检索结果-南通市图书馆

急性淋巴细胞白血病耐药细胞株的建立及耐药机制的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2018年第3期26卷 698-704页

作者：李田田张莉陶善东马晶晶于亮南京医科大学附属淮安第一医院血液科江苏淮安223300 南京医科大学血液病重点实验室江苏南京210029

目的:构建耐阿霉素的急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株,并探讨其耐药机制。方法:采用阿霉素(ADR)小剂量浓度递增间歇诱导SUP-B15(Ph^+)和RS4;11(Ph^-)细胞,建立SUP-B15/ADR和RS4;11/ADR耐药细胞株;应用CCK-8法检测细胞的活力与增殖;Wester... 详细信息

目的:构建耐阿霉素的急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞株,并探讨其耐药机制。方法:采用阿霉素(ADR)小剂量浓度递增间歇诱导SUP-B15(Ph^+)和RS4;11(Ph^-)细胞,建立SUP-B15/ADR和RS4;11/ADR耐药细胞株;应用CCK-8法检测细胞的活力与增殖;Western blot检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;RT-PCR检测MDR1基因的表达。结果:成功构建ALL耐药细胞株SUP-B15/ADR和RS4;11/ADR,耐药指数分别为14.088±0.763和10.473±1.024。冻存的SUP-B15/ADR和RS4;11/ADR细胞复苏后,细胞存活率分别为88.4±1.2%和89.3±1.6%,耐药指数分别为13.976±0.967和10.342±0.846,与冻存前相比差异无统计学意义(P﹥0.05)。撤药培养1个月,2株细胞的耐药指数明显降低,分别为12.893±1.255和9.327±0.321(P﹤0.05)。SUP-B15/ADR和RS4;11/ADR细胞对阿糖胞苷的耐药指数分别为3.459±0.451和3.992±0.795,对依托泊苷的耐药指数分别为3.564±0.365和3.654±0.251。MDR1和P-gp在耐药细胞中的表达较亲本细胞增高。结论:小剂量浓度递增间歇诱导法可成功诱导出ALL耐阿霉素细胞株,其耐药机制是上调MDR1与P-gp的表达。

关键词：急性淋巴细胞白血病耐药细胞株阿霉素 P-糖蛋白 MDR1

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国医学科学院学报 2021年第5期43卷 706-715页

作者：范爽武雪亮薛军徐丹丹韩艳君李源睿屈明河北北方学院附属第一医院普通外科河北张家口075000 河北北方学院附属第一医院中心实验室河北张家口075000 河北北方学院研究生学院河北张家口075000 西北大学生命科学学院西安710000

目的建立耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的人结肠癌细胞株HCT-116/5-FU,初步探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)与结直肠癌耐药的关系。方法采用低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击法建立人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,CCK-8法检测5-FU对亲本株HCT-116... 详细信息

目的建立耐5-氟尿嘧啶(5-FU)的人结肠癌细胞株HCT-116/5-FU,初步探讨Runt相关转录因子3(RUNX3)与结直肠癌耐药的关系。方法采用低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击法建立人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,CCK-8法检测5-FU对亲本株HCT-116及耐药株HCT-116/5-FU的半数抑制浓度(IC_(50)值),绘制细胞生长曲线,计算细胞群体倍增时间(TD);qRT-PCR和Western blot法检测亲本株HCT-116细胞及耐药株HCT-116/5-FU细胞中RUNX3、P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺耐药蛋白(LRP)的mRNA和蛋白表达。采用siRNA技术敲低HCT-116细胞中RUNX3的表达,分为RUNX3敲低组(si-RUNX3-1组、si-RUNX3-2组)和阴性对照组(si-NC组),qRT-PCR和Western blot法分别在mRNA水平和蛋白水平验证RUNX3的敲低效率;CCK-8法测定si-RUNX3组和si-NC组的IC_(50)值,Western blot法测定两组中P-gp、MRP1和LRP的表达情况。结果成功构建稳定的人结肠癌耐药细胞株HCT-116/5-FU,耐药倍数为7.7倍;HCT-116/5-FU耐药细胞株群体TD较HCT-116亲本株明显延长(P耐药细胞群体TD是亲本细胞的1.38倍(P=0.002),耐药株细胞形态发生变化。耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3 mRNA表达水平较亲本细胞株HCT-116明显降低(P=0.048),P-gp(P=0.008)、MRP1(P=0.001)和LRP mRNA(P=0.001)表达水平较亲本细胞株HCT-116明显升高;耐药细胞HCT-116/5-FU的RUNX3蛋白质相对表达量较亲本细胞株HCT-116明显降低(P细胞株明显升高(P均细胞模型,si-RUNX3-1组RUNX3 mRNA的表达与si-NC组相比差异无统计学意义(P=0.064),si-RUNX3-2组明显低于si-NC组(P=0.034);si-RUNX3-1组和si-RUNX3-2组RUNX3蛋白的表达量均明显低于si-NC组(P均细胞对5-FU的敏感性(P细胞对5-FU的敏感性,可能与RUNX3表达的降低上调P-gp、MRP1和LRP等耐药蛋白表达,从而增加细胞的耐药性有关。

