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肉苁蓉多糖对便秘型肠易激综合征大鼠的影响

中国药房 2023年第18期34卷 2208-2212页

作者：刘延忠贾新梅郭洪章王雪莲刘东升甘肃省药品监督管理局信息中心统计咨询科兰州730070 武威市中医医院药剂科甘肃武威733000 甘肃省中医院消化内科兰州730050 甘肃省药品监督管理局审核查验中心药品检查科兰州730070 甘肃省药品检验研究院中成药检验研究室兰州730070

目的探讨肉苁蓉多糖(简称CDPS)对便秘型肠易激综合征(IBS-C)大鼠的影响。方法将SD大鼠分为对照组(20只)和造模组。造模组大鼠灌胃0~4℃生理盐水2 mL(每天1次,连续14 d)诱导IBS-C模型。将造模成功的大鼠分为模型组、阳性对照组(枸橼酸莫... 详细信息

目的探讨肉苁蓉多糖(简称CDPS)对便秘型肠易激综合征(IBS-C)大鼠的影响。方法将SD大鼠分为对照组(20只)和造模组。造模组大鼠灌胃0~4℃生理盐水2 mL(每天1次,连续14 d)诱导IBS-C模型。将造模成功的大鼠分为模型组、阳性对照组(枸橼酸莫沙必利,1.35 mg/kg)和CDPS低、高剂量组(50、100 mg/kg),每组20只。各药物组大鼠灌胃相应药液,对照组和模型组大鼠灌胃等体积水,每次1次,持续28 d。检测各组大鼠的粪便含水量、血清5-羟色胺(5-HT)含量、炭末推进率,观察其结肠组织病理形态并检测结肠组织中神经生长因子(NGF)、原肌球蛋白受体激酶A(TrkA)mRNA及蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠的粪便含水量和炭末推进率均显著降低(P0.05)。结论CDPS可缓解IBS-C大鼠的症状,该作用可能与NGF/TrkA信号通路被抑制有关。

关键词：肉苁蓉多糖便秘型肠易激综合征神经生长因子/原肌球蛋白受体激酶A信号通路结肠组织

肉苁蓉多糖对D-半乳糖所致急性衰老模型保护作用研究

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中国药理学通报 2017年第7期33卷 927-933页

作者：武燕张弘布仁马慧苏苗李刚内蒙古医科大学药学院内蒙古呼和浩特010110

目的通过体内及体外研究肉苁蓉多糖(CDPS)对D-半乳糖所致急性衰老模型的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法(1)采用D-半乳糖建立急性衰老小鼠模型,采用Morris水迷宫实验,观察肉苁蓉多糖(25、50、100 mg·kg-1)对衰老所致小鼠学习记忆... 详细信息

目的通过体内及体外研究肉苁蓉多糖(CDPS)对D-半乳糖所致急性衰老模型的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法(1)采用D-半乳糖建立急性衰老小鼠模型,采用Morris水迷宫实验,观察肉苁蓉多糖(25、50、100 mg·kg-1)对衰老所致小鼠学习记忆能力障碍的影响。(2)建立了PC12细胞衰老体外模型,在给予肉苁蓉多糖(150、200 mg·L^(-1))后,采用Western blot检测核蛋白中p-CREB蛋白的表达水平变化。ELISA试剂盒检测环腺苷酸(cA MP)、cA MP依赖蛋白激酶(PKA)和脑源性神经营养因子(BDNF)的含量。此外,在PKA阻断剂H89存在的情况下,检测以上各项指标的变化。(3)建立基于UPLC/Q Exactive质谱检测神经递质谷氨酸、多巴胺和去甲肾上腺素的方法,检测肉苁蓉多糖对于PC12细胞以上神经递质分泌影响。结果(1)体内实验Morris水迷宫实验中,肉苁蓉多糖明显改善D-半乳糖所致衰老模型小鼠学习记忆能力;(2)体外实验中,CDPS给药组作用24h后,可以剂量依赖性地提高细胞核内p-CREB水平(P肉苁蓉多糖的这种升高作用。(3)体外实验中,肉苁蓉多糖促进PC12细胞神经递质多巴胺、去甲肾上腺素和谷氨酸分泌。结论肉苁蓉多糖对衰老模型小鼠的学习记忆能力具有明显的改善作用,其机制可能与上调cA MP/PKA/CREB/BDNF信号通路,适度提高兴奋性神经递质有关。

