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生防放线菌153固态发酵条件的优化及其耐热力检测

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2010年第7期38卷 181-186页

作者：田晓丽赵红杰唐彩乐宗兆锋西北农林科技大学植物保护学院陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

【目的】探讨生防放线菌153的固态发酵条件,并考察其耐热力,为生防放线菌的大规模生产及活体菌剂的研制提供技术支持。【方法】将发酵物的含菌量作为筛选指标,以玉米粉、甘油、蔗糖、葡糖糖和可溶性淀粉为碳源,以小米粉、蛋白胨、酵母... 详细信息

【目的】探讨生防放线菌153的固态发酵条件,并考察其耐热力,为生防放线菌的大规模生产及活体菌剂的研制提供技术支持。【方法】将发酵物的含菌量作为筛选指标,以玉米粉、甘油、蔗糖、葡糖糖和可溶性淀粉为碳源,以小米粉、蛋白胨、酵母浸粉、黄豆粉和尿素为氮源,通过单因素试验获得适宜的碳、氮源,再采用L25(56)正交设计优化固体培养基配方,在此基础上确定固态发酵终点以及所需的接种量和种子液种龄。最后将壳聚糖、非耕作层黄土、高岭土、炉渣、碳酸钙、面粉和几丁质分别与生防放线菌153菌粉混合,55℃水浴至致死中时,测定生防放线菌153的耐热力,筛选适宜的载体。【结果】生防放线菌153固体培养基配方为:80mg/g麦麸、8mg/g玉米粉、10mg/g小米粉和2mg/g蛋白胨,初始含水量(含0.5g/L石灰的自来水)为60%,在此条件下培养,培养物的含菌量较对照增加了94.1%。生防放线菌153固态发酵培养终点为216h,接种量为20%(每100g固态培养基接种20mL种子液),种子液种龄为84h。生防菌153的适宜载体为壳聚糖和非耕作层黄土。【结论】确定了生防放线菌153的固态发酵条件,该条件可以促进生防菌153的生长产孢,并提高菌株的保存稳定性;确定了筛选生放菌153载体的方法,即55℃条件下水浴处理136min。

关键词：生防放线菌正交设计固体发酵培养基耐热力活体菌剂

热应激环境蛋鸡免疫力变化机理研究 Ⅰ免疫力、血浆皮质酮、耐热力之间的关系

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2001年第4期29卷 17-20页

作者：高玉鹏郭久荣刘斌峰杨景昆西北农林科技大学畜牧兽医学院陕西杨陵712100

选经常规免疫 ND、IBD的 30周龄健康罗曼蛋鸡 96只 ,按随机法等分为两组 ,分别置于 2个人工气候室内 ,对照组环境温度保持 2 2℃不变 ,试验组环境温度为 2 2℃ 7d,30℃ 7d,35℃ 7d,40℃ 4h(部分 1～ 43h) ,2 1.3℃ 2 2 h。在不同温度段... 详细信息

选经常规免疫 ND、IBD的 30周龄健康罗曼蛋鸡 96只 ,按随机法等分为两组 ,分别置于 2个人工气候室内 ,对照组环境温度保持 2 2℃不变 ,试验组环境温度为 2 2℃ 7d,30℃ 7d,35℃ 7d,40℃ 4h(部分 1～ 43h) ,2 1.3℃ 2 2 h。在不同温度段定期采血并作 40℃ 15只鸡致死时间 (heatstress survival time,HSST)测定。结果表明 ,135℃ 16 6 h,40℃ 4h能显著降低蛋鸡血液 T淋巴细胞百分率 ,T、B细胞转化率和 ND、IBD抗体水平。解除热应激 2 1.3℃ 2 2 h免疫指标均未恢复正常 ,ND、IBD抗体水平消减速度趋缓。2 30℃ 16 6 h,35℃ 16 6 h,40℃4h均使蛋鸡血浆皮质酮显著上升 ,2 1.3℃ 2 2 h尚未恢复正常。 3高温期蛋鸡免疫力指标下降率与其血浆皮质酮的升高百分率呈显著或极显著正相关 ,与其耐热力 (HSST)呈显著负相关。

