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64株大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药表型与钝化酶基因型的分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2005年第9期25卷 727-732页

作者：姚蕾陈琼胡昌勤金少鸿中国药品生物制品检定所抗生素室国家细菌耐药性检测中心北京100050 中国药品生物制品检定所菌种室北京100050

目的调查2004年北京地区临床收集的耐庆大霉素大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的敏感性和氨基糖苷类钝化酶基因的流行状况。方法采用微量肉汤稀释法检测64株大肠埃希菌对16种氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)值;利用巢式PCR方法对其... 详细信息

目的调查2004年北京地区临床收集的耐庆大霉素大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的敏感性和氨基糖苷类钝化酶基因的流行状况。方法采用微量肉汤稀释法检测64株大肠埃希菌对16种氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)值;利用巢式PCR方法对其可能含有的7种氨基糖苷类钝化酶基因进行检测和确证。结果临床大肠埃希菌的耐药表型较为复杂,与钝化酶基因表达有关。测试菌株中存在aac(3)-Ⅱc、aac(6′)-Ⅰb、ant(2″)-Ⅰa和ant(3″)-Ⅰa4种耐药基因,aac(3)-Ⅱc和aac(6′)-Ⅰb是主要的产酶基因。约40%的耐药菌中存在2种或2种以上的钝化酶基因。结论产生氨基糖苷类钝化酶是临床分离的大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素主要的耐药机制。采用巢式PCR方法检测耐药基因,特别是在缺少阳性对照菌株的情况下,可以保障检测结果的特异性和准确性。临床菌的耐药表型和钝化酶基因关系较为复杂,这可能与耐药菌中尚存在其他耐药基因有关。

关键词：大肠埃希菌氨基糖苷类抗生素钝化酶氨基糖苷类抗生素钝化酶基因大肠埃希菌耐药表型最低抑菌浓度(MIC) 巢式PCR方法基因型微量肉汤稀释法临床分离

2011-2019年33株人源非O157产志贺毒素大肠埃希菌耐药表型及耐药相关基因分析

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中华预防医学杂志 2021年第3期55卷 365-370页

作者：潘衍宇杨茜曹丽娇刘倩熊衍文中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206

目的了解人源非O157产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)抗生素耐药表型及耐药基因携带状况。方法33株非O157 STEC菌株来自2011-2019年7个省份,包括青海、黑龙江(各1例),广西、山东(各2例),广东(4例),河南(11例),上海(12例),均分离自感染性腹泻... 详细信息

目的了解人源非O157产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)抗生素耐药表型及耐药基因携带状况。方法33株非O157 STEC菌株来自2011-2019年7个省份,包括青海、黑龙江(各1例),广西、山东(各2例),广东(4例),河南(11例),上海(12例),均分离自感染性腹泻患者粪便标本。采用改良微量肉汤法对非O157 STEC进行19种抗生素最小抑菌浓度(MIC)检测;通过全基因组测序进行O∶H血清分型、多位点序列分型(MLST)及耐药相关基因预测。结果33株非O157 STEC分为19种O∶H血清型、17种MLST序列型;10株菌对1种或以上抗生素耐药,5株为多重耐药菌株,对四环素耐药率最高(30.3%,10株),并检出阿奇霉素耐药菌株(12.1%,4株),但所有菌株均对碳青霉烯类药物敏感;共检出22种耐药基因,全部菌株均携带blaEC基因,并检出超广谱β-内酰胺酶(ESBL)基因型blaCTX-M-15(3.0%,1株),首次检出fosA7基因。结论中国7省份33株人源非O157 STEC中存在多重耐药和阿奇霉素耐药菌株,且携带多种耐药基因型,但均对碳青霉烯类药物敏感。

关键词：大肠埃希菌志贺毒素耐药表型超广谱β-内酰胺酶

酿脓链球菌对大环内酯类抗菌药物耐药表型与基因型研究

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中国抗生素杂志 2007年第4期32卷 232-235页

作者：肖永红刘健王哲李耘北京大学第一医院临床药理研究所北京100083

目的研究酿脓链球菌对大环内酯类抗菌药物的耐药表型与基因型。方法采用琼脂平板稀释法测定97株酿脓链球菌对红霉素、克林霉素、麦迪霉素、阿奇霉素、克拉霉素和青霉素的敏感性;用双纸片法检测酿脓链球菌耐药表型;用PCR方法检测耐大环... 详细信息