关键词：肉苁蓉多糖 cAMP/PKA/CREB BDNF 神经递质抗衰老 D-半乳糖

离子色谱−积分脉冲安培法测定肉苁蓉多糖的单糖组成及游离单糖含量

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药学学报 2023年第8期58卷 2476-2482页

作者：许玮仪姜振邦范晶金红宇马双成中国食品药品检定研究院北京102629 赛默飞世尔科技(中国)有限公司上海201206

肉苁蓉多糖和游离态单糖是肉苁蓉中的重要活性成分,具有抗衰老、免疫活性调节等作用。多糖的单糖组成和游离态单糖研究可以为肉苁蓉多糖一级结构、空间结构及肉苁蓉生物活性的研究奠定基础。本研究采用水提醇沉法提取肉苁蓉多糖,多糖水... 详细信息

肉苁蓉多糖和游离态单糖是肉苁蓉中的重要活性成分,具有抗衰老、免疫活性调节等作用。多糖的单糖组成和游离态单糖研究可以为肉苁蓉多糖一级结构、空间结构及肉苁蓉生物活性的研究奠定基础。本研究采用水提醇沉法提取肉苁蓉多糖,多糖水解选取三氟乙酸作为水解酸,建立正交实验考察三氟乙酸浓度、温度、水解时间对多糖裂解的影响,确定最佳水解条件:0.08 mol·L^(-1)三氟乙酸在100℃水解3 h;采用水提法提取肉苁蓉游离态单糖。建立的离子色谱−积分脉冲安培法可在短时间内高效分离11种单糖,方法重复性好,灵敏度高,方法学结果符合定量测定要求,可准确测定肉苁蓉多糖的单糖组成及游离单糖含量。离子色谱法不需要衍生化操作,前处理步骤简单,填补了PMP衍生-HPLC法无法测定果糖的缺陷。肉苁蓉多糖的单糖组成有岩藻糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、果糖、核糖、葡萄糖醛酸,其中葡萄糖、果糖含量相对较高;肉苁蓉水提液中游离态单糖有葡萄糖、果糖、甘露糖。

关键词：离子色谱−积分脉冲安培肉苁蓉单糖组成肉苁蓉多糖游离单糖

肉苁蓉多糖对Aβ_(25-35)所致PC12细胞损伤BDNF基因表观遗传的调控作用

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中国新药杂志 2018年第12期27卷 1393-1400页

作者：武燕刘丹丹马子兴苗鑫张晓菲李刚内蒙古医科大学药学院呼和浩特010110 中国医学科学院/北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京100050

目的:探讨肉苁蓉多糖(CDPS)对Aβ_(25-35)诱导的大鼠肾上腺嗜络瘤细胞(PC12)损伤BDNF基因表观遗传的调控作用,分析组蛋白乙酰化对BDNF基因转录的影响。方法:采用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤建立阿尔茨海默病(AD)体外模型,在给予阳性药... 详细信息

目的:探讨肉苁蓉多糖(CDPS)对Aβ_(25-35)诱导的大鼠肾上腺嗜络瘤细胞(PC12)损伤BDNF基因表观遗传的调控作用,分析组蛋白乙酰化对BDNF基因转录的影响。方法:采用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤建立阿尔茨海默病(AD)体外模型,在给予阳性药人参皂苷Rd(GSrd)、CDPS高、低浓度后,流式细胞术检测细胞凋亡情况;Hoechst33258染色观察细胞形态的变化。ELISA法检测组蛋白乙酰化酶(HATs)、组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)和BDNF的含量变化。Western Blotting检测P300和HDAC2的表达水平变化。染色质免疫共沉淀(CHIP)检测BDNF exonⅣ组蛋白H3乙酰化水平的变化和HDAC2含量变化。结果:20μmol·L^(-1)Aβ_(25-35)暴露PC12细胞48 h后成功建立AD细胞凋亡模型。GSrd组、CDPS高、低浓度作用48 h后,HATs表达增加(P<0.05),HDAC2表达下降(P<0.05),BDNF水平提高(P<0.05),并且有剂量依赖性。Ch IP分析证实Aβ_(25-35)诱导PC12细胞后BDNF基因exonⅣ组蛋白H3乙酰化水平明显下降,且降低呈HDAC2依赖性;给药48 h后,BDNF基因exonⅣ组蛋白H3乙酰化水平显著升高,HDAC2水平显著降低。结论:CDPS可能通过重建Ac-H3和HDAC2之间的平衡,抑制HDAC2的表达来活化BDNF基因转录从而起到保护PC12细胞、刺激PC12细胞再生的作用。

