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肝素酶基因表达与食管癌转移的关系

山东医药 2003年第33期43卷 9-10页

作者：陈奎生张云汉高冬玲闫亮张蕾郑州大学第一附属医院河南郑州450052

目的　探讨肝素酶基因表达与食管癌转移的关系。方法　采用逆转录聚合酶链反应技术 ( RT-PCR)检测 5 4例食管癌组织、癌旁组织及正常粘膜中肝素酶基因的表达。结果　有淋巴结转移的食管癌癌组织中肝素酶基因阳性表达率为 90 .5 % ( 19/ ... 详细信息

目的　探讨肝素酶基因表达与食管癌转移的关系。方法　采用逆转录聚合酶链反应技术 ( RT-PCR)检测 5 4例食管癌组织、癌旁组织及正常粘膜中肝素酶基因的表达。结果　有淋巴结转移的食管癌癌组织中肝素酶基因阳性表达率为 90 .5 % ( 19/ 2 1) ,癌旁组织为 6 1.9% ( 13/ 2 1) ,正常粘膜为 0 ( 0 / 2 1)。无淋巴结转移的食管癌癌组织中肝素酶基因阳性表达率为 15 .2 % ( 5 / 33) ,癌旁组织为 6 % ( 2 / 33) ,正常粘膜为 0 ( 0 / 33)。有淋巴结转移的食管癌组织及癌旁组织中肝素酶基因阳性表达率均高于无淋巴结转移者 ,二者相比差异均有显著性 (癌组织 P肝素酶基因表达可能与食管癌发生转移有关。

关键词：肝素酶基因表达食管癌肿瘤转移逆转录聚合酶链反应检测

生长抑素类似物对胃癌细胞株SGC-7901及其裸鼠种植瘤肝素酶表达的影响

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生长抑素类似物对胃癌细胞株SGC-7901及其裸鼠种植瘤肝素酶表达的...

作者：季永胜福建医科大学

学位级别：硕士

[摘要] 目的:通过体外及体内实验,研究生长抑素类似物奥曲肽(Octreotide,OCT)对胃癌细胞株SGC-7901及其裸鼠种植瘤肝素酶(heparanase,Hpa)表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法:(1)取人胃癌细胞株SGC-7901,体外培养后取处于对数生长... 详细信息

[摘要] 目的:通过体外及体内实验,研究生长抑素类似物奥曲肽(Octreotide,OCT)对胃癌细胞株SGC-7901及其裸鼠种植瘤肝素酶(heparanase,Hpa)表达的影响,并初步探讨其作用机制。方法:(1)取人胃癌细胞株SGC-7901,体外培养后取处于对数生长的细胞制成单细胞悬液,加入不同浓度的OCT共培养24h和48h,以半定量RT-PCR法及免疫细胞化学法检测OCT对胃癌细胞Hpa表达的影响。(2)采用SGC-7901人胃癌细胞株建立裸鼠人胃癌种植瘤模型,分别给予奥曲肽、5-FU、奥曲肽+5-FU、生理盐水干预6周后,免疫组化测定种植瘤组织内Hpa、bFGF的表达。结果:(1)胃癌细胞经奥曲肽1×10mol/L、1×10mol/L、1×10mol/L、1×10mol/L及对照组作用24小时后,HpamRNA的表达水平分别为0.65±0.13(t=-10.72, P=0.000, vs对照)、1.05±0.08(t= -4.98, P=0.001, vs对照)、1.36±0.07(t= -0.43, P=0.68, vs对照)、1.48±0.08(t=1.20, P=0.26, vs对照)、1.39±0.04;经奥曲肽1×10mol/l、1×10mol/l、1×10mol/l、1×10mol/l及对照组作用48小时后,HpamRNA的表达水平分别为0.12±0.03(t=-15.52, P=0.000, vs对照)、0.55±0.10(t= -9.76, P=0.000, vs对照)、1.23±0.07(t=-0.71, P=0.49, vs对照)、1.21±0.15(t= -0.98, P=0.35, vs对照)、1.28±0.06。胃癌细胞经1×10mol/L和1×10mol/L的OCT作用24h和48h后,Hpa蛋白的表达水平与对照组的差异也有显著性意义(F=94.346,P<0.01)。(2)种植瘤组织中,Hpa在奥曲肽组、5-FU组、联合治疗组和对照组中的弱阳性表达率分别是25.0%、41.7%、25.0%和16.7%;强阳性表达率分别是16.7%、33.3%、8.3%和75.0%。曲肽组和联合治疗组的阳性率与对照组差异有显著性意义(x2值分别为9.32和12.42,P值分别为0.025