目的研究酿脓链球菌对大环内酯类抗菌药物的耐药表型与基因型。方法采用琼脂平板稀释法测定97株酿脓链球菌对红霉素、克林霉素、麦迪霉素、阿奇霉素、克拉霉素和青霉素的敏感性;用双纸片法检测酿脓链球菌耐药表型;用PCR方法检测耐大环内酯的酿脓链球菌携带的耐药基因。结果97株酿脓链球菌中82株表现为对大环内酯类抗菌药物不敏感,其中42株表现为cMLS型耐药,37株为iMLS型耐药,3株细菌为主动外排M型耐药;82株对大环内酯不敏感的酿脓链球菌中77株检测到耐药基因,其中12株具有ermB基因,25株具有ermTR基因,2株具有mefA基因,21株同时具有ermB/ermTR基因,5株同时具有ermB/mefA基因,3株同时具有ermTR/mefA基因,9株同时具有ermB/ermTR/mefA基因,5株未能检测到三种耐药基因。结论酿脓链球菌对大环内酯类抗菌药物的耐药率较高,耐药表型以cMLS和iMLS为主,耐药基因以ermB和ermTR多见。

关键词：酿脓链球菌大环内酯类耐药表型耐药基因

结核分枝杆菌北京基因型菌株与耐药表型的关系

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中国医学科学院学报 2009年第4期31卷 427-431页

作者：王胜芬赵雁林黄海荣李强周杨欧喜超付育红北京市结核病胸部肿瘤研究所国家结核病参比实验室北京101149

目的研究我国结核分枝杆菌北京基因型菌株的分布以及与耐药表型的关系。方法2008年4～12月从我国6个区域收集痰涂片阳性的结核病患者的临床分离株,每一患者的一份分离株经生化方法鉴定为结核分枝杆菌复合群。收集患者的性别、年龄、病... 详细信息

目的研究我国结核分枝杆菌北京基因型菌株的分布以及与耐药表型的关系。方法2008年4～12月从我国6个区域收集痰涂片阳性的结核病患者的临床分离株,每一患者的一份分离株经生化方法鉴定为结核分枝杆菌复合群。收集患者的性别、年龄、病史、菌株耐药谱和菌株来源资料。药物敏感性实验采用比例法。运用间隔区寡核苷酸分型方法或基因dnaA～dnaN之间插入序列IS6110鉴定北京基因型菌株。结果在410份结核分枝杆菌分离株中,67.1%(275/410)的分离株属于北京基因型菌株,东北部区域感染北京基因型菌株患者的比例高于中西部区域(χ2=20.50,P=0.000)。患者的年龄、性别和治疗史与感染北京基因型菌株无关。在耐多药菌株和耐利福平菌株中,北京基因型菌株的比例显著高于非北京基因型(P=0.002,P=0.005)。结论患者的年龄、性别和治疗史与感染北京基因型菌株无关,东北部区域北京基因型菌株分布比例显著高于中西部区域。北京基因型菌株与利福平耐药和耐多药有关。

关键词：结核分枝杆菌北京基因型耐药表型

宏基因组高通量测序技术在革兰阴性菌耐药表型检测中的研究进展

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中华结核和呼吸杂志 2022年第2期45卷 209-213页

作者：梁文炎施毅孙文逵南京医科大学第一附属医院呼吸与危重症医学科南京210029 南京大学医学院附属金陵医院呼吸与危重症医学科南京210002

耐药细菌感染的不断蔓延对公共卫生安全构成重要威胁,早期诊断和目标治疗是治疗成功的关键。传统细菌培养及药物敏感性检测耗时长、敏感性不高,无法满足临床诊治需求,高通量测序等分子检测技术成为新的发展方向。本文对近年来有关高通... 详细信息

耐药细菌感染的不断蔓延对公共卫生安全构成重要威胁,早期诊断和目标治疗是治疗成功的关键。传统细菌培养及药物敏感性检测耗时长、敏感性不高,无法满足临床诊治需求,高通量测序等分子检测技术成为新的发展方向。本文对近年来有关高通量测序在革兰阴性菌耐药诊治中的进展做一综述。

