检索结果-南通市图书馆

物理学报 2016年第17期65卷 180-189页

作者：郭坤琨谢仪湖南大学材料科学与工程学院长沙410082

以细胞骨架中肌动蛋白纤维为例,针对肌动蛋白亚基结合核苷酸状态简化为单态和双态两种模型,介绍了肌动蛋白纤维的组装动力学,并着重阐述了肌动蛋白纤维稳态时出现的"踏车现象"和长度扩散行为.

关键词：肌动蛋白纤维组装踏车现象长度扩散

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布朗动力学理论模拟动态肌动蛋白纤维的增长

化学学报 2011年第2期69卷 145-152页

作者：郭坤琨韩文驰湖南大学材料科学与工程学院长沙410082 沈阳化工大学材料科学与工程学院沈阳110142

肌动蛋白的聚合耦合三磷酸腺酐(ATP)分子水解成二磷酸腺苷(ADP)分子和磷酸(Pi)的释放两个过程.因此,肌动蛋白纤维上的原聚体存在三种不同状态,即分别结合ATP,ADP/Pi和ADP分子.原聚体的不同状态导致纤维具有不同的空间图谱,这些状态的空... 详细信息

肌动蛋白的聚合耦合三磷酸腺酐(ATP)分子水解成二磷酸腺苷(ADP)分子和磷酸(Pi)的释放两个过程.因此,肌动蛋白纤维上的原聚体存在三种不同状态,即分别结合ATP,ADP/Pi和ADP分子.原聚体的不同状态导致纤维具有不同的空间图谱,这些状态的空间分布将影响纤维的各种行为.为此,建立了相应的分子模型,在布朗动力学模拟中实现了遵循时间演化的连续马尔可夫随机过程的解聚和水解反应;重点阐述了如何实现纤维两端的聚合和解聚达到化学平衡的方法,并系统研究了纤维在结合ATP分子的肌动蛋白单体溶液中的增长行为.

关键词：布朗动力学肌动蛋白纤维聚合解聚

γδT细胞杀肿瘤细胞过程中溶酶体运动及肌动蛋白纤维、T细胞受体重排特征研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第12期26卷 1064-1067页

作者：钱景彭慧琴严杰陈文斌浙江大学医学院病原生物学教研室杭州310058 浙江大学医学院附属第一医院外科杭州310003

目的观察γδT细胞溶解肿瘤靶细胞过程中溶酶体运动特征,了解T细胞受体、肌动蛋白纤维在效应／靶细胞接触区域的分布特征,探讨γδT细胞抗肿瘤生物学活性的可能机理。方法Lysotracker Red-DND99标记的γδT细胞与人恶性黑色素瘤MeWo细... 详细信息

目的观察γδT细胞溶解肿瘤靶细胞过程中溶酶体运动特征,了解T细胞受体、肌动蛋白纤维在效应／靶细胞接触区域的分布特征,探讨γδT细胞抗肿瘤生物学活性的可能机理。方法Lysotracker Red-DND99标记的γδT细胞与人恶性黑色素瘤MeWo细胞共同培养,激光共聚焦显微镜实时观察γδT细胞杀伤肿瘤细胞过程中溶酶体运动过程及其特点。γδT细胞与MeWo细胞共同培养后甲醛固定,以rhodamine phalloidin标记肌动蛋白纤维或anti—TCRδ1-FITC抗体标记T细胞受体,激光共聚焦显微镜观察γδT细胞及肿瘤细胞之间免疫突触形成特征。结果γδT细胞可快速识别并集聚于肿瘤细胞周围。在与肿瘤细胞直接接触的10 min内,将胞内溶酶体成分“倾吐”于肿瘤细胞后随之离开。肿瘤细胞受大量γδT细胞攻击后约60 min,出现细胞膜皱缩、变圆,约80 min死亡。在上述效应／靶细胞接触作用过程中,肌动蛋白纤维及T细胞受体均匀分布于γδT表面,不出现在效应／靶细胞接触区域富集现象。结论γδT细胞通过与肿瘤细胞直接接触,释放其细胞内溶酶体内含物直接杀伤肿瘤细胞。与细胞毒性T淋巴细胞不同,γδT细胞与肿瘤细胞之间不形成典型的免疫突触。

