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36株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药表型和基因型特征分析

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右江医学 2024年第5期52卷 405-411页

作者：易雪丽陈晓颖滕元姬罗斌右江民族医学院附属医院医学检验中心广西百色533000

目的分析广西百色市某三级甲等医院2020—2022年分离自临床的36株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性及耐药机制,为医院感染防控和指导临床治疗提供依据。方法使用微量肉汤稀释法及纸片扩散法检测分离的36株CRKP对临床常用抗生素及... 详细信息

目的分析广西百色市某三级甲等医院2020—2022年分离自临床的36株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药性及耐药机制,为医院感染防控和指导临床治疗提供依据。方法使用微量肉汤稀释法及纸片扩散法检测分离的36株CRKP对临床常用抗生素及头孢他啶/阿维巴坦的耐药性,同时使用聚合酶链式反应检测常见耐药基因携带情况,并使用碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测菌株携带的碳青霉烯酶种类。结果36株CRKP对除头孢他啶/阿维巴坦之外的所有β内酰胺类药物和氟喹诺酮类药物耐药率均超过90%,对头孢他啶/阿维巴坦耐药率为33.3%,对阿米卡星的耐药率为63.9%,对磺胺类药物复方新诺明耐药率为61.1%。bla KPC携带率为63.89%,bla NDM携带率为19.44%,bla TEM携带率为75.00%,bla CTX-m携带率为16.67%,bla SHV携带率为91.67%,bla Ampc携带率为5.56%,未检出携带bla OXA-48的菌株。表型检测显示有34株菌产碳青霉烯酶,其中23株单产A类酶,10株单产B类酶,1株同时产A类酶和B类酶。结论通过对常见CRKP耐药性及基因表型进行调查可以为临床抗生素的合理应用和感染的防控提供科学依据。

关键词：肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶头孢他啶/阿维巴坦

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体的初步应用和抗性机制研究

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耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌裂解性噬菌体的初步应用和抗性机制研究

作者：赵亚频苏州大学

学位级别：硕士

目的:肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)为肠杆菌科克雷伯氏菌属、革兰染色阴性细菌,是常见的条件致病菌及医院感染的主要病原菌之一。肺炎克雷伯菌能引起尿路感染、血流感染、肺炎、组织和器官的脓肿等疾病。随着抗生素的不合理... 详细信息