关键词： runt相关转录因子3 耐药细胞株 siRNA 人结直肠癌 HCT-116 5-氟尿嘧啶

诺美孕酮逆转乳腺癌耐药细胞株多药耐药性的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华肿瘤杂志 2002年第2期24卷 129-132页

作者：李杰许良中何开玲郭伟剑朱雄增郑云红夏鹏上海第二医科大学附属新华医院肿瘤中心肿瘤科 200092 上海医科大学中国科学院上海药物研究所

目的　研究诺美孕酮 (NOM)对乳腺癌耐药细胞株 (MCF7/ADR)多药耐药性 (MDR)的影响 ,探讨其调节机制。方法　应用MTT法 ,研究NOM对MCF7/ADR药物敏感性的影响。采用半定量逆转录聚合酶联反应 (RT PCR)和免疫细胞化学染色 ,分析耐药基因MDR... 详细信息

目的　研究诺美孕酮 (NOM)对乳腺癌耐药细胞株 (MCF7/ADR)多药耐药性 (MDR)的影响 ,探讨其调节机制。方法　应用MTT法 ,研究NOM对MCF7/ADR药物敏感性的影响。采用半定量逆转录聚合酶联反应 (RT PCR)和免疫细胞化学染色 ,分析耐药基因MDR1、谷胱甘肽S转移酶Pi(GSTπ)、拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)和多药耐药相关蛋白 (MRP)表达的变化。通过流式细胞技术观察NOM对MCF7/ADR细胞内药物积累和细胞周期的影响。结果　NOM对MCF7/ADR的MDR具有明显的逆转作用 ,在 2 0 ,10和 5 μmol/L浓度时的逆转倍数分别为 2 1,12和 8倍 ,逆转强度明显高于前身化合物甲地孕酮 ,而与维拉帕米相当。 5 μmol/LNOM处理MCF7/ADR后 ,MDR1的mRNA表达水平明显降低 ,呈现时间依赖性变化 ;P糖蛋白 (P gp)和GSTπ蛋白的变化符合相应mRNA表达的变化 ;MRP和TopoⅡα基因表达未见明显变化。用NOM 2 0 ,10和 5 μmol/L分别处理 2h后 ,ADR在细胞内的积累分别增加到 2 .7倍、2 .3倍和 1.5倍。同时 ,NOM可明显加强ADR对MCF7/ADR细胞在G2 M期的阻滞作用。结论　NOM具有较强的逆转MCF7/ADR细胞MDR的作用 ,其逆转机制为多种途径 ,包括时间依赖性下调MDRI和GSTπ基因的表达 ,增加细胞内药物积累 ,加强ADR对MCF7/ADR在G2

关键词：诺美孕酮多药耐药乳腺癌耐药细胞株

miRNA765高表达对胃癌耐药细胞株BGC-823/CDDP耐药性的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