关键词： γδT淋巴细胞肿瘤细胞溶酶体肌动蛋白纤维免疫突触

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细胞骨架——肌动蛋白纤维

生物学通报 2005年第2期40卷 43-43页

作者：徐国恒北京大学医学部生理系北京100083

20世纪60年代以来的研究发现，真核细胞质中存在着由蛋白纤维构成的复杂网络状结构——细胞骨架(cytoskeleton)。另外，植物细胞中也有细胞骨架成分。

关键词：细胞骨架肌动蛋白纤维真核细胞细胞质植物细胞

机械应力相关调控蛋白在小鼠磨牙发育中的时空表达

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四川大学学报（医学版） 2021年第1期52卷 82-86页

作者：杜文罗天于海洋口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院修复Ⅱ科成都610041

目的通过检测机械应力相关调控蛋白〔肌动蛋白纤维(F-actin)、非肌肉肌球蛋白ⅡB(non-muscle myosinⅡB,NMⅡB)和细胞黏着斑蛋白Vinculin〕在牙发育过程的时空性表达,探究机械应力与牙早期发育之间可能的联系。方法以小鼠磨牙为研究模型... 详细信息

目的通过检测机械应力相关调控蛋白〔肌动蛋白纤维(F-actin)、非肌肉肌球蛋白ⅡB(non-muscle myosinⅡB,NMⅡB)和细胞黏着斑蛋白Vinculin〕在牙发育过程的时空性表达,探究机械应力与牙早期发育之间可能的联系。方法以小鼠磨牙为研究模型,通过免疫荧光染色,检测构成化学机械系统的重要分子F-actin、NMⅡB和Vinculin在牙发育蕾状期、帽状期、钟状早期和钟状末期的表达。结果染色结果显示F-actin、NMⅡB和Vinculin均在牙发育各阶段广泛或局限性表达于牙上皮,其中F-actin亦稳定表达于间充质细胞中。荧光表达强度定量分析显示,F-actin和NMⅡB的表达均在牙发育早期阶段有明显上升,但分别于钟状早期和钟状末期回落,相邻发育阶段间的表达变化差异均有统计学意义(P肌动蛋白与肌球蛋白结合形成的肌动球蛋白复合体和细胞黏附分子在牙发育中的联系及具体作用机制依然有待进一步探究。

关键词：机械应力牙发育肌动蛋白纤维非肌肉肌球蛋白细胞黏着斑蛋白

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细胞力学调控中肌动蛋白与肌球蛋白Ⅱ的作用

中国组织工程研究 2022年第25期26卷 4004-4009页

作者：范佳玉徐丽萌刘阳王立太原理工大学生物医学工程学院山西省太原市030024

背景:目前,肌动蛋白与肌球蛋白Ⅱ这两种重要细胞骨架蛋白的作用已被广泛研究,但其在细胞力学调控中的作用还尚不完善。目的:阐明肌动蛋白与肌球蛋白Ⅱ在细胞力学性能调节中的作用。方法:用原子力显微镜测量HeLa细胞长、短轴末端区域的... 详细信息

