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化工学报 2007年第9期58卷 2169-2177页

作者：姚善泾高栋林东强浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

混合模式吸附层析是一种新型的生物分离方法,其功能配基兼有两种或两种以上的作用模式,主要为静电和疏水相互作用。在低盐和高盐条件下,都可以实现对目标物的有效吸附,具有明显的耐盐吸附的特性,可避免对料液的额外预处理,从而提高分离... 详细信息

混合模式吸附层析是一种新型的生物分离方法,其功能配基兼有两种或两种以上的作用模式,主要为静电和疏水相互作用。在低盐和高盐条件下,都可以实现对目标物的有效吸附,具有明显的耐盐吸附的特性,可避免对料液的额外预处理,从而提高分离效率,减少分离成本,已获得一定的应用。本文对混合模式吸附技术的发展历程、类型及应用现状等进行综述,以推动该技术的发展和进一步应用。

关键词：生物分离层析混合模式耐盐吸附疏水性电荷诱导层析配基结构

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纳豆激酶集成化分离技术

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中国生物工程杂志 2008年第1期28卷 119-123页

作者：苟金霞高栋北方民族大学生命科学与工程学院银川750021 西北大学现代分离科学研究所陕西省重点实验室西安710069

综述了纳豆激酶分离纯化技术的研究现状和发展趋势。通过对常规分离技术的分析,重点讨论了集成化分离技术的应用及其优势,包括集成化双水相分配技术、扩张床吸附技术以及耐盐性混合模式吸附技术等分离方法,并指出集成化分离技术在生产... 详细信息

综述了纳豆激酶分离纯化技术的研究现状和发展趋势。通过对常规分离技术的分析,重点讨论了集成化分离技术的应用及其优势,包括集成化双水相分配技术、扩张床吸附技术以及耐盐性混合模式吸附技术等分离方法,并指出集成化分离技术在生产纳豆激酶以及其他活性蛋白方面,具有广阔的应用前景。

关键词：纳豆激酶分离纯化集成化耐盐吸附

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混合模式层析及其用于卵黄抗体分离纯化研究

混合模式层析及其用于卵黄抗体分离纯化研究

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作者：何瑜芳浙江大学

学位级别：硕士

混合模式吸附层析技术(Mixed-mode adsorption chromatography)是近年来发展的一种新型生化分离技术。混合模式吸附剂的功能配基同时含有疏水基团和离子交换基团，兼具疏水作用和静电相互作用，可以通过静电相吸来强化吸附或静电排斥来... 详细信息

混合模式吸附层析技术(Mixed-mode adsorption chromatography)是近年来发展的一种新型生化分离技术。混合模式吸附剂的功能配基同时含有疏水基团和离子交换基团，兼具疏水作用和静电相互作用，可以通过静电相吸来强化吸附或静电排斥来协助解吸。另外，配基密度通常比较高，具有典型的耐盐吸附特性，可以不需要调节原料液的离子强度直接层析分离，减少分离步骤，提高分离效率。本文重点研究了两种混合模式吸附剂—Streamline Direct HST和MEP HyperCel，考察了模型蛋白的吸附规律和影响因素，探讨了相关的吸附机理，并将混合模式吸附层析应用于卵黄抗体的分离纯化，达到了较好的分离效果。主要内容可分为以下四个方面：(1)Streamline Direct HST对模型蛋白的静态吸附。以牛血清白蛋白(BSA)和牛血红蛋白为模型蛋白，考察pH和盐浓度对Streamline Direct HST吸附蛋白质的影响。结果表明，Streamline Direct HST对蛋白质的吸附随pH的变化而变化，存在最适pH使得吸附容量最大，蛋白质分子体积的变化在一定程度上会影响吸附容量。当蛋白质与吸附剂存在静电吸引作用时，吸附过程由静电相互作用主导，吸附等温线符合Langmuir吸附方程;当存在静电排斥作用时，吸附等温线则呈现典型的多分子层吸附模式。(2)Streamline Direct HST分离卵黄抗体。结果表明，在pH4-6范围内Streamline Direct HST对卵黄稀释液中大多数蛋白质都有较强的吸附能力，盐浓度对卵黄抗体吸附的影响很小，改变pH可以实现蛋白质洗脱。由于Streamline Direct HST对卵黄抗体的选择性不高，通过改变上样pH和洗脱条件难以实现卵黄抗体的有效分离。(3)MEP HyperCel对模型蛋白的静态吸附。以溶菌酶和BSA为模型蛋白，HCIC吸附剂MEP HyperCel对蛋白质的吸附呈现复杂的规律。MEP HyperCel在pH 6-12间对溶菌酶都有吸附，吸附容量随着pH的增加而增加。结果表明，pH是影响MEP HyperCel吸附蛋白质的主要因素。MEP HyperCel对蛋白质吸附能力强，可能造成洗脱困难，实验中无法实现MEP HyperCel对血红蛋白的有效洗脱。(4)MEP HyperCel分离卵黄抗体。结果表明MEP HyperCel对卵黄抗体具有良好的吸附选择性。通过分离条件的优化，MEP HyperCel一步分离卵黄抗体纯度达到95％以上。MEP HyperCel吸附具有耐盐特性，因此可以与盐析过程相结合，盐析沉淀重新溶解后直接MEP HyperCel层析分离，电泳分析IgY纯度可达到99.8％，实现了卵黄抗体的高效分离。通过本文研究，揭示了典型混合模式吸附剂吸附蛋白质的一些规律，为开发新型混合模式吸附剂和分离过程优化提供了有益的指导。采用疏水性电荷诱导层析介质MEP HyperCel，实现了卵黄抗体分离的高效分离，单步纯化因子高，为进一步抗体分离的应用打下了一定基础。

关键词：混合模式吸附疏水性电荷诱导层析卵黄抗体耐盐吸附牛血清白蛋白牛血红蛋白溶菌酶

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