上海交通大学学报（医学版） 2012年第12期32卷 1581-1586页

作者：霍中华储凌胡君宋博吕盛中国人民解放军第四五四医院普外科南京210002

目的观察miRNA765高表达对胃癌顺铂(CDDP)耐药细胞株BGC-823/CDDP耐药性的影响。方法将PCR扩增的包含miRNA765前体的基因序列克隆至真核表达载体,构建miRNA重组表达载体;阳离子脂质体转染重组质粒到BGC-823/CDDP细胞。转染后48 h,Real-T... 详细信息

目的观察miRNA765高表达对胃癌顺铂(CDDP)耐药细胞株BGC-823/CDDP耐药性的影响。方法将PCR扩增的包含miRNA765前体的基因序列克隆至真核表达载体,构建miRNA重组表达载体;阳离子脂质体转染重组质粒到BGC-823/CDDP细胞。转染后48 h,Real-Time PCR和Western blotting法分别检测细胞中miRNA765和细胞因子诱导的凋亡抑制因子1(CIAPIN1)蛋白的相对表达量;采用不同浓度CDDP处理转染后48 h的BGC-823/CDDP细胞,24和48 h后MTT法检测细胞活性并计算细胞对于CDDP的半抑制浓度(IC50)。采用终质量浓度为1μg/mL的CDDP处理基因干预后的BGC-823/CDDP细胞,双染法检测细胞凋亡率。结果 BGC-823/CDDP细胞内miRNA765的相对表达量明显低于其亲本细胞BGC-823,CIAPIN1蛋白相对表达量则明显高于其亲本细胞株(均P细胞内高表达miRNA765可明显抑制CIAPIN1蛋白的表达,转染后48 h的CIAPIN1蛋白表达量明显低于未转染组(P细胞的耐药能力,48 h后IC50值从(18.27±3.92)μg/mL降至(1.50±0.43)μg/mL(P细胞的凋亡率从(10.1±1.7)%上升至(53.4±7.9)%(P耐药细胞株BGC-823/CDDP的耐药能力。

关键词： BGC-823 耐药细胞株 CDDP 耐药性胃癌脂质体转染蛋白表达量 DP细胞

罗哌卡因对人结肠癌顺铂耐药细胞株顺铂敏感性的增强作用及其机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山东医药 2023年第27期63卷 21-28页

作者：赵文博曾炼胡鹏超程欣冉罗辉宇湖北医药学院附属襄阳市第一人民医院麻醉科湖北襄阳441000 湖北医药学院基础医学院

目的观察罗哌卡因对人结肠癌顺铂耐药细胞株顺铂敏感性的增强作用,并进一步探讨其作用机制。方法通过浓度递增法将人结肠癌LOVO细胞暴露于顺铂中诱导顺铂耐药株LOVO/DDP形成。将LOVO和LOVO/DDP两种结肠癌细胞株分别分为罗哌卡因联合顺... 详细信息