背景:目前,肌动蛋白与肌球蛋白Ⅱ这两种重要细胞骨架蛋白的作用已被广泛研究,但其在细胞力学调控中的作用还尚不完善。目的:阐明肌动蛋白与肌球蛋白Ⅱ在细胞力学性能调节中的作用。方法:用原子力显微镜测量HeLa细胞长、短轴末端区域的表面弹性模量随时间的改变,通过肌动蛋白纤维抑制剂Cytochalasin D、肌球蛋白Ⅱ的ATP酶活性抑制剂blebbsitatin以及肌球蛋白Ⅱ收缩活性增强剂Calysulin A处理HeLa细胞,利用共聚焦显微镜测量HeLa细胞内肌动蛋白纤维、肌球蛋白Ⅱ的聚集区域改变以及Rho A活化特征。结果与结论:①各处理组HeLa细胞长、短轴末端的表面弹性模量会出现趋势性变化,并且对侧末端模量变化不一致;②肌动蛋白纤维聚合受抑制会降低表面弹性模量,但肌球蛋白Ⅱ收缩活性增强会显著增加表面弹性模量;③HeLa细胞表面弹性模量随肌动蛋白聚集增强,受到Rho A活化的调节,但不随肌球蛋白Ⅱ的聚集改变;④结果表明,HeLa细胞因肌动蛋白、肌球蛋白Ⅱ引起的细胞力学性能改变不仅表现为数值改变,还体现在细胞力学性能的非对称升降,这些改变受到肌动蛋白纤维的分布区域以及肌球蛋白Ⅱ收缩活性的调节。

关键词：细胞表面弹性模量细胞长轴肌动蛋白纤维肌球蛋白Ⅱ Rho A蛋白细胞力学原子力显微镜

ANLN缺失后Hela细胞的力学特性与骨架蛋白变化分析

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中国组织工程研究 2020年第1期24卷 87-92页

作者：徐丽萌罗文宇张书伟王立太原理工大学生物医学工程学院

背景:目前关于ANLN蛋白在细胞分裂间期调节细胞形态、细胞-细胞间接完整性以及胞质分裂中稳定收缩环的作用已经明确,但其对细胞力学性能和骨架蛋白的影响还鲜有报道。目的:探讨ANLN缺失对分裂间期细胞力学特性与骨架蛋白的影响。方法:... 详细信息

背景:目前关于ANLN蛋白在细胞分裂间期调节细胞形态、细胞-细胞间接完整性以及胞质分裂中稳定收缩环的作用已经明确,但其对细胞力学性能和骨架蛋白的影响还鲜有报道。目的:探讨ANLN缺失对分裂间期细胞力学特性与骨架蛋白的影响。方法:通过原子力显微镜分别测量正常Hela细胞与siRNA敲降ANLN的Hela细胞的表面弹性模量和破膜力;采用激光共聚焦显微镜观察正常Hela细胞与siRNA敲降ANLN的Hela细胞的肌球蛋白ⅡA以及肌动蛋白纤维分布特征。结果与结论:①敲降ANLN的Hela细胞的表面弹性模量明显高于未经处理的正常Hela细胞,与敲降ANLN的细胞相比,正常细胞的表面弹性模量更倾向于极性分布(两极间逐步降低),但两组细胞长轴边缘区域的破膜力并没有明显差别;②ANLN敲降组细胞在边缘位置有较低的肌球蛋白ⅡA分布;③ANLN敲降组近底层细胞-细胞连接区域的肌动蛋白纤维趋向更散乱,并且细胞内纤维束沿长轴排列不明显,中层有细胞间隙变大的倾向;④结果说明,敲降ANLN对细胞的边缘区域影响最大,ANLN的缺失会导致细胞边缘区域更频繁的重构,细胞需要聚集更多的骨架蛋白及其结合蛋白来稳定细胞状态,导致了更高的表面弹性模量。

关键词： ANLN蛋白细胞铺展原子力显微镜力曲线表面弹性模量破膜力细胞骨架肌动蛋白纤维国家自然科学基金

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软基底介导细胞骨架蛋白与力学特性的改变

中国组织工程研究 2018年第22期22卷 3461-3466页

作者：侯添安美文王立太原理工大学力学学院山西省太原市030024

背景:前期研究发现在不同硬度基底上生长的细胞,细胞调控受基底硬度的影响,但抑制肌球蛋白的活性会阻碍基底硬度对细胞的调控作用,然而关于基底硬度对于肌球蛋白的影响及在这个过程中对于肌球蛋白的量化描述较少。目的:量化肌球蛋白Ⅱ... 详细信息