关键词：肉苁蓉多糖 PC12细胞组蛋白乙酰化酶2 组蛋白H3

肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的干预作用

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时珍国医国药 2019年第2期30卷 275-277页

作者：姚金茜王学敏鞠静潘宇政广西医科大学第一附属医院广西南宁530021

目的探讨肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的影响。方法 54只SD大鼠随机分为正常组、模型组、肉苁蓉多糖组。除正常组外,其他组建立气管切开插管留置大鼠模型。造模6小时后肉苁蓉多糖组用肉苁蓉多糖灌胃,正常组和模型组予... 详细信息

目的探讨肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的影响。方法 54只SD大鼠随机分为正常组、模型组、肉苁蓉多糖组。除正常组外,其他组建立气管切开插管留置大鼠模型。造模6小时后肉苁蓉多糖组用肉苁蓉多糖灌胃,正常组和模型组予等量生理盐水灌胃,均每日1次。造模后第24小时、72小时、168小时三个时段取材,并检测大鼠肺组织β-防御素-2(rBD2) mRNA表达、肺泡灌洗液分泌性免疫球蛋白A(sIgA)及外周血IL-2、IL-6的含量。结果 (1)与正常组比较,模型组大鼠rBD2 mRNA表达在气管切开插管留置第24小时明显升高,随后明显下降,第168小时降到最低点(P肉苁蓉多糖组大鼠rBD2 mRNA表达在第24小时降低,第72小时、168小时明显升高(P肉苁蓉多糖组大鼠sIgA含量在第72及168小时明显升高(P0.05)。与模型组比较,肉苁蓉多糖组大鼠IL-2含量在第24小时即明显升高,第72小时继续升高,在第168小时达到高峰。(4)与正常组比较,模型组大鼠IL-6含量在第24小时出现明显升高(P0.05)。与模型组比较,肉苁蓉多糖用药大鼠外周血IL-6水平在第24小时即显著降低,随后逐渐降低,至第168小时达最低值(P肉苁蓉多糖能够改善气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能。

关键词：肉苁蓉多糖气管切开插管肺部免疫功能 β-防御素-2

肉苁蓉多糖通过Shh通路缓解EAE小鼠的临床症状

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中国神经免疫学和神经病学杂志 2020年第1期27卷 52-56,60页

作者：房东东刘敏敏刘海峰李学军段崇浩济南市人民医院重症监护室 271100 济南市人民医院心胸外科 271100

目的探讨音猬因子(Sonic hedgehog,Shh)通路在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠发病过程中的作用,及肉苁蓉多糖(cistanche deserticola polysaccharide,CDPS)能否通过该通路缓解EAE小鼠临床症状。方法给予C57BL/6小鼠皮下注射髓鞘少突细胞糖蛋白35-55多肽(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG35-55)抗原制备EAE动物模型。将60只小鼠随机分为正常对照组、EAE模型组、CDPS治疗组以及CDPS+Smo受体阻断剂环王巴明(cyc)治疗组(以下简称CDPS+cyc治疗组)4组,每组各15只。观察各组小鼠免疫注射后0~26d的临床症状评分,采用勒克斯光蓝染色(Luxol Fast Blue,LFB)检测各组小鼠脊髓组织内髓鞘脱失情况,Western blot法检测脊髓组织内Shh、碎片蛋白-1(Patched-1,Ptc-1)蛋白表达,采用RT-PCR检测脊髓组织内平滑蛋白(Smoothened,Smo)mRNA、神经胶质瘤相关癌基因1(Glioma-associated oncogene-1,Gli1)mRNA表达。结果自CDPS治疗第9天开始,CDPS治疗组小鼠临床症状评分低于EAE模型组(P0.05)。EAE模型组小鼠脊髓组织内Shh、Ptc-1蛋白以及Smo mRNA、Gli1mRNA表达水平较正常组升高(均P<0.01),经CDPS治疗后,上述因子表达进一步升高(均P<0.01),而经cyc干预后,上述因子表达较CDPS治疗组降低(均P<0.01)。结论 CDPS对EAE小鼠临床症状有改善作用,其作用途径可能与Shh信号通路有关。

关键词：肉苁蓉多糖脑脊髓炎,自身免疫性,实验性 Shh通路神经保护

肉苁蓉多糖对东莨菪碱所致学习记忆障碍模型小鼠在突触可塑性方面的保护作用

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中国药理学通报 2014年第6期30卷 801-807页

