检索结果-南通市图书馆

国际眼科纵览 2009年第3期33卷 166-169页

作者：宋森吕岚首都医科大学附属北京同仁医院眼科中心 100730

角膜缘干细胞是角膜上皮更新和修复的来源，眼表正常结构和功能的维持有赖于角膜缘干细胞的不断分化、增殖、移行来完成。近年来，对角膜缘干细胞的定位与鉴别也有了进一步发展，大量证据显示角膜缘干细胞位于角膜缘区域的微生境（nich... 详细信息

角膜缘干细胞是角膜上皮更新和修复的来源，眼表正常结构和功能的维持有赖于角膜缘干细胞的不断分化、增殖、移行来完成。近年来，对角膜缘干细胞的定位与鉴别也有了进一步发展，大量证据显示角膜缘干细胞位于角膜缘区域的微生境（niche）内，对微生境进行角膜缘相关标记物的研究也发现其区域内大量细胞高表达干细胞的相关标记。然而，到目前为止任何一种单独的标记物均不能特异性地鉴别角膜缘干细胞，而较可靠的方法是标记物的联合应用，或联合角膜缘干细胞自身的一些特征如小细胞特性、慢细胞周期特性等来进行鉴别。本文就角膜缘干细胞的鉴别以及联合标记在干细胞鉴别中的应用作一综述。

关键词：角膜缘干细胞微生境联合标记

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明清时期联合结构的分析——以“以及”“及其”等为标记的联合结构为例

明清时期联合结构的分析——以“以及”“及其”等为标记的联合结...

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作者：张婷上海外国语大学

学位级别：硕士

从古至今,联合结构一直是汉语中使用频率很高的一种结构,但是学术界缺乏对古代汉语和近代汉语联合结构的系统研究。明清时期叙事体文本中的语言有文白兼容的特点。此外,近代汉语的词汇化和双音节化的发展趋势使得明清时期的联合结构开... 详细信息

从古至今,联合结构一直是汉语中使用频率很高的一种结构,但是学术界缺乏对古代汉语和近代汉语联合结构的系统研究。明清时期叙事体文本中的语言有文白兼容的特点。此外,近代汉语的词汇化和双音节化的发展趋势使得明清时期的联合结构开始频繁使用双音节联合标记。综合以上两方面原因,本文以“北京大学中国语言学研究中心语料库”“北京语言大学BCC汉语语料库”和“国家语委语料库”中的语料为基础,系统地描写和分析明清时期以“以及”“及其”“还是”“或者”“并且”“而且”和“况且”七个双音节词语为标记的联合结构,对联合结构进行断代研究,希望为汉语史的研究提供一些资料。本文主体部分分为六章:第一章绪论。简要论述本文的选题缘由、研究对象、研究目的、研究现状、研究方法、理论基础和语料来源。第二章明清时期联合结构的句法分析。重点描写七个联合标记连接的联合项语法单位的组合情况和七类联合结构的句法功能,着重考察联合结构的否定表达模式和疑问表达模式。第三章明清时期联合结构的量化分析。本章将对联合结构中联合项语法单位的组合形式、联合结构的句法功能和联合标记的分布情况作细致地量化分析。第四章明清时期联合标记的语义分析。重点分析明清时期“以及”“及其”“还是”“或者”“并且”“而且”和“况且”各自的语义,再对比分析明清时期和现代汉语词典中七个联合标记的语义差异。第五章明清时期联合标记的位置和隐现分析。本章将归纳出联合标记的位置规律和隐现规律。第六章结语。

关键词：明清时期联合结构联合标记句法语义

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烟草中PIP和SSR标记的开发及其应用的研究

烟草中PIP和SSR标记的开发及其应用的研究

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作者：黄莉莎山东农业大学

学位级别：硕士

普通烟草(Nicotiana tabacum L)主栽品种的遗传背景狭窄，形态学上相似程度高，迫切需要从分子水平上鉴定。本研究利用烟草公共序列数据和已经拼接好的烟草EST数据，通过生物信息学方法，在烟草中设计了大量的PIP和SSR标记，并合成其中... 详细信息