关键词：肝素酶奥曲肽生长抑素生长抑素受体碱性成纤维细胞生长因子

人肝素酶基因正反义荧光真核表达载体的构建及肝癌细胞转染

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第三军医大学学报 2006年第1期28卷 47-49页

作者：陈陵李志宏杨仕明李晶晶蔡永国房殿春罗元辉王东旭第三军医大学西南医院全军消化内科中心重庆400038

目的构建正义和反义人肝素酶绿色荧光蛋白真核共表达载体,并分别转染人低转移肝癌细胞株MHCC97-L及高转移细胞株MHCC97-H和HCCLM6。方法采用基因重组技术,用EcoRⅠ从pcDNA3-Hpa质粒上切下约1.7 kb的人肝素酶全长cDNA片段,然后连入pIRES2... 详细信息

目的构建正义和反义人肝素酶绿色荧光蛋白真核共表达载体,并分别转染人低转移肝癌细胞株MHCC97-L及高转移细胞株MHCC97-H和HCCLM6。方法采用基因重组技术,用EcoRⅠ从pcDNA3-Hpa质粒上切下约1.7 kb的人肝素酶全长cDNA片段,然后连入pIRES2-EGFP质粒的EcoRⅠ酶切位点上,经BamHⅠ酶切鉴定出正义和反义表达载体,并进一步测序确认。用脂质体法将肝素酶正义真核表达载体转入人低转移肝癌细胞株MHCC97-L,反义真核表达载体转入人高转移肝癌细胞株MHCC97-H和HCCLM6,24 h后荧光倒置显微镜下检测转染结果。结果经BamHⅠ酶切后,正义质粒形成5.3 kb和1.7 kb两条DNA片段,而反义重组质粒为6.5 kb和0.5 kb两条DNA片段,与理论计算值完全一致;测序结果进一步确认了方向的正确性。转染成功的肝癌细胞在倒置荧光显微镜下呈绿色荧光。结论成功构建了人肝素酶的正、反义真核表达载体,并成功转染人低、高转移肝癌细胞株,为进一步研究正、反义肝素酶基因转染对肝癌细胞的转移能力的影响奠定了基础。

关键词：肝素酶荧光真核表达载体转染

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肝素酶与肿瘤转移

中华病理学杂志 2000年第4期29卷 300-302页

作者：朱忠政殷正丰吴孟超上海第二军医大学东方肝胆外科医院 200438

肝素酶：一种新的广谱的肿瘤转移相关抗原在中晚期肿瘤免疫治疗中...

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肝素酶特异性RNAi对人食管癌移植瘤组织中Hpa基因表达的影响

中华医学会第七次全国消化病学术会议

作者：杨仕明房殿春汤旭东陈婷熊震陈陵蔡永国中国人民解放军第三军医大学西南医院全军消化病研究所

肿瘤细胞要发生转移,就必须同时破坏构成细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的两种主要成分：结构蛋白和蛋白多糖。在过去的10多年中,研究兴趣大多集中在以结构蛋白为底物的基质金属蛋白酶 (MMPs)上,但后来发现 MMPs 至少有17种,所有... 详细信息

肿瘤细胞要发生转移,就必须同时破坏构成细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的两种主要成分：结构蛋白和蛋白多糖。在过去的10多年中,研究兴趣大多集中在以结构蛋白为底物的基质金属蛋白酶 (MMPs)上,但后来发现 MMPs 至少有17种,所有 MMPs 合起来几乎能够降解所有的细胞外基质的结构蛋白成分,对其中一个酶的抑制会有代偿的途径进行弥补,这样以结构蛋白为底物的蛋白酶的抑制剂就很难在抗肿瘤转移中发挥很好的作用,而近年来发现的肝素酶(heparanase,Hpa)是唯一能裂解 ECM 内蛋白多糖主要成分硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycans,HSPG)的内源性糖苷内切酶,研究表明

关键词：肝素酶肿瘤转移免疫治疗

来源： cnki会议评论

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郑州大学学报（医学版） 2007年第1期42卷 12-14页

作者：孙淼淼张红曹学全娄欣高冬玲张岚宋一民陈奎生郑州大学第一附属医院病理科

目的:应用RNAi技术沉默肝素酶(heparanase,Hpa)基因,探讨其对人食管癌裸鼠移植瘤组织中Hpa基因表达的影响。方法:①先转染后成瘤:采用浓度为15μmol/L体外合成的Hpa小分子干扰RNA(siRNA)转染EC9706细胞72h,另设无关序列组及空白对照组... 详细信息

