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预防医学 2021年第10期33卷 1003-1008页

作者：夏勇蔡德雷傅剑云徐彩菊宋燕华孟真谢佳莹浙江省疾病预防控制中心理化毒理所浙江杭州310051

目的研究枸杞多糖对肝内胆汁淤积大鼠血液指标和肝组织形态的影响。方法雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组,模型对照组和枸杞多糖低、中、高剂量组。模型对照组及枸杞多糖各剂量组大鼠于实验开始当天给予α-奈异硫氰酸脂(ANIT)60 mg/k... 详细信息

目的研究枸杞多糖对肝内胆汁淤积大鼠血液指标和肝组织形态的影响。方法雄性SD大鼠50只,随机分为正常对照组,模型对照组和枸杞多糖低、中、高剂量组。模型对照组及枸杞多糖各剂量组大鼠于实验开始当天给予α-奈异硫氰酸脂(ANIT)60 mg/kg灌胃,以后每隔3天一次;正常对照组以色拉油代替ANIT。第3天起,各剂量组大鼠分别给予40、150、600 mg/kg枸杞多糖,模型对照组大鼠给予等体积蒸馏水。4周后测定大鼠血液和尿液指标,观察肝组织形态。结果实验第3天起,模型对照组和各剂量组大鼠活动减少,尿液颜色均发生改变,呈深黄色;正常对照组大鼠未见异常。模型对照组大鼠总胆红素、直接胆红素、总胆汁酸(TBA)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GGT)、胆固醇、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白细胞(WBC)、粒细胞百分比、尿胆红素、尿胆汁酸、肝重量、肝体比均高于正常对照组,红细胞和淋巴细胞百分比低于正常对照组(均P肝组织形态发生病理性改变。枸杞多糖高剂量组大鼠血TBA、ALP、γ-GGT、ALT、AST、WBC和肝体比低于模型对照组(均P肝组织病理性改变。抑制炎症反应、减轻氧化应激损伤可能是枸杞多糖缓解胆汁淤积性肝损伤的重要机制。

关键词：枸杞多糖肝内胆汁淤积肝功能肝组织形态

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灵芝粗多糖对二乙基亚硝胺诱导的小鼠肝脏组织形态及原癌基因和抑癌基因的影响

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食用菌学报 2014年第1期21卷 42-46,F0003页

作者：冯嫣王家东冯翠萍常明昌程红艳孟俊龙山西农业大学食品科学与工程学院山西太谷030801 信阳农林学院生物技术系河南信阳464000 山西省食用菌工程技术研究中心山西太谷030801 山西农业大学资源与环境学院山西太谷030801

采用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining)和实时荧光定量PCR(real-time PCR,RTPCR)法,研究灵芝(Ganoderma lucidum)粗多糖对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导的小鼠肝脏组织形态以及原癌基因H-ras和myc和抑癌基因P53、Rb1mRNA的影响,结果表明:灵芝粗多糖对DEN引起的小鼠肝脏损伤具有缓解作用,并可以抑制原癌基因的表达、提高抑癌基因的表达。

关键词：灵芝粗多糖肝组织形态原癌基因抑癌基因

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灵芝多糖对DEN诱导的小鼠肝脏组织形态和原癌基因及抑癌基因的影响

灵芝多糖对DEN诱导的小鼠肝脏组织形态和原癌基因及抑癌基因的影响

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作者：冯嫣山西农业大学

学位级别：硕士

[目的]研究灵芝多糖对二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠肝脏组织形态和原癌基因H-ras、myc及抑癌基因p53、Rb1mRNA表达量的影响,进而从分子水平探讨灵芝多糖的抗癌机理。 [方法](1)体外抗氧化活性以测定其总还原力、DPPH·、O2-·、·OH、H2O... 详细信息

