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南方医科大学学报 2021年第5期41卷 657-663页

作者：朱晨露杜家如姚言雪武丹丹苑敏干露童旭辉蚌埠医学院药学院安徽蚌埠233030

目的观察顺铂作用后,耐顺铂睾丸癌Ⅰ-10/DDP细胞自噬水平的变化;探讨沉默ATG5、ATG7对顺铂作用后的自噬及细胞增殖的影响。方法顺铂(15μmol/L,12 h)作用Ⅰ-10/DDP细胞后,免疫印迹法检测LC3、p62的表达水平;透射电子显微镜和mCherry-GFP... 详细信息

目的观察顺铂作用后,耐顺铂睾丸癌Ⅰ-10/DDP细胞自噬水平的变化;探讨沉默ATG5、ATG7对顺铂作用后的自噬及细胞增殖的影响。方法顺铂(15μmol/L,12 h)作用Ⅰ-10/DDP细胞后,免疫印迹法检测LC3、p62的表达水平;透射电子显微镜和mCherry-GFP-LC3B双标法检测自噬水平。实验分为转染试剂对照组(Mork组)、阴性对照质粒组(NC组)、转染shRNA-ATG5质粒组(shRNA-ATG5组)、转染shRNA-ATG7质粒组(shRNA-ATG7组),免疫印迹法检测ATG5、ATG7的表达。顺铂(15μmol/L,12 h)作用转染组细胞后,免疫印迹法检测LC3、p62的表达;透射电子显微镜、mCherry-GFP-LC3B双标法检测自噬水平;MTT法检测细胞存活率;集落克隆实验检测细胞增殖情况。结果顺铂处理后,Ⅰ-10/DDP细胞中LC3Ⅱ的表达水平明显增加(P=0.001),p62的表达水平降低(P=0.01),自噬体数量增加。与NC组相比,shRNA-ATG5组、shRNA-ATG5组中ATG5、ATG7的表达量明显降低(P=0.005,P顺铂组相比,shRNA-ATG5组与shRNA-ATG7组细胞用顺铂处理后LC3Ⅱ表达水平明显降低(P细胞存活率(P顺铂介导的自噬,增强顺铂抑制细胞增殖的作用。

关键词：顺铂 ATG5 ATG7 自噬耐顺铂睾丸癌细胞

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