背景:前期研究发现在不同硬度基底上生长的细胞,细胞调控受基底硬度的影响,但抑制肌球蛋白的活性会阻碍基底硬度对细胞的调控作用,然而关于基底硬度对于肌球蛋白的影响及在这个过程中对于肌球蛋白的量化描述较少。目的:量化肌球蛋白Ⅱ分布及运动速率、肌动蛋白纤维分布与基底硬度的关系。方法:采用聚丙烯酰胺凝胶制备硬度分别为1,10,150 kPa的基底,将稳定表达转染荧光肌球蛋白Ⅱ的宫颈癌Hela细胞分别接种于不同硬度的基底上12 h,检测不同硬度基底上生长的宫颈癌细胞荧光肌球蛋白Ⅱ沿细胞长轴的荧光分布,利用荧光漂白恢复技术测定荧光肌球蛋白Ⅱ的运动速率,荧光染色观察肌动蛋白纤维的分布,利用微管吸吮技术测定单个宫颈癌细胞在铺展状态下的细胞膜弹性模量。结果与结论:(1)硬度为150 kPa基底上细胞的边缘荧光肌球蛋白Ⅱ强度显著高于其他部分;在1 kPa和10 kPa基底上生长的细胞,荧光肌球蛋白Ⅱ在边缘的分布呈现出一定回落现象;(2)硬度为150 kPa基底上细胞末端荧光肌球蛋白Ⅱ的恢复速率最大,显著快于1 kPa和10 kPa基底上细胞的恢复速率;(3)3种硬度基底上生长的细胞肌动蛋白纤维整体荧光强度近似;(4)硬度为150 kPa基底上Hela细胞细胞膜的弹性模量显著高于1 kPa和10 kPa基底上的细胞;(5)结果表明,基底硬度会明显改变肌球蛋白、肌动蛋白等重要细胞骨架蛋白区域性作用的效果,影响癌细胞在不同微环境下的细胞状态。

关键词：肌球蛋白类肌动蛋白类:弹性模量组织工程细胞骨架肌球蛋白肌动蛋白纤维细胞外基质聚丙烯酰胺凝胶基底硬度弹性模量人宫颈癌细胞生物材料

ROS介导棕榈酸诱导的肾小球足细胞骨架及裂孔隔膜损伤

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重庆医科大学学报 2019年第8期44卷 1024-1030页

作者：吴玥刘婷杜晓刚重庆医科大学附属第一医院肾内科

目的:探讨棕榈酸(palmitic acid,PA)对足细胞肌动蛋白纤维骨架及裂孔隔膜蛋白损伤的影响。方法:应用PA刺激体外培养的条件永生性小鼠肾小球足细胞株,分为对照组(1%BSA)和PA(150μmol/L)组。采用Alexa 549-phalloidin染色观察足细胞肌动... 详细信息