[目的]研究灵芝多糖对二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠肝脏组织形态和原癌基因H-ras、myc及抑癌基因p53、Rb1mRNA表达量的影响,进而从分子水平探讨灵芝多糖的抗癌机理。 [方法](1)体外抗氧化活性以测定其总还原力、DPPH·、O2-·、·OH、H2O2的清除能力为指标。 (2)选用4周龄清洁级昆明小鼠随机分为6组,每组10只,雌雄各半。分别为空白对照组、模型组、多糖组、低剂量试验组(DEN+50mg/kg-d多糖)、中剂量试验组(DEN+100mg/kg-d多糖)、高剂量试验组(DEN+200mg/kg-d多糖)。模型组、DEN+多糖试验组分别给予100mg/L的DEN溶液,自由饮用。饲喂45d后,采集肝脏,制备常规HE染色切片,观察灵芝多糖对二乙基亚硝胺诱导小鼠组织形态的影响。并且提取小鼠肝脏RNA用荧光定量RT-PCR法检测原癌基因H-ras、myc及抑癌基因p53、Rb1mRNA的相对表达量。 [结果]1、灵芝多糖具有一定的抗氧化能力,当浓度达到2mg/mL时,还原力吸光度为1.237, DPPH·、O2-·、·OH、H2O2的清除率分别为89.3%、43.99%、89%、94.32%。 2、对照组和多糖组小鼠肝细胞围绕中央静呈放射状排列,且排列整齐。胞浆均质红染,细胞核蓝染清楚且呈椭圆形,无核分裂相。而DEN组小鼠肝细胞排列紊乱,有的肝细胞发生肿胀,甚至胀破,细胞核碎裂,甚至胞浆中有空泡,且有微细的淡红染的蛋白质颗粒(为肝的颗粒变性),由于肝细胞肿胀,肝窦变窄,导致局部组织缺血。与DEN组相比,试验组小鼠肝脏随着灵芝多糖剂量的增加,小鼠肝脏损伤程度减轻。 3、与空白对照组相比,原癌基因H-ras、myc mRNA的表达量,多糖对照组均下降,但差异不显著;DEN模型组分别升高83.2%、57.4%,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。与DEN模型组相比,随着试验组多糖浓度的增加,原癌基因H-ras、myc mRNA的表达量逐渐降低,低剂量组分别下降36.3%、31.2%,中剂量组分别下降45.9%、40.1%,高剂量组分别下降50.6%、41.8%,差异均达到极显著水平(P<0.01)。与正常对照组相比,抑癌基因Rb1、p53mRNA的表达量,多糖对照组分别升高23.7%、14.5%,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);DEN模型组分别升高11.6%、9.7%,差异均显著(P<0.05)。与DEN模型组相比,随着试验组多糖浓度的增加,抑癌基因Rb1、p53mRNA的表达量逐渐升高,低剂量组分别升高5.7%、9.6%,差异不显著或达到显著水平(P<0.05),中剂量组分别升高9.0%、24.1%,差异显著或达到极显著水平(P<0.05或P<0.01),高剂量组分别升高14.6%、43.4%,差异都达到极显著水平(P<0.01)。 [结论]灵芝多糖具有一定的抗氧化能力,对二乙基亚硝胺引起的小鼠肝脏损伤具有缓解作用,并可以抑制原癌基因的表达,提高抑癌基因的表达,说明灵芝多糖在一定程度上可以通过对原癌基因和抑癌基因的调控抑制癌症的发生或发展。

关键词：灵芝多糖体外抗氧化肝组织形态原癌基因抑癌基因

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白藜芦醇和胎肝干细胞移植联合治疗大鼠肝硬化

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中国组织工程研究 2019年第13期23卷 2049-2054页

作者：王宇翾天津市第四中心医院肝胆胃肠外科天津市300140

背景:研究发现,低剂量的白藜芦醇能够促进细胞增殖和分化,对胎肝干细胞移植治疗大鼠肝硬化有协同作用。目的:探讨白藜芦醇与胎肝干细胞移植联合治疗大鼠肝硬化的作用及其机制。方法:选取84只SD成年大鼠(由北京维通利华动物实验技术有限... 详细信息

背景:研究发现,低剂量的白藜芦醇能够促进细胞增殖和分化,对胎肝干细胞移植治疗大鼠肝硬化有协同作用。目的:探讨白藜芦醇与胎肝干细胞移植联合治疗大鼠肝硬化的作用及其机制。方法:选取84只SD成年大鼠(由北京维通利华动物实验技术有限公司提供),采用四氯化碳灌胃给药构建肝硬化模型,最终成功造模81只大鼠。造模成功后从中随机取80只大鼠随机分为4组,每组20只。对照组大鼠尾静脉注射0.5 mL的L-DMEM,胎肝干细胞组大鼠尾静脉注射0.5 mL胎肝干细胞悬液;白藜芦醇组大鼠灌胃120 mg/kg白藜芦醇,联合治疗组大鼠进行二者联合治疗,1次/d,连续治疗7 d。治疗3周后采用吲哚氰绿排泄实验测定吲哚氰绿15 min潴留率,采用全自动生化分析仪检测血清和肝组织生化指标,苏木精-伊红染色观察肝组织形态学变化,RT-PCR、Western blot检测肝组织转化生长因子β1的表达。结果与结论:①与对照组比较,胎肝干细胞组及白藜芦醇组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、血清总胆红素以及肝组织丙二醛水平均显著降低(P 肝组织谷胱甘肽过氧化物酶及环磷酸鸟苷水平均显著升高(P <0.05);联合治疗组上述生化指标水平均优于胎肝干细胞组及白藜芦醇组(P <0.05);②胎肝干细胞组、白藜芦醇组大鼠肝细胞变性、坏死及纤维化程度均有明显减轻,联合治疗组减轻更明显;③与对照组比较,白藜芦醇干预治疗和胎肝干细胞移植治疗后吲哚氰绿15 min潴留率显著升高(P <0.05),联合治疗组吲哚氰绿15 min潴留率进一步升高(P <0.01);④与对照组比较,白藜芦醇组及胎肝干细胞组转化生长因子β1表达明显降低(P <0.05),联合治疗组进一步降低(P <0.01);⑤结果表明,白藜芦醇干预联合胎肝干细胞移植治疗能有效改善肝硬化大鼠生化指标水平,可以明显减轻大鼠肝硬化程度和肝脏病变,这可能与降低转化生长因子β1表达有关。