关键词：革兰阴性菌公共卫生安全宏基因组高通量测序技术分子检测技术细菌培养早期诊断耐药表型

CYP3A5基因转染HL-60细胞介导耐药表型的研究

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中华肿瘤杂志 2005年第8期27卷 461-464页

作者：王婷陈芳源顾春红钟华滕晔欧阳仁荣上海第二医科大学附属仁济医院血液科 200001

目的探讨CYP3A5基因与白血病细胞多药耐药的关系。方法克隆CYP3A5基因全长cDNA,构建CYP3A5基因真核表达重组质粒,稳定转染HL60白血病细胞。采用四氮唑蓝法(MTT)测定化疗药的半数抑制量IC50值,采用流式细胞术(FCM)分析细胞周期及凋亡细... 详细信息

目的探讨CYP3A5基因与白血病细胞多药耐药的关系。方法克隆CYP3A5基因全长cDNA,构建CYP3A5基因真核表达重组质粒,稳定转染HL60白血病细胞。采用四氮唑蓝法(MTT)测定化疗药的半数抑制量IC50值,采用流式细胞术(FCM)分析细胞周期及凋亡细胞百分比。结果空载质粒pcDNA3、重组质粒pcDNA3CYP3A5稳定转染HL60细胞。柔红霉素诱导后,HL60和HL60/pc细胞出现明显的凋亡峰,凋亡细胞比例分别为7.3%和6.3%;而HL60/CYP3A5细胞则无明显凋亡峰,凋亡细胞比例为1.2%。HL60/CYP3A5细胞与HL60、HL60/pc细胞相比,显著耐受柔红霉素、阿克拉霉素、长春新碱和三尖杉酯碱,耐药倍数分别为2.89,2.01,4.05和2.79倍(P耐药倍数为1.04倍。结论CYP3A5基因的转录直接导致白血病细胞对蒽环类抗生素及生物碱类药物耐药,而对表鬼臼毒素仍然敏感。

关键词： CYP3A5基因 HL-60细胞药物代谢酶多药耐药基因转染 HL-60白血病细胞 CYP3A5 耐药表型细胞介导白血病细胞多药耐药

鲍曼不动杆菌主动外排系统和NDM-1基因分布特征及与耐药表型的关系

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上海交通大学学报（医学版） 2012年第7期32卷 866-870页

作者：李永丽应春妹上海交通大学医学院附属仁济医院检验科上海200127

目的了解鲍曼不动杆菌主动外排系统(外排泵)基因和新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)基因的分布情况,并分析其与细菌耐药表型的关系。方法采用琼脂二倍稀释法检测13种抗生素对81株鲍曼不动杆菌临床分离株的最低抑菌浓度(MICs),根据外排泵... 详细信息

目的了解鲍曼不动杆菌主动外排系统(外排泵)基因和新德里金属β-内酰胺酶1(NDM-1)基因的分布情况,并分析其与细菌耐药表型的关系。方法采用琼脂二倍稀释法检测13种抗生素对81株鲍曼不动杆菌临床分离株的最低抑菌浓度(MICs),根据外排泵抑制剂PAβN处理前后MICs的变化判定外排泵表型。利用PCR扩增技术检测外排泵基因adeABC、adeIJK和adeFGH以及NDM-1基因blaNDM-1在临床分离株中的分布特征,根据外排泵基因的检出情况将临床分离株进行分组并比较耐药率。结果 81株鲍曼不动杆菌对临床常用的13种抗生素普遍耐药,43株(53%)外排泵表型试验阳性,对米诺环素的耐药率最低(30.9%),其次为亚胺培南,对其余抗生素的耐药率均超过60%,对头孢西丁和复方新诺明的耐药率较高,分别为97.5%和93.8%。在AdeABC外排泵基因阳性的菌株中,adeB、adeS和adeR的检出率分别为78%、78%和74%;在AdeIJK和AdeFGH外排泵基因中,adeJ、adeL、adeF、adeG和adeH的检出率均>90%;外排泵基因adeB、adeJ和adeG全部阳性的60株鲍曼不动杆菌的多重耐药最为严重,耐药基因阳性组的耐药率明显高于相对基因阴性组。32株鲍曼不动杆菌被检测出携带blaNDM-1基因。结论本地区鲍曼不动杆菌临床分离株多重耐药情况严重,存在blaNDM-1基因的克隆传播。AdeABC、AdeIJK和adeFGH外排泵基因在鲍曼不动杆菌临床分离株中的检出率较高。主动外排系统和NDM-1在鲍曼不动杆菌多重耐药性的形成中起重要作用。