目的:探讨棕榈酸(palmitic acid,PA)对足细胞肌动蛋白纤维骨架及裂孔隔膜蛋白损伤的影响。方法:应用PA刺激体外培养的条件永生性小鼠肾小球足细胞株,分为对照组(1%BSA)和PA(150μmol/L)组。采用Alexa 549-phalloidin染色观察足细胞肌动蛋白纤维骨架的变化;免疫荧光染色法观察检测足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin和Podocin的表达;油红“O”、透射电镜以及BODIPY染色检测PA刺激下足细胞内脂质积聚情况。应用不同浓度PA刺激足细胞,分为对照组(1%BSA)、50μmol/L PA组、150μmol/L PA组、300μmol/L PA组。采用Western blot检测足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin和Podocin的表达。进一步应用氧自由基清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)预处理足细胞,分为对照组(1%BSA)、PA(150μmol/L)组、NAC组、PA(150μmol/L)+NAC组。采用DCFH-DA染色检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生;Alexa 549-phalloidin染色观察足细胞肌动蛋白纤维骨架的变化;Western blot检测足细胞裂孔隔膜蛋白Nephrin和Podocin的表达。结果:Western blot结果示300μmol/L PA组足细胞内Nephrin和Podocin的表达(0.360±0.030,0.900±0.040)分别与对照(Ctr)组(1.000±0.030,1.000±0.030)和50μmol/L PA组(0.912±0.020,0.900±0.040)相比都明显减少(P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.003)。免疫荧光显示与Ctr组相比,PA组足细胞Nephrin(t=6.014,P=0.010)和Podocin(t=6.171,P=0.010)蛋白的表达减少。使用NAC预处理足细胞清除ROS,与PA组(1.21±0.04,1.30±0.03)相比,PA+NAC组Nephrin(2.87±0.05)和Podocin(2.69±0.06)的表达减少(P=0.000,P=0.000)。结论:ROS介导了棕榈酸诱导的足细胞骨架及裂孔隔膜损伤。

关键词：棕榈酸足细胞肌动蛋白纤维裂孔隔膜蛋白活性氧

Anillin对细胞骨架蛋白和细胞力学特性的调节作用

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Anillin对细胞骨架蛋白和细胞力学特性的调节作用

作者：徐丽萌太原理工大学

学位级别：硕士

Anillin是细胞内一种重要的脚手架蛋白和调节因子,作用于细胞的整个周期,与肌动蛋白纤维(F-actin),肌球蛋白II,Rho A以及隔膜蛋白等多种蛋白相互连接、相互作用。细胞内的Anillin维持一个适当的平衡是必要的,Anillin过量表达会增加癌细... 详细信息

Anillin是细胞内一种重要的脚手架蛋白和调节因子,作用于细胞的整个周期,与肌动蛋白纤维(F-actin),肌球蛋白II,Rho A以及隔膜蛋白等多种蛋白相互连接、相互作用。细胞内的Anillin维持一个适当的平衡是必要的,Anillin过量表达会增加癌细胞的迁移能力或者导致局灶性节段性肾小球硬化,而太少或者不表达Anillin则会扰乱分裂细胞的收缩环和细胞膜的完整性。同时,细胞表面弹性模量等力学特性又是区别癌细胞的重要指标。因此,研究Anillin对细胞骨架蛋白和力学特性的调节作用,能够为癌症等病症的临床诊断与治疗提供有价值的参考。本文主要研究的是Anillin的缺失对细胞骨架蛋白和细胞力学特性的影响。使用RNA干扰技术筛选获得了Anillin RNA稳定敲降的Hela细胞株,并转入mCherry-肌球蛋白II A荧光蛋白。分别利用荧光漂白恢复(FRAP),线荧光强度分析等方法测定细胞内肌球蛋白IIA沿细胞长轴的分布和转运速率;荧光染色检测肌动蛋白纤维分布特征;采用原子力显微镜测定细胞不同位置的表面弹性模量和长轴边缘区域的破膜力。结果如下:(1)Anillin缺失会导致细胞内肌球蛋白II长轴末端分布减少,转运速率变慢;(2)肌动蛋白在细胞边缘聚集但无明显规则排列的肌动蛋白纤维,胞体中的肌动蛋白纤维无沿长轴分布的特征;(3)Anillin敲降细胞的表面弹性模量明显增大,但长轴边缘破膜力并无明显差别。本文的结果表明:Anillin主要通过作用于细胞边缘的骨架结构与分布对胞内进行区域性调节,这种结果对应着细胞表面弹性模量分布的特征,但是不显著影响破膜力。Anillin通过与骨架蛋白、细胞表面弹性模量共同作用影响着细胞-细胞相互作用、极性建立等生理活动。

关键词： Anillin 肌球蛋白II 肌动蛋白纤维细胞表面弹性模量破膜力