普通烟草(Nicotiana tabacum L)主栽品种的遗传背景狭窄，形态学上相似程度高，迫切需要从分子水平上鉴定。本研究利用烟草公共序列数据和已经拼接好的烟草EST数据，通过生物信息学方法，在烟草中设计了大量的PIP和SSR标记，并合成其中部分引物进行遗传多样性分析，以及建立烟草主栽品种指纹图谱，获得以下结果：1、开发了12,388个PIP分子标记和76,848个SSR分子标记。将这些分子标记的信息都已经上传到数据库网站(http://***/tgb/)上供免费下载。2、e-PCR结果表明，PIP和SSR标记广泛分部在整个烟草基因组上，两种标记交叉重叠率为1.68%，98.32%均匀分布在其基因组上。其中每10kb出现的频率PIP标记是3.07对，SSR标记是1.72对。3、从数据库中，分别随机挑选22对PIP和SSR标记对64份烟草种质资源进行遗传多样性分析，PIP和SSR标记分别检测到153个和166个等位位点，两种标记扩增产物平均长度分别为159.1bp和498bp。SSR标记的PIC值平均为0.656，高于PIP标记(0.540)。对于扩增到的稀有位点数(出现频率小于0.05)PIP和SSR标记扩增数量相差不多，分别为0.32个和0.35个。但出现频率小于0.01的稀有位点数，PIP标记平均每个位点分别扩增到2.0个位点明显多于SSR标记的0.7个。4、聚类结果表明，由于PIP标记在普通烟草种内遗传相似系数高，不能很好的区分种内材料，而SSR在普通烟草种内多态性较高，弥补了PIP标记的不足。但是，SSR标记过高的多态性不适合种间的分类，而PIP标记跨物种的保守性相对SSR标记要高，适合种间的聚类分析。故两种标记联合使用可充分发挥各自的优点。5、从62对候选SSR引物中筛选出21对多态性高、稳定性好的引物作为核心引物，构建9份烟草主栽品种DNA指纹图谱;共扩增出125个基因位点;各个品种之间遗传相似系数变化范围为0.507～0.916，平均为0.726。聚类结果显示，同一来源育成的品种聚在一类，说明它们的遗传关系较近。引物鉴别能力PIC值的变化范围0.37～0.86，平均值为0.67，其中9对引物在5个品种中具有特征带型。用4对引物进行组合鉴定可将9个烟草品种完全区分开，这些标记在烟草品种纯度鉴定中，具有良好的应用前景。

关键词：烟草 PIP SSR DNA指纹图谱联合标记

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不结球白菜种质资源遗传多样性的初步研究

不结球白菜种质资源遗传多样性的初步研究

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作者：马金骏扬州大学

学位级别：硕士

不结球白菜(Brassic campestris L. ssp. Chinensis(L.) Makino)原产中国,属十字花科芸薹属芸薹种白菜亚种蔬菜,是一种重要的叶菜类蔬菜。不结球白菜种质资源极其丰富,不仅数量多,而且类型复杂。然而随着生产中少数高产品种的大面积栽培... 详细信息

