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大豆皂苷在大鼠体内肝脏代谢物的分析鉴定

大豆皂苷在大鼠体内肝脏代谢物的分析鉴定

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作者：贾慧上海交通大学

学位级别：硕士

大豆皂苷属于五环三萜类齐墩果酸型皂苷,由苷元和低聚糖两部分组成。含量丰富,生物活性强,但其在体内的代谢率低下,需经过肠道微生物将其分解为苷元,进一步被肠道吸收发挥功能活性。本课题主要研究大豆皂苷苷元经大鼠肝脏代谢后代谢物... 详细信息

大豆皂苷属于五环三萜类齐墩果酸型皂苷,由苷元和低聚糖两部分组成。含量丰富,生物活性强,但其在体内的代谢率低下,需经过肠道微生物将其分解为苷元,进一步被肠道吸收发挥功能活性。本课题主要研究大豆皂苷苷元经大鼠肝脏代谢后代谢物的结构信息。通过快速溶剂萃取法(ASE)提取大豆胚芽中的皂苷粗提物,用响应面法优化提取条件。后粗提物中大豆异黄酮被高速逆流色谱法(HSCCC)去除,制备型高效液相色谱(Prep-HPLC)制备出高纯度皂苷单体,酸水解法制得皂苷苷元,超临界液相色谱-离子淌度-四极杆飞行时间(UPLC-Q/TOF-MS)分析和鉴定苷元分子结构;之后经过大鼠在体肝肠灌流模型,使用UPLC-Q/TOF-MS分析鉴定胆汁和血液样品以得到结构信息。实验结果表明,ASE萃取皂苷粗提物最优条件:78%乙醇,61℃,静态16 min,提取率8.49%。实验主要制备得到皂苷苷元C和E,得率分别为:1.35%、1.48%;由UPLC-Q/TOF-MS结果知,鉴定出几种皂苷苷元E的肝脏代谢物M1:苷元E-HO+乙酰半胱氨酸(CHNOS)、M2:苷元E+半胱氨酸(CHNOS)、M3:苷元E+O-H+半胱氨酸(CHNOS)。实验优化了ASE提取大豆皂苷粗提物的条件,与传统脱脂、浸提相比,ASE具有省时省料、高效的特点。通过多种仪器制备得到了高纯度苷元C和E,使用UPLC-Q/TOF-MS分析和鉴定了胆汁和血液样品,成功发现并推测出三种苷元E的肝脏代谢物。研究结果对基于生物利用度基础上进一步探讨大豆皂苷的生物活性具有重要意义。

关键词：大豆皂苷苷元在体肠灌流法肝脏代谢物 UPLC-Q/TOF-MS

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