关键词：鲍曼不动杆菌主动外排系统耐药表型

98株鸭源致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因型与耐药表型的比较

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畜牧兽医学报 2010年第12期41卷 1568-1575页

作者：于学辉黄兰杨晓农刘群西南民族大学生命科学与技术学院成都610041

旨在调查鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷修饰酶耐药基因(AMEs基因)的携带情况,探讨耐药基因与氨基糖苷类抗生素耐药表型的相关性。对98株鸭致病性大肠杆菌采用了K-B法,选用氨基糖苷类抗生素链霉素、新霉素、庆大霉素、阿米卡星、大观霉素和... 详细信息

旨在调查鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷修饰酶耐药基因(AMEs基因)的携带情况,探讨耐药基因与氨基糖苷类抗生素耐药表型的相关性。对98株鸭致病性大肠杆菌采用了K-B法,选用氨基糖苷类抗生素链霉素、新霉素、庆大霉素、阿米卡星、大观霉素和卡那霉素进行药敏试验,用建立的检测氨基糖苷类AMEs主要基因的四重PCR方法对上述菌株进行分子检测,并随机选取耐药基因ant(3″)-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa和aph(3′)-Ⅱa各3个阳性扩增进行克隆测序,对药敏试验结果和基因检测结果进行比较分析。结果表明,98株鸭致病性大肠杆菌有67株对上述氨基糖苷类药物中的一种或多种耐药,耐药率为68.4%(67/98);有49株扩增出AMEs基因,AMEs基因的检出率为50%(49/98),其中ant(3″)-Ⅰa的检出率为30.6%(30/98),aac(3)-Ⅱa为13.3%(13/98),aph(3′)-Ⅱa为3.1%(3/98),ant(3″)-Ⅰa+aac(3)-Ⅱa为2.0%(2/98)、aac(3)-Ⅱa+aph(3′)-Ⅱa为1.0%(1/98),未检出aac(6′)-Ⅰb基因;序列分析结果表明,扩增产物与GenBank中的相应序列有很高的同源性(>99%);AMEs耐药基因与耐药表型的符合率为73.1%(49/67),符合率从高到低依次为大观霉素60%(3/5)、庆大霉素55%(11/20)、链霉素33.3%(22/66)、卡那霉素19%(4/21)、新霉素12.5%(1/8)、阿米卡星0%(0/3)。另外有4株细菌检测到相关耐药基因但耐药表型为敏感,而有22株耐药表型为耐药却未检测到相关耐药基因。鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因以ant(3″)-Ⅰa和aac(3)-Ⅱa两种为主,耐药性与相关耐药基因的检出率基本呈正相关。

关键词：鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷类多重PCR 耐药基因耐药表型

水貂源致病性大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药表型与耐药基因型检测与分析

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野生动物学报 2021年第1期42卷 166-170页

作者：郭家媚葛成张文斌吴同垒张志强贾青辉张召兴张艳英河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室昌黎066600 河北旅游职业学院承德067000

为了分析水貂源致病性大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药表型与耐药基因型相关性,采用K-B药敏纸片法和PCR法分别检测临床分离的15株水貂源致病性大肠杆菌耐药性与耐药表型。结果表明,15株水貂源致病性大肠杆菌对恩诺沙星、诺氟沙星、氧氟沙星... 详细信息

为了分析水貂源致病性大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药表型与耐药基因型相关性,采用K-B药敏纸片法和PCR法分别检测临床分离的15株水貂源致病性大肠杆菌耐药性与耐药表型。结果表明,15株水貂源致病性大肠杆菌对恩诺沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星耐药率为46.7%—26.7%,呈现多重耐药性;耐药基因gyrA、gyrB、qnrA、pare、qnrB检出率为80%—100%,其他耐药基因检出率为7%—40%,呈现多种耐药基因型;恩诺沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星耐药表型与耐药基因gyrA、gyrB、qnrA、par的符合率为40%—55.3%,与其他耐药基因复合较低。说明临床分离的15株水貂源致病性大肠杆菌对喹诺酮类药物产生多重耐药性,携带多种耐药基因,呈现多种耐药基因型,恩诺沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星耐药表型与耐药基因gyrA、gyrB、qnrA、par具有一定相关性。

关键词：水貂大肠杆菌喹诺酮类药物耐药表型耐药基因