目的:肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)为肠杆菌科克雷伯氏菌属、革兰染色阴性细菌,是常见的条件致病菌及医院感染的主要病原菌之一。肺炎克雷伯菌能引起尿路感染、血流感染、肺炎、组织和器官的脓肿等疾病。随着抗生素的不合理使用,多重耐药肺炎克雷伯菌的分离率逐渐增多,耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)给临床治疗带来了极大的困难,高死亡率严重威胁患者的生命安全。噬菌体(bacteriophage,phage)是感染宿主细菌的病毒,具有严格的宿主特异性且广泛存在于自然环境中,其中裂解性噬菌体可以特异性地裂解宿主细菌,然而细菌在与噬菌体相互作用的过程中也会产生抗性突变。本研究旨在分离出裂解CRKP的噬菌体,分析其基本生物学特征并建立小鼠感染模型评估其应用效果,同时探究噬菌体抗性菌的产生机制,为临床治疗CRKP提供新的方法。方法:本研究对收集自张家港两家三级综合医院分离的CRKP进行药敏试验、改良碳青霉烯酶灭活实验、耐药基因、ST分型、荚膜分型、毒力基因、脉冲场凝胶电泳等耐药情况及分子分型研究;将CRKP菌株作为宿主菌从医院污水中分离出裂解性噬菌体p9676,通过pH和温度稳定性实验、宿主谱、一步生长曲线、最佳感染复数分析噬菌体的基本生物学特征;通过与美罗培南体外联合应用研究噬菌体与抗生素的协同作用;通过噬菌体毒性作用、最低致死剂量、噬菌体治疗剂量依赖试验等评估噬菌体治疗小鼠感染模型的效果;通过基因组比对、分子克隆、糖醛酸测定来了解噬菌体抗性机制产生的原因。结果:1.菌株收集:本研究从张家港两家三级综合医院2018年2月至2022年5月临床非重复标本中分离耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌24株。2.抗生素药敏试验:24株CRKP对氨苄西林、氨苄西林-舒巴坦、氨曲南、亚胺培南耐药率为100%,对哌拉西林-他唑巴坦、头孢他啶、美罗培南、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率大于90%,对庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星的耐药率最低,但也达到50%及以上。3.改良碳青霉烯酶灭活实验:21株改良碳青霉烯酶灭活实验结果阳性,阳性率为 87.5%。4.耐药基因检测:本研究ESBLs耐药基因携带情况为blasHv占100%,blaCTx-M占70.8%,blaTEM占54.2%,同时携带这三种耐药基因的比例为45.8%。碳青霉烯酶耐药基因中,主要以 blaKPC为主,占 91.7%,blaNDM 占 4.2%,blaVIM、blaIMP、blaOXA-48、mcr-1这四种基因未检出。5.多重 PCR:第一体系分型为 ST11 占 79.2%(19/24),ST23 占 8.3%(2/24),ST65、ST86、ST258均未检出。第二体系荚膜分型KL64占70.8%(17/24),且均属于ST11分型,未检出K1、K2、KL47分型。第三体系毒力基因rmpA占20.8%(5/24),rmpA2占29.2%(7/24),iroN 占 20.8%(5/24),iutA 占 29.2%(7/24),rmpA2+iutA占8.3%(2/24),rmpA+rmpA2+iroN+iutA 占 20.8%(5/24)。6.PFGE:结果显示有7株带型高度相似,且都为ST11型,提示可能存在克隆传播。7.噬菌体分离:从医院污水中分离出一株裂解性噬菌体,将其命名为p9676;透射电镜照片显示p9676属于短尾噬菌体科。8.稳定性试验:在pH为3-11、温度4-50℃的条件下,噬菌体效价保持稳定。9.p9676的宿主范围与荚膜分型有关。10.p9676潜伏期为5 min,裂解量约为40 PFU/cell。11.体外实验表明p9676与美罗培南联合应用能够产生协同杀菌效果。12.动物实验表明p9676治疗小鼠存在剂量依赖性,且未发现有细胞毒性。13.对菌株HD10544的研究表明,由于宿主菌HD9676中wcaJ基因表达障碍后影响细菌荚膜合成,导致细菌表面受体的改变,使噬菌体无法吸附并进入细菌,从而产生噬菌体抗性。结论:1.张家港地区两家三级综合医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的分布主要集中在ICU和康复科,标本类型以痰液和尿液为主,药敏试验结果表明本地区CRKP对常用抗菌药物的耐药情况比较严重。2.CRKP耐药机制主要是以产KPC的碳青霉烯酶为主,ST分型以ST11为主。PFGE结果显示不同病区之间可能存在克隆性传播。3.p9676属于有尾噬菌体目、短尾噬菌体科,宿主特异性强,温度及pH稳定性良好,潜伏期短等特点。4.体外实验表明p9676与美罗培南联合使用能够产生协同杀菌作用,体内实验表明p9676无毒性作用,能够有效治疗CRKP引起的小鼠腹腔感染模型。5.荚膜作为噬菌体识别宿主菌的受体,其功能表达障碍可以导致噬菌体无法识别从而产生抗噬菌体细菌。

关键词：耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌噬菌体噬菌体治疗噬菌体抗性

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌分子特征及多粘菌素体外联合用药研究

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耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌分子特征及多粘菌素体外联合用药研究

作者：黄琬重庆医科大学

学位级别：硕士

背景:本研究旨在了解重庆市西部某医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)分离株的分子特征与多粘菌素B(PMB)体外联合的作用效果。方法:从重庆医科大学附属永川医院分离出127株非重复的CRKP菌株... 详细信息