关键词：肝硬化胎肝干细胞干细胞移植白藜芦醇转化生长因子β1 肝脏病变血清总胆红素肝组织形态肝组织工程

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珊瑚状猴头菌多糖降血胆固醇作用及机制的研究

珊瑚状猴头菌多糖降血胆固醇作用及机制的研究

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作者：韩爱丽山西农业大学

学位级别：硕士

[目的]研究珊瑚状猴头菌多糖降血胆固醇作用及机制,为珊瑚状猴头菌多糖的开发提供理论依据。 [方法]将SD大鼠32只,随机分为4组：对照组、模型组、剂量Ⅰ组（100mg/kg.w/d）及剂量Ⅱ组（200mg/kg·w/d）。每3天称重一次,记录数值。35... 详细信息

[目的]研究珊瑚状猴头菌多糖降血胆固醇作用及机制,为珊瑚状猴头菌多糖的开发提供理论依据。 [方法]将SD大鼠32只,随机分为4组：对照组、模型组、剂量Ⅰ组（100mg/kg.w/d）及剂量Ⅱ组（200mg/kg·w/d）。每3天称重一次,记录数值。35天后,眼球取血测定大鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量,计算血浆致动脉硬化指数（AIP）;采集心脏称重,计算心脏指数;采用HE染色观察大鼠肝脏组织形态学变化;采用real time RT-PCR技术检测大鼠肝脏胆固醇合成限速酶（HMG-CoA还原酶）、低密度脂蛋白受体（LDL-R）、胆汁酸合成限速酶（CYP7α-1） mRNA表达量;收集大鼠粪便,采用磷钼酸比色法测定其胆汁酸含量。 [结果]（1）与对照组相比,模型组体重、AIP、心脏指数显著升高（P＜0.05或P＜0.01）,与模型组相比,剂量组体重、AIP显著下降（P＜0.05或P＜0.01）,心脏指数均下降,但差异不显著。与对照组相比,模型组TC、LDL-C含量显著升高（P＜0.01）,HDL-C含量显著下降（P＜0.01）,甘油三酯含量升高,但差异不显著;与模型组相比,剂量组随着珊瑚状猴头菌剂量的增加,TC、LDL-C含量呈下降趋势,HDL-C含量呈上升趋势,剂量Ⅰ组差异显著（P＜0.05）,剂量Ⅱ组差异极显著（P＜0.01）;血清TG含量随着多糖剂量的增加而降低,但差异不显著。与对照组相比,模型组粪便胆汁酸含量显著升高（P＜0.01）,与模型组相比,剂量组粪便胆汁酸含量显著升高（P＜0.05或P＜0.01）。（2）对照组肝细胞排列整齐,胞浆丰富,而模型组胞浆内有大量滴型脂肪空泡,肝细胞排列混乱,肝损伤程度极严重。剂量Ⅰ组与模型组比较,肝细胞脂肪空泡明显变少,排列较为整齐,剂量Ⅱ组肝细胞脂肪空泡很少,肝细胞排列整齐,肝损伤程度轻微,珊瑚状猴头菌多糖保肝作用具有剂量依赖性。（3）与对照组相比,模型组中HMG-CoA还原酶mRNA表达量显著升高（P＜0.01）,LDL-R、CYP7α-1mRNA表达量显著下降(P＜0.01与模型组相比,剂量Ⅰ组HMG-CoA还原酶mRNA表达量下降,差异不显著,LDL-R、CYP7α-1mRNA表达量显著升高（P＜0.05）,剂量Ⅱ组HMG-CoA还原酶mRNA表达量显著下降（P＜0.05）, LDL-R、 CYP7α-1mRNA表达量显著升高（P＜0.01）。 [结论]珊瑚状猴头菌多糖能够降低血脂水平,降低动脉硬化发生的危险性,保护肝脏,增加粪便胆汁酸的排泄,抑制胆固醇合成限速酶（HMG-CoA还原酶）mRNA表达,促进肝脏低密度脂蛋白受体（LDL-R）、胆汁酸合成限速酶（CYP7α-1） mRNA表达。可见,珊瑚状猴头菌多糖对高胆固醇血症有一定的缓解作用。