关键词：热应激蛋鸡免疫力血浆皮质酮耐热力免疫功能

高温胁迫法对球孢白僵菌HFW-05耐热力及毒力的提高

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华北农学报 2010年第5期25卷 215-219页

作者：王刚曹伟平王金耀王容燕杜立新宋健董建臻冯书亮河北农业大学植物保护学院河北保定071000 河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心河北保定071000

为了检测及提高球孢白僵菌HFW-05对高温环境的耐受力,将浓度为108孢子/mL的孢悬液,在48℃下恒温振荡水浴,不同时间取出测定孢子存活率,同时将处理液接种制备孢子粉,测定下一代的产孢量、疏水性、不同温度下的萌发中时、生长速率、毒力... 详细信息

为了检测及提高球孢白僵菌HFW-05对高温环境的耐受力,将浓度为108孢子/mL的孢悬液,在48℃下恒温振荡水浴,不同时间取出测定孢子存活率,同时将处理液接种制备孢子粉,测定下一代的产孢量、疏水性、不同温度下的萌发中时、生长速率、毒力以及胞外蛋白酶和几丁质酶的活性。结果表明,高温胁迫处理能够在一定程度上提高HFW-05菌株的耐热力。其中处理120min孢子存活率可达到80%以上,处理110min在27℃下产孢量是对照的3倍多,两者的疏水性均显著高于对照。各处理一代菌株分生孢子在32℃下萌发中时(GT50)均显著低于对照,在32,34℃下胞外蛋白酶和几丁质酶活性高于对照,但各处理间差异不显著。以二龄初小菜蛾为供试幼虫,在27℃下,各处理的毒力仍均低于未处理对照,但在32℃下均显著高于对照,在34℃下对照及处理分生孢子均无杀虫活性。

关键词：高温胁迫球孢白僵菌耐热力

热应激环境蛋鸡免疫力变化机理研究Ⅱ 免疫力、氧自由基代谢、耐热力间的关系

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2001年第5期29卷 33-36页

作者：高玉鹏郭久荣刘斌峰西北农林科技大学畜牧兽医学院陕西杨陵712100

选经常规免疫 ND,IBD的 30周龄健康罗曼蛋鸡 96只 ,按随机法等分为 2组 ,分置于人工气候室内 ,对照组环境温度 2 2℃不变 ,试验组环境温度为 2 2℃ ,16 6 h→ 30℃ ,16 6 h→ 35℃ ,16 6 h→ 40℃ ,4h→ 2 1.3℃ ,2 2 h(15只 40℃致死试... 详细信息

选经常规免疫 ND,IBD的 30周龄健康罗曼蛋鸡 96只 ,按随机法等分为 2组 ,分置于人工气候室内 ,对照组环境温度 2 2℃不变 ,试验组环境温度为 2 2℃ ,16 6 h→ 30℃ ,16 6 h→ 35℃ ,16 6 h→ 40℃ ,4h→ 2 1.3℃ ,2 2 h(15只 40℃致死试验 )温度。定期采血或剖检测定有关指标。结果显示 :1血浆 SOD,GSH- Px在 30℃ 16 6 h显著升高 ,35℃ 16 6 h,40℃显著下降 ,2 1.3℃ 2 2 h下降。40℃高温致死后肝组织 MDA、自由基水平显著增加。2高温致死肝组织氧自由基代谢指标 MDA、自由基水平与不同温段免疫力指标、HSST均呈显著或不显著负相关 ;血浆 GSH- Px,SOD,MDA在 35℃ 16 6 h,40℃ 4h环温下与 HSST呈显著或不显著正相关。 3较长高温应激蛋鸡免疫力指标下降愈大的个体 ,其机体氧自由基代谢抑制程度愈强 ,耐热力愈差。

关键词：热应激蛋鸡免疫力氧自由基代谢耐热力

不同培养条件下蜡蚧轮枝菌VL17分生孢子的耐热力及孢壁疏水蛋白含量的分析

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沈阳农业大学学报 2012年第2期43卷 221-224页

作者：谷祖敏韩金栋谢阳刘周成冯俊义颜克成沈阳农业大学植物保护学院沈阳110161

比较了不同培养条件下蜡蚧轮枝菌VL17分生孢子耐热力及其孢壁疏水蛋白（FAE）含量的变化,结果表明：葡萄糖为碳源,酵母浸膏为氮源时孢子表现出较强的耐热力,残存指数（Is）分别为0.72和0.69;而麦芽糖为碳源,酵母浸膏为氮源时,FAE蛋白含... 详细信息