作者：尹若熙李刚俞腾飞马慧马天宇郭敏内蒙古医科大学药学院内蒙古呼和浩特010110

目的研究肉苁蓉多糖(CDPS)对东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠在突触可塑性方面的改善作用。方法昆明小鼠随机分为6组,分别为东莨菪碱模型组、正常对照组、CDPS小剂量(25 mg·kg-1)组、CDPS中剂量(50 mg·kg-1)组、CDPS大剂量(100 mg·kg-1... 详细信息

目的研究肉苁蓉多糖(CDPS)对东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠在突触可塑性方面的改善作用。方法昆明小鼠随机分为6组,分别为东莨菪碱模型组、正常对照组、CDPS小剂量(25 mg·kg-1)组、CDPS中剂量(50 mg·kg-1)组、CDPS大剂量(100 mg·kg-1)组和阳性对照组。除正常对照组外,其他组小鼠口服给CDPS 6周,并于Morris水迷宫训练第4天前腹腔注射东莨菪碱4mg·kg-1,30 min后进行行为学指标测定,包括Morris水迷宫和跳台试验。处死取脑海马组织,运用Western blot技术及RT-PCR比较小鼠海马区GAP-43,SYP以及PSD-95的蛋白水平及基因水平的表达差异,并用透射电镜观察海马CA3区突触数量与相关结构的变化。结果 CDPS(25、50、100 mg·kg-1)组小鼠与正常对照组小鼠在水迷宫实验的潜伏期明显短于模型组小鼠,而且在Q3象限的时间明显大于模型组小鼠。CDPS(50、100mg·kg-1)组小鼠跳台实验中的错误次数与模型组小鼠相比减少。Western blot与RT-PCR实验结果显示,模型组小鼠海马区GAP-43、SYP的表达水平与正常对照组比较明显降低。CDPS(25、50、100 mg·kg-1)组小鼠海马区SYP的表达较模型组明显增高,CDPS(25、50 mg·kg-1)组小鼠海马区GAP-43的表达水平较模型组明显增高,PSD-95的表达在不同组中没有明显变化。最后,我们观察小鼠海马CA3区的超薄切片发现,CDPS可以使CA3区突触数量增多。结论东莨菪碱可以造成小鼠学习记忆障碍模型,并使小鼠海马区相关蛋白表达异常,由此引起突触可塑性的变化,进而导致学习记忆能力的改变。而CDPS能够提高SYP与GAP-43的表达,增多突触数量,使突触可塑性有所恢复,并且改善小鼠的学习记忆能力。

关键词：肉苁蓉多糖突触可塑性学习记忆 GAP-43 PSD-95

肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰小鼠脑神经细胞的保护作用及机制

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中国老年学杂志 2018年第19期38卷 4732-4734页

作者：蔡克瑞刘志新孙晓冬闫磊牡丹江医学院组胚教研室黑龙江牡丹江157011

目的探讨肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰老小鼠脑神经细胞的保护作用及其机制。方法建立D-半乳糖致衰小鼠模型,观察肉苁蓉多糖对脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、神经细胞凋亡及DNA损伤和... 详细信息

目的探讨肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰老小鼠脑神经细胞的保护作用及其机制。方法建立D-半乳糖致衰小鼠模型,观察肉苁蓉多糖对脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、神经细胞凋亡及DNA损伤和凋亡相关基因Bcl-2的表达情况。结果衰老小鼠脑神经细胞MDA含量、DNA损伤率和细胞凋亡率明显增加(P肉苁蓉多糖可提高SOD活性、GSH-Px活力,降低MDA含量,增强神经细胞DNA损伤的修复能力,减少凋亡细胞数,增加Bcl-2基因表达。结论肉苁蓉多糖对D-半乳糖致衰小鼠脑神经细胞具有保护作用。

关键词：肉苁蓉多糖凋亡 Bcl-2

肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的影响

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肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的影响

作者：姚金茜广西医科大学

学位级别：硕士

目的:通过观察肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠β防御素2、sIGA、IL-2、IL-6、T细胞亚群表达的影响,探讨肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的影响。方法:(1)将54只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、气管切开插管留置模... 详细信息