背景:本研究旨在了解重庆市西部某医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)分离株的分子特征与多粘菌素B(PMB)体外联合的作用效果。方法:从重庆医科大学附属永川医院分离出127株非重复的CRKP菌株,采用VITEK-2 compact系统进行鉴定,并采用微量肉汤稀释法测定其最低抑菌浓度。采用肠杆菌目基因间重复共有聚合酶链反应和多位点序列分型分析分离菌株的同源性。使用聚合酶链式反应评估遗传信息,包括耐药和毒力基因。通过全基因组测序检测了CRKP携带基因bla 的基因组特征。通过棋盘滴定试验检测联合用药效果。结果:ST11是同源性比较的优势序列类型。儿童对头孢他啶-阿维菌素的耐药率显著高于成人,耐药基因bla 的检出率也明显高于成人(p碳青霉烯类耐药的bla 的质粒为359,625bp的Inc FII质粒,含有毒力因子、质粒复制蛋白(rep B)、稳定蛋白(par A)以及介导质粒接合转移的IV型分泌系统(T4SS)蛋白。多粘菌素B-替加环素组合与多粘菌素B-亚胺培南组合协同作用比例分别为9.0%与7.3%,无拮抗作用。结论:1、由于儿童携带金属酶的比例较高,所以对CAZ-AVI的耐药率高于成人;2、携带质粒为接合质粒,主要复制子类型为Inc F;3、多粘菌素与替加环素的联合可能更为有效。本研究有助于了解本院CRKP的流行情况及儿童与成人的显著性差异,为临床经验性使用抗生素提供新的思路。

关键词：分子流行病学全基因组测序多粘菌素B 耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌抗生素敏感性

头孢他啶/阿维巴坦治疗耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌致医院获得性肺炎的成本-效果分析

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中国药学杂志 2023年第19期58卷 1783-1788页

作者：郭晓龙李激扬徐菀佚刘书衡崔向丽首都医科大学附属北京友谊医院药学部北京100050 北京市临床药学研究所北京100050 首都医科大学药学院北京100069 中国中医科学院西苑医院药学部北京100091

目的运用药物经济学评价方法,对头孢他啶/阿维巴坦、替加环素和多黏菌素B 3种治疗方案用于治疗碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌引起的医院获得性肺炎进行成本-效果分析,为临床抗感染治疗决策提供参考。方法从医疗机构角度出发,建立决策树模... 详细信息

目的运用药物经济学评价方法,对头孢他啶/阿维巴坦、替加环素和多黏菌素B 3种治疗方案用于治疗碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌引起的医院获得性肺炎进行成本-效果分析,为临床抗感染治疗决策提供参考。方法从医疗机构角度出发,建立决策树模型,成本参数来源于北京市药品阳光采购平台,概率参数来源于已发表的文献,并进行单因素敏感性和概率敏感性分析。结果通过成本-效果分析,与替加环素治疗方案相比,多黏菌素B治疗方案的增量成本效果比为-786128.42元/质量调整生命天,为绝对劣势方案;头孢他啶/阿维巴坦的增量成本效果比为11855.75元/质量调整生命天,按照调查问卷结果所假设的意愿支付阈值比不具有成本-效果。在概率敏感性分析中,当意愿支付阈值在30000元以上时,头孢他啶/阿维巴坦具有成本-效果概率是95.1%。结论对于碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌引起的医院获得性肺炎,基于替加环素的治疗方案比头孢他啶/阿维巴坦和多黏菌素B更具有经济性,临床医生可根据患者的支付意愿酌情选择。

关键词：头孢他啶/阿维巴坦替加环素多黏菌素B 耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌医院获得性肺炎

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌临床感染的危险因素分析

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工业微生物 2023年第2期53卷 117-122页

作者：史梦麻有栋成都市第二人民医院检验科四川成都610017 西宁市第一人民医院检验科青海西宁810099

了解成都市第二人民医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(Carbapenem-resistant klebsiella pneumoniae,CRKP)感染患者的基本临床资料,对引起CRKP感染的危险因素进行详细分析,为预防CRKP提供临床依据。选取2020年7月至2022年3月在成都市第二... 详细信息