比较了不同培养条件下蜡蚧轮枝菌VL17分生孢子耐热力及其孢壁疏水蛋白（FAE）含量的变化,结果表明：葡萄糖为碳源,酵母浸膏为氮源时孢子表现出较强的耐热力,残存指数（Is）分别为0.72和0.69;而麦芽糖为碳源,酵母浸膏为氮源时,FAE蛋白含量高达28.7μg·mg-1和24.7μg·mg-1;培养基中添加50μg·mL-1Mn2＋时所产孢子的耐热力最强,Is为0.68,而Zn2＋浓度50μg·mL-1的培养基所产孢子FAE蛋白的含量最高,为19.9μg·mg-1;培养基pH值在6~7时所产孢子的耐热力及FEA蛋白含量都处于较高水平,Is值为0.51,FAE含量为24.3μg·mg-1;30℃培养条件下所获孢子的耐热力显著高于常温所产孢子,Is值为0.57,但FAE蛋白含量较常温所产孢子略有下降。

关键词：蜡蚧轮枝菌残存指数耐热力疏水蛋白

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蛋鸡耐热力与体温及体温变化的关系

中国畜牧杂志 1996年第2期32卷 12-14页

作者：刘春燕吴中红王新谋安永义李震钟山东莱阳农学院动物科学系中国农业大学动物科技学院

２０只京白蛋鸡置于人工气候室内进行升温处理，研究了环境温度对鸡体温的影响和耐热力与体温及体温变化的关系。结果表明：在适宜湿度下，３２℃高温持续８小时，回的体温极显著升高（ｌｌ＜０．０１）１３８Ｃ以下高温持续８小时，鸡... 详细信息

２０只京白蛋鸡置于人工气候室内进行升温处理，研究了环境温度对鸡体温的影响和耐热力与体温及体温变化的关系。结果表明：在适宜湿度下，３２℃高温持续８小时，回的体温极显著升高（ｌｌ＜０．０１）１３８Ｃ以下高温持续８小时，鸡的死亡率占１０％；４０Ｃ高温持续不到３０小时，鸡的死亡率为６５％，不到４０小时时，死亡率为８５％，而当４０℃高温持续４０小时以上时，对绝大部分鸡（９５％）都是致死性的。鸡的耐热力与非致死环境温度下的体温呈正相关；与初次经受热应激时的体温升高幅度呈正相关；与再次经受热应激时的体温升高幅度呈负相关。

关键词：卵用鸡耐热力体温体温变化致死时间鸡病

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早期热习服对肉鸡耐热力发育的影响研究进展

中国畜牧杂志 2008年第3期44卷 55-59页

作者：邓胜齐顾宪红中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室北京100094

从早期热习服的概念、耐热力的评价指标以及早期热习服的时机出发,总结与分析了早期热习服对肉鸡后期耐热力形成的影响规律,试图探索出早期热习服提高肉鸡后期耐热力的机理。

关键词：早期热习服耐热力肉鸡

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球孢白僵菌菌株耐热力与贮藏稳定性的关系

中国生物防治 1999年第4期15卷 162-165页

作者：王成树王四宝樊美珍李增智安徽农业大学经济昆虫菌物研究所合肥230036

球孢白僵菌不同菌株孢子在２５℃恒温贮藏条件下，孢子活率表现为不同程度的梯度下降。孢子贮藏的半衰期与对应菌株在５５℃下水浴１小时的耐热力呈显著正相关（ｒ＝０．９０３５；ｒ０．０１＝０．８７４５），这说明通过菌株耐热... 详细信息

球孢白僵菌不同菌株孢子在２５℃恒温贮藏条件下，孢子活率表现为不同程度的梯度下降。孢子贮藏的半衰期与对应菌株在５５℃下水浴１小时的耐热力呈显著正相关（ｒ＝０．９０３５；ｒ０．０１＝０．８７４５），这说明通过菌株耐热力的测定，可以间接反映孢子的贮藏稳定性。

关键词：球孢白僵菌耐热力贮藏半衰期载体

球孢白僵菌HFW-05对粉虱、棉铃虫侵染方式及高温胁迫法提高菌株耐热力研究

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球孢白僵菌HFW-05对粉虱、棉铃虫侵染方式及高温胁迫法提高菌株耐...