不结球白菜(Brassic campestris L. ssp. Chinensis(L.) Makino)原产中国,属十字花科芸薹属芸薹种白菜亚种蔬菜,是一种重要的叶菜类蔬菜。不结球白菜种质资源极其丰富,不仅数量多,而且类型复杂。然而随着生产中少数高产品种的大面积栽培,使许多地方品种和农家品种被淘汰,品种单一化和遗传脆弱化日趋严重。利用分子标记进行不结球白菜资源鉴定和分类对不结球白菜种质创新和新品种选育具有重要意义。为进一步挖掘不结球白菜遗传潜力,拓宽遗传基础,充分利用种质资源,本研究从分子水平分析了不结球白菜资源的遗传多样性。通过单因素试验和正交试验相结合成功设计并优化了不结球白菜的ISSR和SRAP技术体系。利用ISSR、RAPD和SRAP三种标记技术对96份不结球白菜资源进行了遗传多样性分析,采用Jaccard方法计算出遗传相似系数矩阵,以UPGMA法对96份不结球白菜资源进行了聚类分析,并分析了不结球白菜种群间的遗传分化。利用ISSR、RAPD和SRAP技术对2个不结球白菜组合的双亲和F1进行了引物筛选,初步建立了应用于不结球白菜亲本及其F1的指纹图谱。研究主要结果如下:1.通过单因素试验确定了Taq DNA聚合酶、dNTP、引物和Mg2+ 4种因素在不结球白菜ISSR、SRAP反应体系中的适宜浓度范围,并在此基础上利用正交试验设计,从4种因素3个水平对不结球白菜ISSR、SRAP反应体系进行了优化,确立了适合不结球白菜的ISSR、SRAP反应体系。在20μL的ISSR反应体系中,含Taq DNA聚合酶1U、dNTP 0.25mmol/L、引物0.25μmol/L、1×PCR buffer、Mg2+2.5mmol/L、模板DNA30ng。在20μl的SRAP反应体系中,含Taq DNA聚合酶1U、dNTP 0.15mmol/L、正向引物0.35μmol/L、反向引物0.35μmol/L、Mg2+ 3.5mmol/L。通过梯度PCR测验和总循环次数梯度处理,确定了适宜的ISSR反应总循环数和ISSR引物UBC822的退火温度。使用优化后的反应体系能够对7种主要的芸薹属作物进行有效的鉴别。优化体系的建立为今后利用ISSR、SRAP技术进行不结球白菜种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础。2.利用ISSR、RAPD和SRAP三种标记对96份不结球白菜资源的DNA遗传多样性进行了分析。结果表明,SRAP在三种标记中多态性最高,RAPD次之,ISSR较低,11个SRAP引物组合、14条RAPD引物和15条ISSR引物分别检测出346、98和185个位点,其中多态性位点分别为293、71和127个,PPB分别达84.68%、72.45%和68.65%;不结球白菜各类型中以普通白菜的Shannon信息指数最高,其中又以秋冬栽培类型最高,是遗传多样性最丰富的类型。聚类结果显示,各变种类型不能被明显地分开,在RAPD标记聚类结果中尤为明显。总体上菜薹资源与普通白菜遗传距离较近,而普通白菜中的香青菜比较特殊,多数聚类到一起并同其它普通白菜区分开;对不结球白菜种群遗传多样性的分析显示,不结球白菜的遗传分化系数较低,大部分变异主要存在于种群内,标记检测出不结球白菜种群间的基因流平均水平较高,说明群体间基因交流较多,种群间遗传分化程度相对较低;另外分析还发现联合使用多种标记可有效提高对资源多样性研究的准确性。三种标记的研究结论在起到相互验证的同时,还存在互补的作用。Mantel-test检测结果也显示,三种标记检测结果间的相关性较低,说明它们分别从不同的角度反映了不结球白菜的遗传背景,综合三种标记的检测结果对不结球白菜的遗传多样性进行分析,可以更真实地反映资源间的亲缘关系,更准确全面地分析资源的遗传多样性。本研究中联合标记的使用已显示出优越性,在资源聚类分析中效果更为明显,联合标记的聚类结果比单个标记的聚类结果更有规律。试验中发现了6个资源的9个特异标记,通过对特异片段的克隆测序,成功转化一个特异标记(UBC834-206)为SCAR标记(SU834),可以快速、特异鉴别该资源。3.利用RAPD、ISSR和SRAP三种标记技术,对由双亲及其F1组成的两个组合进行分析。结果表明有3个RAPD引物、3个ISSR引物和3对SRAP引物可扩增出“新夏青2号”双亲的互补特征带,将其双亲和F1区分出来;对“新绿”的引物筛选结果表明,有3个ISSR引物和2对SRAP引物可扩增出双亲的互补特征带,将双亲和F1区分出来。从而建立了由RAPD、ISSR和SRAP三种标记技术组成的鉴定亲本及其杂种的分子指纹图谱,并转化为数字指纹图谱,为种子纯度的鉴定开辟了新的技术途径,为新品种知识产权的保护提供了重要手段。

关键词：不结球白菜遗传多样性聚类分析联合标记指纹图谱数字指纹

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