目的:通过观察肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠β防御素2、sIGA、IL-2、IL-6、T细胞亚群表达的影响,探讨肉苁蓉多糖对气管切开插管留置大鼠肺部免疫功能的影响。方法:(1)将54只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组、气管切开插管留置模型非用药组、气管切开插管留置肉苁蓉多糖用药组,各组分别占用18只。按照造模后第1、3、7天再分为三个亚组,每个时间点6只。(2)除空白对照组外,其余各组建立气管切开插管留置大鼠模型。造模成功后6h,空白对照组和气管切开插管留置模型非用药组给予等量生理盐水灌胃,气管切开插管留置肉苁蓉多糖用药组给予肉苁蓉多糖水溶液灌胃,均每日一次,每次3ml。(3)于造模后第24h、72h、168h三个时段,各取6只大鼠进行麻醉后取材,高倍光镜下观察肺组织的病理学结构改变;检测大鼠肺组织β-防御素-2(rBD2)mRNA表达、肺泡灌洗液分泌性免疫球蛋白A(sIgA)的水平、外周血IL-2、IL-6的含量及T细胞亚群CD3、CD4、CD8的占比。结果:(1)气管切开插管留置大鼠模型的制备:空白对照组大鼠精神状态良好,呼吸平顺无异常声响,皮毛顺滑色泽光亮,饮水进食自由正常,体重呈正常幅度增长。气管切开插管留置模型非用药组大鼠精神状态异常,对外界声响易产生过激应答,存在异常警觉、过度敏感状况。口鼻分泌物多,呼吸频率加快深度变浅,可有不规则呼吸,时伴有痰鸣。出现不同程度抓挠脸颊、挣脱插管、坐卧不安、大声喘息、呼吸急促等,并随着时间推移而恶化。皮毛无色泽,甚或毛发竖立,弓背滞伏,懒于活动。进食、饮水量减少。气管切开插管留置模型肉苁蓉多糖用药组大鼠精神尚可,其余症状较非用药组程度轻,且随着时间推移上述症状改善更明显。(2)各组肺部组织病理学改变:在高倍光镜下观察肺组织,空白对照组大鼠肺组织结构完整无病理改变;气管切开插管留置模型非用药组大鼠肺组织呈现肺泡壁损失,肺泡内、支气管内炎症细胞浸润,细胞内及组织间隙出血等病理性改变,且随着时间延长,肺泡壁出现重度增厚,极大量中性粒细胞浸润,支气管壁重度乳头状突出,支气管内大量炎性细胞浸润;与模型非用药组比较,气管切开插管留置模型肉苁蓉多糖用药组肺组织病变及炎性细胞浸润现象均呈明显好转,程度不同,随着时间延长逐渐改善。(3)各组肺组织中rBD2 mRNA表达:空白对照组大鼠肺组织中rBD2mRNA相对表达量在3个时间段表达无统计学差异。与空白对照组比较,气管切开插管留置模型组大鼠肺组织中rBD2表达量第24h表达明显升高,随后下降,在第72h表达明显降低,随着时间推移,逐渐加剧降低程度,在第168h下降到最低值(P肉苁蓉多糖用药组表达量在第24h出现下降,随后逐渐上升,至第168h达到最高值且高于空白对照组(P均=0.000)。(4)各组肺泡灌洗液中sIgA水平:空白对照组大鼠3个时间段比较均P>0.05。与空白对照组比较,气管切开插管留置模型非用药组大鼠肺泡灌洗液中sIgA含量在第24h明显高于空白对照组大鼠,在第72h开始下降,第168h则明显回落。气管切开插管留置模型肉苁蓉多糖用药组大鼠肺泡灌洗液中sIgA含量在第24h即明显上升,至第72h达到最高值,在第168h仍持续高于空白对照组及模型组。(5)各组外周血中IL-2、IL-6含量:空白对照组大鼠外周血中IL-2、IL-6含量在3个时间段表达无差异。与空白对照组比较,气管切开插管留置模型非用药组大鼠外周血中IL-2含量第72h反应性短暂升高,其余时段无明显改变(P>0.05)。而IL-6表达量第24h即明显升高(P肉苁蓉多糖药物干预后,气管切开插管留置大鼠外周血中IL-2含量在第24h即明显升高,提高程度与用药时间呈正比,且远高于空白对照组(P肉苁蓉多糖用药组在第24h下降,在第72h迅速恢复至空白对照组大鼠水平,至第168h继续回升(P=0.000肉苁蓉多糖用药组在第72h明显升高,随着时间推移和延伸程度逐渐明显,在第168h表达升高达到最高值。CD8占比在空白对照组与气管切开插管留置模型非用药组比较时没有差异,空白对照组在3个时间段也没有差异。气管切开插管留置模型非用药组CD8占比于第72h呈现

关键词：肉苁蓉多糖气管切开插管肺部免疫功能 β-防御素-2 T细胞亚群 sIGA