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微小RNA-124靶向调控丙酮酸激酶同工酶2对喉癌Hep-2细胞增殖与迁移及侵袭的影响

中国临床药理学杂志 2021年第17期37卷 2270-2273页

作者：谢荣盛陈勇邹佛明梁业江西新钢中心医院肿瘤科江西新余338000

目的观察微小RNA-124(miR-124)靶向调控肌肉丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,并探讨其作用机制。方法将Hep-2喉癌细胞分为3组:空白组、mimics组和抑制组。将miR-124类似物(miR-124 mimics)转染到mim... 详细信息

目的观察微小RNA-124(miR-124)靶向调控肌肉丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,并探讨其作用机制。方法将Hep-2喉癌细胞分为3组:空白组、mimics组和抑制组。将miR-124类似物(miR-124 mimics)转染到mimics组细胞中,miR-124抑制物转染至抑制组,空白组不做任何干预。其中转染对应DNA均为0.2μg,室温孵育5 min。用双荧光素酶活性检测验证miR-124与PKM2靶向关系;用荧光定量PCR检测细胞miR-124的表达;用蛋白质印迹法检测PKM2蛋白的表达;用CCK-8法、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测细胞增殖水平(OD值)、迁移和侵袭能力(转染细胞穿过基质膜至下室的细胞数目)。结果与野生型PKM2的3’UTR(PKM2-WT)与miR-124-NC共转染的Hep-2细胞比较,PKM2-WT与miR-124 mimics共转染的Hep-2细胞的荧光酶活性分别为0.97±0.01,0.43±0.05。空白组、mimics组和抑制组的miR-124相对表达量为0.20±0.03,0.43±0.05和0.07±0.02;PKM2蛋白的相对表达量为0.44±0.06,0.19±0.04和0.55±0.04;在12 h的增殖水平分别为0.21±0.04,0.18±0.04和0.26±0.04;在24 h的细胞迁移能力分别为0.37±0.04,0.13±0.03和0.44±0.04;侵袭能力分别为(132±5),(98±5)和(154±6)个。上述指标:与PKM2-WT共转染的miR-124-NC与miR-124 mimics比较差异有统计学意义(P24的表达能够影响喉癌Hep-2细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能是miR-124靶向调控PKM2实现。

关键词：微小RNA-124 肌肉丙酮酸激酶同工酶2 喉癌Hep-2细胞增殖迁移侵袭

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