目的:应用RNAi技术沉默肝素酶(heparanase,Hpa)基因,探讨其对人食管癌裸鼠移植瘤组织中Hpa基因表达的影响。方法:①先转染后成瘤:采用浓度为15μmol/L体外合成的Hpa小分子干扰RNA(siRNA)转染EC9706细胞72h,另设无关序列组及空白对照组。然后将转染后的EC9706细胞种植于裸鼠皮下构建裸鼠食管癌移植瘤,待瘤体长至足够大时,取瘤组织;②先成瘤后转染:构建裸鼠食管癌移植瘤模型,待肿瘤长出1周后,依每次3μg/只腹腔注射siRNA及无关序列,连续3d,另1组仅注射PBS作空白对照,然后取瘤组织。采用免疫组化及原位杂交技术观察各组瘤组织中肝素酶蛋白及mRNA的表达。结果:无论是先转染后成瘤组还是先成瘤后转染组siRNA均可下调裸鼠食管癌移植瘤组织中Hpa蛋白及mRNA的表达,与无关序列组及空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:应用RNAi技术沉默Hpa基因可以有效下调裸鼠食管癌移植瘤组织中Hpa蛋白及mRNA的表达,为临床防治食管癌浸润转移奠定了一定的理论基础。

关键词：肝素酶食管肿瘤癌 EC9706细胞系裸鼠 RNAi技术

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肝素酶在喉鳞癌中的表达及其临床意义

中国肿瘤临床与康复 2007年第4期14卷 300-302页

作者：于湛于敏佟欣何胜泉纪育斌袁野任重第二炮兵总医院耳鼻咽喉科北京100088 中国医科大学病理教研室沈阳110001 中国医科大学附属一院耳鼻咽喉科沈阳110001

目的探讨肝素酶在喉癌中表达及其与喉癌临床病理因素和预后的关系。方法分别对54例喉癌组织做肝素酶的免疫组化及原位杂交检测。结果肝素酶在喉癌组织中显示高表达(64.8%),而在癌旁组织上皮中表达阴性,其与喉癌的临床分期、淋巴结转移... 详细信息

目的探讨肝素酶在喉癌中表达及其与喉癌临床病理因素和预后的关系。方法分别对54例喉癌组织做肝素酶的免疫组化及原位杂交检测。结果肝素酶在喉癌组织中显示高表达(64.8%),而在癌旁组织上皮中表达阴性,其与喉癌的临床分期、淋巴结转移明显相关(P肝素酶阳性表达组患者的5年生存率(51.0%)明显低于阴性表达组(80.0%)。结论肝素酶在喉癌的侵袭和转移中可能起到重要作用,肝素酶表达阳性的患者可能更易发生转移且预后不良。

关键词：肝素酶喉肿瘤淋巴结转移

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肝素酶在胃癌组织中表达的临床意义探讨

浙江中西医结合杂志 2007年第11期17卷 681-683页

作者：沈强陈岳明杭州市第一人民医院杭州310006

目的:探讨肝素酶表达在胃癌发生、发展中的作用。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定42例胃癌和26例非癌组织中肝素酶的表达情况。采用χ2检验比较肝素酶的表达与胃癌临床病理特征之间的关系。结... 详细信息

目的:探讨肝素酶表达在胃癌发生、发展中的作用。方法:用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定42例胃癌和26例非癌组织中肝素酶的表达情况。采用χ2检验比较肝素酶的表达与胃癌临床病理特征之间的关系。结果:胃癌中肝素酶呈阳性表达26例(61.9%);非癌组织中呈弱阳性表达1例(3.8%)。RT-PCR和FQ-PCR的检测结果均相同。胃癌TNM分期中Ⅲ、Ⅳ期肝素酶mRNA表达阳性率明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P肝素酶表达与浆膜浸润、淋巴结转移或远端转移呈相关性(P肝素酶可能促进胃癌浸润和转移,在胃癌的转移途径中,参与淋巴道转移而非血道转移。肝素酶可作为预测胃癌复发、转移的分子标志物之一。

关键词：胃癌肝素酶逆转录聚合酶链反应实时荧光定量聚合酶链反应

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肝素酶:中晚期肿瘤治疗的理想靶位

实用临床医药杂志 2008年第1期12卷 1-4页

作者：杨仕明房殿春第三军医大学西南医院全军消化病研究所重庆400038

恶性肿瘤是当前严重影响人类健康的最重要的疾病之一,而肿瘤的侵袭和转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤的早期诊断和早期治疗固然是肿瘤患者获得长期生存的主要途径,但患者已发生转移,而常规的手术和放疗、化疗疗效有限。如何有... 详细信息

恶性肿瘤是当前严重影响人类健康的最重要的疾病之一,而肿瘤的侵袭和转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤的早期诊断和早期治疗固然是肿瘤患者获得长期生存的主要途径,但患者已发生转移,而常规的手术和放疗、化疗疗效有限。如何有效延长这类患者的生存期显得尤为重要。[第一段]

关键词：肝素酶恶性肿瘤肿瘤免疫治疗