目的观察罗哌卡因对人结肠癌顺铂耐药细胞株顺铂敏感性的增强作用,并进一步探讨其作用机制。方法通过浓度递增法将人结肠癌LOVO细胞暴露于顺铂中诱导顺铂耐药株LOVO/DDP形成。将LOVO和LOVO/DDP两种结肠癌细胞株分别分为罗哌卡因联合顺铂组、罗哌卡因组、顺铂组、对照组。对照组加入细胞培养液,顺铂组加入细胞培养液和1.0μmol/L浓度顺铂,罗哌卡因联合顺铂组加入细胞培养液后再同时加入1.0μmol/L浓度顺铂及1 mmol/L浓度罗哌卡因培养。培养14 d,采用平板克隆实验观察细胞增殖能力。培养48 h后,采用Tran⁃swell和流式细胞术观察细胞迁移、凋亡情况;JC-1和ROS实验测定细胞线粒体膜电位和活性氧(ROS);Western blot⁃ting法、免疫荧光法检测细胞株中MMP-9及铁死亡相关蛋白GPX4、Nrf-2、SLC7A11;亚铁离子染色法检测结肠癌细胞株中亚铁离子。结果LOVO细胞中,与对照组比较,顺铂组LOVO细胞株克隆体的形成减少、迁移细胞株数减少、MMP-9蛋白水平降低、凋亡率升高、存活率降低,罗哌卡因组克隆体形成数、迁移细胞株数、MMP-9蛋白水平、细胞凋亡率、细胞存活率变化不明显,顺铂联合罗哌卡因组细胞株克隆体数减少、迁移细胞数减少、MMP-9蛋白水平下降、凋亡率升高、存活率降低(P均细胞株克隆体数少、迁移细胞数少、MMP-9蛋白水平低、凋亡率高、存活率低(P均细胞株中,与对照组比较,顺铂组、罗哌卡因组细胞株克隆体数、迁移细胞株数、MMP-9蛋白水平变化不明显,顺铂联合罗哌卡因组细胞株克隆体数、迁移细胞株数减少、MMP-9蛋白水平降低、细胞凋亡率降低、细胞存活率升高(P均细胞株和LOVO/DDP细胞株中,与对照组比较,其他三组JC-1多聚体红色荧光与单体绿色荧光比值[JC-1(Red/Green)]均降低,ROS水平升高,GPX4蛋白水平下降,GPX4相对荧光强度减弱,Fe2+荧光强度增强,以罗哌卡因联合顺铂组最显著(P均细胞株中,与对照组相比,顺铂组及罗哌卡因组Nrf-2、SLC7A11蛋白表达水平无明显变化(P均>0.05),罗哌卡因联合顺铂组Nrf-2、SLC7A11蛋白水平均下降(P均耐药细胞株顺铂敏感性,其作用机制可能与由Nrf-2、GPX4、SLC7A11及线粒体膜电位水平降低、ROS水平升高诱导的铁死亡有关。

关键词：罗哌卡因人结肠癌细胞株耐药细胞株铁死亡核红细胞2相关因子2/谷胱甘肽过氧化物酶4信号通路

非小细胞肺癌奥希替尼获得性耐药细胞株的建立及其耐药机制的探讨

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

激光生物学报 2022年第6期31卷 518-525页

作者：刘怡婷王喆冯静高敏张秀伟张允雷南京医科大学附属江宁医院呼吸与危重症医学科南京211100 南京医科大学生物医学工程与信息学院南京211100 南京医科大学第一附属医院急诊医学中心南京210029 南京医科大学附属江宁医院中心实验室南京211100

耐药的产生是肺癌死亡率居高不下的主要原因。因此,建立非小细胞肺癌(NSCLC)第三代分子靶向药物奥希替尼获得性耐药细胞株,并探讨其耐药机制对肺癌耐药的研究具有重要意义。本研究采用间歇性大剂量冲击和梯度递增法,以HCC827为模型,在... 详细信息

耐药的产生是肺癌死亡率居高不下的主要原因。因此,建立非小细胞肺癌(NSCLC)第三代分子靶向药物奥希替尼获得性耐药细胞株,并探讨其耐药机制对肺癌耐药的研究具有重要意义。本研究采用间歇性大剂量冲击和梯度递增法,以HCC827为模型,在体外建立奥希替尼耐药细胞株HCC827OR。利用细胞计数(CCK8)法检测细胞增殖,通过耐药指数(RI)评估细胞对奥希替尼的敏感度;利用荧光染色法比较耐药前后细胞的形态学变化;利用Western blot法检测表皮生长因子受体(EGFR)及其下游信号蛋白的表达;第二代测序(NGS)检测EGFR的基因突变;细胞周期和划痕试验检测细胞的增殖和迁移能力。试验结果显示,HCC827OR的RI为18.65,表明HCC827OR为奥希替尼耐药细胞株。与野生型HCC827细胞相比,奥希替尼耐药细胞的核质比显著增大,关键蛋白p-EGFR表达显著下降,而细胞增殖相关的p-AKT显著增加,这表明其可能通过非EGFR依赖信号通路产生耐药。同时,流式细胞术和划痕试验结果表明,HCC827OR细胞株出现了明显的G2/M周期阻滞,但其迁移能力得到了提高。本研究成功构建了NSCLC奥希替尼耐药细胞株HCC827OR,初步证明了其可通过非EGFR依赖的旁路产生耐药,为研究肿瘤细胞耐药提供了重要的体外模型。