关键词：珊瑚状猴头菌多糖胆固醇肝组织形态 mRNA表达

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绣球菌多糖对高脂高胆固醇膳食大鼠胆固醇代谢的影响及作用机理

绣球菌多糖对高脂高胆固醇膳食大鼠胆固醇代谢的影响及作用机理

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作者：杨亚茹山西农业大学

学位级别：硕士

[目的]探究绣球菌多糖(Sparassis latifolia polysaccharides,SLPs)对高脂高胆固醇膳食大鼠血清和肝脏胆固醇代谢的影响及作用机理,从而为绣球菌多糖作为功能食品的原料开发提供理论依据。[方法]将50只6 w龄清洁级雌性SD大鼠,适应性喂养... 详细信息

[目的]探究绣球菌多糖(Sparassis latifolia polysaccharides,SLPs)对高脂高胆固醇膳食大鼠血清和肝脏胆固醇代谢的影响及作用机理,从而为绣球菌多糖作为功能食品的原料开发提供理论依据。[方法]将50只6 w龄清洁级雌性SD大鼠,适应性喂养1 w后,随机分为对照组(NC group)、高脂高胆固醇模型组(HFCM group)、低剂量组(HFC+LD group)、中剂量组(HFC+MD group)和高剂量组(HFC+HD group)。每组10只,低、中、高剂量组分别灌服100、200和400 mg/kg·bw·d的绣球菌多糖溶液,NC组和HFCM组给予等量生理盐水。除NC组外,各试验组均给予高脂高胆固醇膳食,饲喂8 w后,采集全血并制备血清,测定血清脂质相关指标:总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和总胆汁酸(Total bile acid,TBA),抗氧化指标:超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)与丙二醛(Malondialdehyde,MDA),用GC-MS检测血清的差异成分;采集肝脏,测定肝脏指数,用HE染色法观察肝脏组织结构,测定大鼠肝脏脂质相关指标TC、TG、LDL-C、HDL-C和TBA,抗氧化指标SOD、T-AOC、CAT、GSH-Px与MDA。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测肝脏中3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutarate monoacylcoenzyme A reductase,HMG-CoA R)、胆固醇酯化酶(Sterol O-acyltransferase 1,SOAT1)、胆固醇-7α-羟化酶(Cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7α-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisome proliferators-activated receptors,PPARα)、ATP结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(Lecithin cholesterol acyl transferase,LCAT)和清除剂受体B类I型(Scavenger receptor class B type I,SR-BI)等基因m RNA的表达量。[结果](1)各试验组体重和摄食量均无显著性差异。与NC组相比,HFCM组血清的TC、LDL-C和TBA含量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),HDL-C含量极显著降低(P<0.01)。T-AOC、GSH-Px、CAT和SOD活性极显著降低(P<0.01),MDA含量极显著升高(P<0.01)。与HFCM组相比,HFC+HD组血清的TC和LDL-C含量降低,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);HFC+HD组CAT活性升高,差异极显著,各剂量组T-AOC活性升高,HFC+HD组GSH-Px和SOD的活性升高,各剂量组MDA含量降低,差异均显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。(2)从NC组和HFCM组血清中筛选出11种差异代谢物,与NC组相比,HFCM组血清中代谢物上调的主要有苯丙氨酸、蛋氨酸、丙酸与缬氨酸;下调的主要有1,5-脱水山梨糖醇、丙氨酸、甘氨酸、脯氨酸、谷氨酸、丝氨酸和苏氨酸。从HFCM组和绣球菌多糖组血清中筛选出14种差异代谢物。与HFCM组相比,绣球菌多糖组血清中代谢物上调的有戊酸、酪氨酸、甘油、甘氨酸、苏氨酸、丝氨酸、丙氨酸和琥珀酸,下调的有尿素、嘧啶、葡萄糖、胆固醇、棕榈酸和异亮氨酸。通过代谢通路分析,绣球菌多糖通过影响7条代谢通路来调节胆固醇代谢,其中谷氨酸与谷氨酰胺代谢影响最大。(3)与NC组相比,HFCM组肝脏指数极显著升高(P<0.01);肝脏颜色发白,表面粗糙,肝脏脂滴增多,脂肪空泡变多,肿胀程度变大;TC、TG和LDL-C含量均极显著升高(P<0.01),HDL-C含量极显著降低(P<0.01);SOD

关键词：绣球菌多糖胆固醇代谢肝组织形态代谢差异成分基因表达

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