了解成都市第二人民医院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(Carbapenem-resistant klebsiella pneumoniae,CRKP)感染患者的基本临床资料,对引起CRKP感染的危险因素进行详细分析,为预防CRKP提供临床依据。选取2020年7月至2022年3月在成都市第二人民医院住院治疗的124例CRKP患者作为观察组;并随机选择同期、同等数量的对碳青霉烯类抗菌素敏感的肺炎克雷伯菌(Carbapenem-sensitive Klebsiella pneumonia,CSKP)患者124例作为对照组。比较两者的临床基本特点,并对危险因素进行全面分析。通过单因素分析发现,可能引起CRKP感染的因素有卒中、患者性别、年龄、联合用药、抗生素种类≥3、中心静脉置管术、纤维支气管镜检查伴肺泡灌洗术、气管内插管、有创手术、血液透析、机械通气;通过多因素分析发现,独立危险因素有使用抗生素种类≥3、卒中、有创手术、中心静脉置管术、机械通气。而且,CRKP感染会影响患者的治疗效果,预后变差,甚至导致死亡,使CRKP患者死亡率明显高于CSKP患者。过多的侵袭性操作、不合理使用抗生素是引发CRKP感染的主要独立危险因素,因此临床上应规范侵袭性操作,合理使用抗生素,预防CRKP爆发,降低CRKP感染风险。

关键词：耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌危险因素耐药敏感

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耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌感染的危险因素分析

中国临床药学杂志 2023年第10期32卷 728-733页

作者：尚家磊舒福杉丁元波孔令冰胡荣超刘毅兴义市人民医院兴义562400

目的调查肺炎克雷伯菌在不同感染类型中的临床分布特点,分析碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)感染的危险因素。方法对1651例肺炎克雷伯菌病例中检出的307例CRKP进行回顾性分析,采用单因素及多因素Logistic回归分析CRKP感染的危险因素。... 详细信息

目的调查肺炎克雷伯菌在不同感染类型中的临床分布特点,分析碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)感染的危险因素。方法对1651例肺炎克雷伯菌病例中检出的307例CRKP进行回顾性分析,采用单因素及多因素Logistic回归分析CRKP感染的危险因素。结果肺炎克雷伯菌主要分布科室为神经外科、重症医学科、新生儿/儿科以及呼吸内科,主要感染部位为呼吸道、泌尿系统以及血流。CRKP感染的危险因素有高血压、慢性阻塞性肺疾病、有创操作、使用免疫抑制剂、抗菌药物暴露史、感染前90 d内入住重症监护室、使用质子泵抑制剂。多因素Logistic回归分析结果表明,高血压、侵入性操作、使用免疫抑制剂、抗菌药物暴露史、感染前90 d内入住重症监护室是CRKP感染的危险因素。结论应对有CRKP感染危险因素的患者进行主动监测,对携带CRKP患者及时隔离,加强环境清洁消毒,规范抗菌药物以及免疫抑制剂的临床应用,尽量取消不必要的侵入性操作,减少CRKP院内感染的发生。

关键词：肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药机制危险因素

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药基因检测及同源性分析

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潍坊医学院学报 2023年第6期45卷 412-415页

作者：孙铭艳安丰晓王楠刘言霞吴倩倩潍坊医学院附属医院检验科山东潍坊261031

目的了解耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因及同源性分析。方法收集2020年1月~2022年12月我院临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌,VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定分析仪进行细菌鉴定及药敏检测,聚合酶链反应(PCR)检测CRKP常见的耐药... 详细信息

目的了解耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因及同源性分析。方法收集2020年1月~2022年12月我院临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌,VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定分析仪进行细菌鉴定及药敏检测,聚合酶链反应(PCR)检测CRKP常见的耐药基因,多位点序列分析(MLST)进行同源性分析。结果21株CRKP对妥布霉素的耐药率为57.1%,对环丙沙星的耐药率为71.4%,对氨曲南的耐药率为76.2%,对头孢类和氨基糖苷类耐药率均超过90%.耐药基因检测结果:13株检出bla KPC基因,11株检出bla VIM基因,10株检出bla NDM基因,5株检出OXA-48基因,未检出IMP基因。MLST分型结果为11株为ST11型,5株ST45型,ST307,ST281,ST893,ST101和ST2059各1株。结论CRKP对常用抗生素呈现较高的耐药率,bla KPC耐药基因检出率最高,MLST分型以ST11型为主,故应加强多重耐药菌的监控,控制其传播流行。