作者：王刚河北农业大学

学位级别：硕士

球孢白僵菌(Beauveria bassiana (Balsamo)Vuillemin)是目前国内外应用最广泛的昆虫病原真菌之一,能够侵染15个目149个科的700多种昆虫,并可在田间形成昆虫流行病,防治效果持久。HFW-05菌株是河北省农科院植保所杀虫微生物实验室分离筛... 详细信息

球孢白僵菌(Beauveria bassiana (Balsamo)Vuillemin)是目前国内外应用最广泛的昆虫病原真菌之一,能够侵染15个目149个科的700多种昆虫,并可在田间形成昆虫流行病,防治效果持久。HFW-05菌株是河北省农科院植保所杀虫微生物实验室分离筛选出的,对小菜峨、粉虱具有很高的杀虫活性,在前期的工作基础上,本研究扩大了该菌株的杀虫谱,明确了HFW-05菌株对烟粉虱和棉铃虫的不同侵染方式,通过合适的高温胁迫处理方法,在一定程度上提高了HFW-05菌株对较高温度的耐受力,并得到了耐热性状较稳定的新菌株。通过对烟粉虱、小菜蛾、棉铃虫、东亚飞蝗和蛴螬类(华北大黑鳃金龟、暗黑鳃金龟和铜绿丽金龟)进行室内生物测定,其中烟粉虱采用浸渍法,小菜蛾采用喷雾法,棉铃虫采用浸渍和饲喂两种方法,东亚飞蝗采用背板点滴法,蛴螬采用拌土法,表明HFW-05菌株对以上害虫均有毒力,除棉铃虫外,其余供试昆虫均可由表皮侵染,其中对烟粉虱和小菜蛾的效果最好,LC50分别为4.20×105孢子/mL和1.59×106孢子/mL,且田间小区试验防效均可达80%;HFW-05菌株对其他几种昆虫的作用时间较长,以浓度为107孢子/mL的孢悬液接种,9d时东亚飞蝗2龄蝗蝻的死亡率为62.67%;蛴螬类害虫中,对14d铜绿异丽金龟、12d华北大黑鳃金龟和9d暗黑鳃金龟幼虫的校正死亡率分别为60%、46%和40.74%。对于棉铃虫的胃毒作用较明显,6d后的校正死亡率为72%,且对试虫的体重和取食量有显著的抑制作用,但通过表皮侵染效果不佳。组织学研究表明,该菌株对烟粉虱主要从体壁接触侵染,菌丝优先从腹部侵入,也最早从腹部穿出体表;但未观察到从体壁侵入棉铃虫的现象,而通过胃毒侵染在消化道内发现分生孢子,并萌发生长至体内充满菌丝时导致试虫死亡。已报道的白僵菌对棉铃虫的侵染方式多为体壁侵染,这一现象进一步说明白僵菌对寄主侵入方式因昆虫的种类、虫态、环境条件等不同而有差别。为了提高HFW-05菌株对较高温度环境的适应性,采用高温胁迫的方法对HFW-05菌株进行了定向驯化。选用48℃下分别水浴处理30、40、50、60、70、80、90、100、110、120min,以孢子残存率、产孢量、生长速率、萌发中时、对小菜蛾的毒力以及产生的胞外蛋白酶和几丁质酶的活性为指标,将胁迫后一代中耐热性较好的处理以相同的处理方式连续胁迫至第8代,通过比较各测定指标,结果表明在48℃下处理60和110min并连续胁迫至第8代时菌种的耐热性最好,萌发率、产孢量及在较高温度环境下对小菜蛾的毒力均显著高于对照菌株。将筛选出的耐热菌株和对照菌株同时在30℃下继代培养,5个世代后30℃下对照菌株的萌发率仅为15%,而耐热菌株的萌发率均达50%;对照菌株对小菜蛾致死率极低,耐热菌株在30℃和模拟田间环境的条件下对小菜蛾校正死亡率均在50%以上,32℃下也有30%以上的校正死亡率。本研究表明,合适的热处理方式可以在较大程度上提高白僵菌的耐热性,为解决白僵菌在田间高温环境下应用具有局限性的问题提供了科学依据。

关键词：球孢白僵菌杀虫谱寄主侵染耐热力