关键词：奥希替尼非小细胞肺癌表皮生长因子受体耐药细胞株耐药机制

ω-3多不饱和脂肪酸对人多发性骨髓瘤耐药细胞株MM.1R的增殖抑制作用及增强地塞米松敏感性的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华血液学杂志 2016年第12期37卷 1085-1088页

作者：吴圣豪郑翠苹陈松燕刘珍林弼靖范玉芳翁珊珊温州市中心医院(温州医科大学定理临床学院)血液化疗科 325000

多发性骨髓瘤（MM）是一种起源于浆细胞的恶性肿瘤.近年来新型化疗药物的应用使MM的治疗取得了长足进展,但是患者的预后仍较差.耐药是MM难治、复发的原因之一.MM细胞异质性强,基因组高度不稳定,生长增殖高度依赖骨髓微环境,是耐药细胞... 详细信息

多发性骨髓瘤（MM）是一种起源于浆细胞的恶性肿瘤.近年来新型化疗药物的应用使MM的治疗取得了长足进展,但是患者的预后仍较差.耐药是MM难治、复发的原因之一.MM细胞异质性强,基因组高度不稳定,生长增殖高度依赖骨髓微环境,是耐药细胞出现和存在的主要原因.ω-3多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid,PUFA）为人体必需脂肪酸,是细胞膜的组成成分,参与基因表达、生长发育等多种生理功能.ω-3 PUFA包括二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）和二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid,DHA）.

关键词： ω-3多不饱和脂肪酸多发性骨髓瘤耐药细胞株增殖抑制作用地塞米松敏感性二十二碳六烯酸二十碳五烯酸

K562/ADM耐药细胞株的建立及其生物学特性的初步观察

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

癌症 1992年第3期11卷 222-224页

作者：沈世人苏颖黄秀清谢左孚高频福建省肿瘤医院研究室福州350014

我们建立的K562/ADM耐药细胞株,在ADM浓度为2.4μg/m1(4.46μM)中已稳定培养3.5个月,传了30—35代,K562/ADM亦具有多药耐受件(Multidrug Resistance,MDR)的特点,对ADM、VCR、AT—1258和DDP的耐受性分别为K562的114.7、94.0、13.3和7.4倍,但对5—FU不产生交叉耐药。K562和K562/ADM的倍增时间分别为19.2h和52.8h,集落生成率分别为37.5％和11.1％,K562染色体数为34—68,中位数为56;K562/MDM染色体数为32—90,中位数为50,K562/ADM可做为耐药机理和克服耐药措施研究的极好模型。

关键词： K562 K562/ADM 耐药细胞株生物学

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

转基因法建立膀胱癌耐药细胞株

中华泌尿外科杂志 2002年第11期23卷 689-692页

作者：潘进勇杨唐俊何斌易善红曾毅第三军医大学新桥医院泌尿外科

目的　用转基因法建立膀胱癌耐药细胞株 ,研究细胞耐药机制。　方法　利用脂质体(DOTAP)介导的基因转移方法 ,在浸润性膀胱癌细胞株T2 4中转入mdr1全长cDNA ,经阿霉素筛选 ,获得耐药的T2 4细胞株TADM ;免疫组化、MTT、流式细胞仪、基因... 详细信息

目的　用转基因法建立膀胱癌耐药细胞株 ,研究细胞耐药机制。　方法　利用脂质体(DOTAP)介导的基因转移方法 ,在浸润性膀胱癌细胞株T2 4中转入mdr1全长cDNA ,经阿霉素筛选 ,获得耐药的T2 4细胞株TADM ;免疫组化、MTT、流式细胞仪、基因组PCR、RT PCR等方法鉴定TADM的耐药表型。　结果　TADM细胞的相对耐药指数为 4 1.6 ,基因组中有mdr1cDNA插入 ,P 糖蛋白及mdr1mRNA表达增加。　结论　TADM细胞具有良好的耐药表型 ,其耐药性的产生是由mdr1全长cDNA稳定整合在T2 4细胞基因组中 ,大量表达P 糖蛋白引起。转基因法建立膀胱癌耐药细胞株具有耗时短、耐药强度高而稳定等特点。

关键词：转基因法膀胱癌耐药细胞株