关键词：耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药基因多位点序列分型同源性

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦的耐药情况及其危险因素分析

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安徽医药 2023年第10期27卷 2103-2106页

作者：张琰徐丽婷王浩唐亚娟王立珍路小寒西安国际医学中心医院药学部陕西西安710100

目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)对头孢他啶/阿维巴坦(ceftazidime/avibactam,CZA)的耐药情况及危险因素。方法选取2019年10月至2022年5月在西安国际医学中心重症监护病房(intensive care unit,ICU)住院治疗的CRKP病人156例,根... 详细信息

目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)对头孢他啶/阿维巴坦(ceftazidime/avibactam,CZA)的耐药情况及危险因素。方法选取2019年10月至2022年5月在西安国际医学中心重症监护病房(intensive care unit,ICU)住院治疗的CRKP病人156例,根据CRKP病人是否对CZA耐药分为CZA敏感组(n=111)和耐药组(n=45)。采用微量肉汤稀释法检测CRKP对CZA的药敏情况。分析比较CRKP对CZA敏感病人和耐药病人的一般资料,多因素logistic回归分析CRKP对CZA耐药的危险因素。比较两组病人住院期间的死亡率。结果156株CRKP中111株(71.15%)对CZA敏感,45株(28.85%)对CZA耐药。两组病人在年龄、性别、身体质量指数、标本来源和基础疾病上差异无统计学意义(P>0.05)。在侵入性操作中,CZA耐药组机械通气(77.78%比55.86%)、透析(46.67%比18.02%)和手术的病人(77.78%比54.05%)比例明显高于CZA敏感组(P耐药组既往接受CZA治疗的病人比例明显高于CZA敏感组(24.44%比9.01%),差异有统计学意义(P耐药的危险因素包括透析、机械通气和既往接受CZA治疗(P耐药组中病人住院期间死亡率(28.89%)明显高于CZA敏感组(10.81%),差异有统计学意义(χ^(2)=7.78,P=0.005)。结论部分CRKP对CZA耐药,耐药病人住院期间死亡率高。透析、机械通气和既往接受CZA治疗是CRKP对CZA耐药的危险因素。

关键词：肺炎克雷伯菌抗药性细菌耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌头孢他啶阿维巴坦危险因素

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药性分析及碳青霉烯酶初筛实验的临床应用

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中国卫生检验杂志 2023年第15期33卷 1831-1834页

作者：陈福红张思琴杨玮齐艳杭州市丁桥医院杭州市中医院丁桥院区检验科浙江310021 杭州市中医院检验科

目的了解杭州市中医院临床各科室分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的检出情况及耐药特点。方法收集2016年—2022年分离自临床样本的非重复CRKP,分析这类菌株的分布特征和耐药性试验结果,采用3-氨基苯硼酸联合乙二胺四乙酸碳青霉烯酶... 详细信息

目的了解杭州市中医院临床各科室分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)的检出情况及耐药特点。方法收集2016年—2022年分离自临床样本的非重复CRKP,分析这类菌株的分布特征和耐药性试验结果,采用3-氨基苯硼酸联合乙二胺四乙酸碳青霉烯酶抑制实验检测碳青霉烯酶型,并通过胶体金免疫层析法检测其无法确定酶型的菌株。结果共检测146株CRKP,其中检出最多的是呼吸道标本,检出最多的科室为重症医学科。药敏结果显示,CRKP对β-内酰胺类、碳青霉烯类、氨曲南的耐药率均>95%,对头孢他啶/阿维巴坦的耐药率为2.74%。碳青霉烯酶初筛实验显示产A类丝氨酸酶的菌株共133株,产金属酶2株,不确定菌株11株,酶抑制剂增强试验对酶型的检出率为92.47%。结论本医疗机构CRKP形势严峻,应及时监测。本研究CRKP主要耐药机制为产碳青霉烯酶,并且以产A类丝氨酸酶为主,酶抑制剂增强试验可以检测出大部分酶型,临床实验室应合理优化碳青霉烯酶初筛实验,为临床精准用药提供直接依据。

关键词：耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药性酶抑制剂增强试验胶体金免疫层析法