化后恢复正常水平,盐度15组先下降后升高,随后第7天下降恢复正常水平;AKP活力盐度21组和盐度15组先呈下降趋势,第3天大幅度升高;GPT与LDH活力盐度21组和盐度15组基本呈现先下降再上升并波动的变化趋势;GOT活力变化趋势盐度21组先升后降,盐度15组先降后波动。研究表明:在盐度27骤降至21或15,均会使云纹石斑鱼产生应激反应,磷酸酶、转氨酶与乳酸脱氢酶活力初期均会受到抑制,随时间延长可以得到恢复;而当盐度从27骤降至9,3 d时实验鱼全部死亡。

关键词：云纹石斑鱼骤降低盐胁迫肝脏代谢酶

多壁碳纳米管致人肝癌细胞HepG2毒性及代谢酶表达变化

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新型炭材料 2019年第6期34卷 600-605页

作者：赵琢柳明杨磊刘伟王华刘美玲张秀霞申敬张园天津海关工业产品安全技术中心天津300308 天津科技大学生物工程学院天津300457

采用实时无标记细胞分析系统研究多壁碳纳米管(MWCNTs)对人肝癌细胞HepG2毒性作用,确定MWCNTs是否会影响肝脏代谢酶谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和细胞色素P450亚酶CYP1A1的表达。利用0.12、0.25、0.5、1和2 mg/mL的MWCNTs处理HepG2细胞24... 详细信息

采用实时无标记细胞分析系统研究多壁碳纳米管(MWCNTs)对人肝癌细胞HepG2毒性作用,确定MWCNTs是否会影响肝脏代谢酶谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)和细胞色素P450亚酶CYP1A1的表达。利用0.12、0.25、0.5、1和2 mg/mL的MWCNTs处理HepG2细胞24、48和72h后,采用噻唑蓝比色法(MTT)测定MWCNTs对肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。利用实时无标记动态细胞分析(RTCA)系统动态监测不同剂量(0.25、0.5、1 mg/mL)MWCNTs对HepG2细胞生长的影响。细胞经MWCNTs处理48 h后,实时定量荧光PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测肝脏代谢酶GSTP1和CYP1A1的mRNA水平和蛋白水平的变化情况。结果显示MWCNTs可以抑制HepG2细胞的增殖,且呈一定的剂量和时间依赖性。实时无标记细胞分析法能够准确监测MWCNTs对细胞增殖的过程,并且能避免多壁碳纳米管材料对数据的干扰。经MWCNTs处理后的细胞中肝脏代谢酶GSTP1mRNA水平和蛋白水平上调,而CYP1A1的mRNA水平和蛋白水平显著下降。

关键词：多壁碳纳米管 HepG2细胞毒性研究实时无标记细胞分析技术肝脏代谢酶

氨基脲诱导的SD大鼠氧化应激与肝脏代谢损伤研究

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食品安全质量检测学报 2021年第18期12卷 7357-7363页

作者：黄卉颖贺永健刘焕郑冬冬肖雪蔓柳春红华南农业大学食品学院广州510642 广东省食品质量安全重点实验室广州510642

目的研究氨基脲(semicarbazide,SEM)诱导的SD雄性大鼠氧化应激与肝脏代谢损伤。方法随机将44只SD雄性大鼠均分4组:对照组(C组)与SEM低、中、高剂量组(L组、M组、H组),SEM剂量分别为 0.0、7.5、15.0、30.0 mg/(kg·bw),连续灌胃 28 d。... 详细信息

目的研究氨基脲(semicarbazide,SEM)诱导的SD雄性大鼠氧化应激与肝脏代谢损伤。方法随机将44只SD雄性大鼠均分4组:对照组(C组)与SEM低、中、高剂量组(L组、M组、H组),SEM剂量分别为 0.0、7.5、15.0、30.0 mg/(kg·bw),连续灌胃 28 d。利用酶联免疫法(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)测定大鼠血清SEM含量、血清与肝脏活性氧(reactive oxygen species,ROS)与8-异前列腺素F2α(8-isoprostaglandin F2α,8-iso-PGF2α)含量、肝脏代谢酶细胞色素 P450 (cytochrome P450,CYP450)、鸟苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(uridine diphospho-glucuronosyl transferases,UGT)、谷胱甘肽硫转移酶(glutathione S-transferase,GST)与谷胱甘肽硫转移酶 pi (glutathione S-transferase pi,GSTpi)指标以及大鼠尿液SEM 含量。结果对比C组,各组血清SEM含量极显著升高(P肝脏CYP450活力均显著下降。M、H组UGT活力与GSTpi含量显著降低(P肝脏代谢酶活性,氧化应激可能对不同代谢酶产生不同抑制作用。

关键词：氨基脲氧化应激肝脏代谢酶毒性效应