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分泌抗甘薯羽状斑驳病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株构建及抗体初步应用

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生物工程学报 1992年第4期8卷 401-403页

作者：李汝刚薛爱红朱笑梅蔡少华中国农业科学院生物技术研究中心

甘薯羽状斑驳病毒(Sweet Potato Feathery Mottle Virus,SPFMV),粒体条状,长800—850nm,不仅通过甘薯块根传播,而且被多种蚜虫非持久性传播,在世界甘薯产区均有发生,引起甘薯叶片明脉,脉带。褪绿斑及紫色羽状纹等症状,是我国甘薯产区的... 详细信息

甘薯羽状斑驳病毒(Sweet Potato Feathery Mottle Virus,SPFMV),粒体条状,长800—850nm,不仅通过甘薯块根传播,而且被多种蚜虫非持久性传播,在世界甘薯产区均有发生,引起甘薯叶片明脉,脉带。褪绿斑及紫色羽状纹等症状,是我国甘薯产区的主要病毒之一。

关键词：甘薯羽状斑驳病毒单克隆抗体

甘薯羽状斑驳病毒cDNA探针的克隆及其应用

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微生物学报 1992年第4期32卷 242-246页

作者：邱并生赵丰王小风田波李汝刚蔡少华中国科学院微生物研究所北京100080 中国农业科学院生物技术中心北京100081

从表现病毒症状的甘薯叶片中直接提取甘薯羽状斑驳病毒(sweet Potato Feathery Mo-ttle Virus,SPFMV),用酚-SDS-蛋白酶 K 法提取 SPFMV RNA,以 Oligo(dT)作引物合成cDNA。以质粒 pUC19为载体,转化 *** DH5α,筛选出插入片段长度为1.9kb... 详细信息

从表现病毒症状的甘薯叶片中直接提取甘薯羽状斑驳病毒(sweet Potato Feathery Mo-ttle Virus,SPFMV),用酚-SDS-蛋白酶 K 法提取 SPFMV RNA,以 Oligo(dT)作引物合成cDNA。以质粒 pUC19为载体,转化 *** DH5α,筛选出插入片段长度为1.9kb 的阳性克隆,以此制备探针,与 SPFMV(RC 株)感染的巴西牵牛(Ipomoca setosa)和牵牛(***)叶片总核酸抽提液进行斑点杂交呈阳性反应。^(32)P 和生物素标记的 cDNA 探针杂交试验均得到理想结果。

关键词： cDNA克隆甘薯羽状斑驳病毒

甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)和矮化退绿病毒(SPCSV)的双重RT-PCR检测技术体系构建

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沈阳农业大学学报 2018年第6期49卷 724-729页

作者：黄广学孟利前朱建晨张进李庞博肖海峻北京农业职业学院北京102442

在大田生产中,甘薯极易受到甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus, SPFMV)和甘薯矮化退绿病毒(sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)的混合侵染,导致甘薯产量和品质严重下降,因此构建能同时检测SPFMV和SPCSV两种... 详细信息

在大田生产中,甘薯极易受到甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus, SPFMV)和甘薯矮化退绿病毒(sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)的混合侵染,导致甘薯产量和品质严重下降,因此构建能同时检测SPFMV和SPCSV两种病毒的检测技术体系对甘薯病毒病(sweet potato virus disease,SPVD)的预防具有重要意义。RT-PCR病毒检测技术具有灵敏度高、特异性强的优点。针对SPFMV和SPCSV病毒分别设计4对和3对特异性引物,通过单一RT-PCR检测技术筛选出特异性强的引物和最佳退火温度;在双重RT-PCR检测体系中,针对SPFMV和SPCSV两种病毒的引物浓度组合设置5个处理,优化双重RT-PCR病毒检测技术体系。单一RT-PCR检测结果表明,SPFMVS2/A2和SPCSVS2/A2引物的特异性最强,目的片段大小为461bp,对于SPCSV病毒来说,SPCSVS2/A2引物的特异性最强,目的片段大小为304bp,最佳退火温度为56℃;在双重RT-PCR检测技术体系中,SPFMV/SPCSV的引物组合浓度比为1∶3时,目标片段扩增效果最好。对两种病毒最低检测浓度的测试结果表明,SPFMV和SPCSV两种病毒RNA的最低检测浓度相当于模板RNA浓度的10-4μL。双重RT-PCR检测技术体系的构建,为大田生产中受SPFMV和SPCSV共侵染的甘薯病毒病的预防提供技术支持。

关键词：甘薯羽状斑驳病毒矮化退绿病毒双重RT-PCR 检测技术

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高效价甘薯羽状斑驳病毒抗血清的制备

中国病毒学 1994年第2期9卷 151-156页

作者：孟清张鹤龄宋伯符庞瑞杰邢继英杨永嘉内蒙古大学生物系国际马铃薯中心驻京办事处徐州甘薯研究中心

用嫁接方法将甘薯羽状斑驳病毒（ＳＰＦＭＶ）接种到Ｉ．ｓｅｔｏｓａ上扩繁，以０．２ｍｏｌ／ＬｐＨ７．２ＰＢＫ缓冲液、垫层差速离心、蔗糖密度梯度离心提取纯化ＳＰＦＭＶ。纯化的ＳＰＦＭＶＯＤ２６０／２８０的比值为１．２５。... 详细信息

用嫁接方法将甘薯羽状斑驳病毒（ＳＰＦＭＶ）接种到Ｉ．ｓｅｔｏｓａ上扩繁，以０．２ｍｏｌ／ＬｐＨ７．２ＰＢＫ缓冲液、垫层差速离心、蔗糖密度梯度离心提取纯化ＳＰＦＭＶ。纯化的ＳＰＦＭＶＯＤ２６０／２８０的比值为１．２５。将纯化的ＳＰＦＭＶ免疫家兔制备抗血清，在环状沉淀和微量沉淀试验中，用提纯病毒测定抗血清的效价均为１：４０９６；以ＳＰＦＭＶ－ＩｇＧ为第一抗体，应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对甘薯和Ｉ．ｓｅｌｏｓａ叶片中的ＳＰＦＭＶ分别作了测定。

关键词：甘薯羽状斑驳病毒抗血清制备

甘薯羽状斑驳病毒的RT-PCR检测技术构建

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分子植物育种 2019年第13期17卷 4302-4306页

作者：肖海峻孟利前朱建晨张进李庞博黄广学北京农业职业学院

随着现代分子生物学技术的发展,反转录聚合酶链式反应技术(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)在甘薯病毒检测上的应用越来越广泛,其有灵敏度高、特异性强等优点,采用该技术可检测出甘薯组织中含量极低的病毒RN... 详细信息

随着现代分子生物学技术的发展,反转录聚合酶链式反应技术(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)在甘薯病毒检测上的应用越来越广泛,其有灵敏度高、特异性强等优点,采用该技术可检测出甘薯组织中含量极低的病毒RNA。甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus, SPFMV)是导致甘薯发生病害的主要病毒之一,为建立甘薯SPFMV快速检测技术,更好地防止该病毒的发生,本研究根据NCBI GenBank中收录的甘薯羽状斑驳病毒外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计了4对特异性引物,使用天根生化科技(北京)有限公司生产的植物总RNA提取试剂盒、FastQuant cDNA第一链合成试剂盒和2×Taq PCR MasterMix试剂盒,完成特异性引物的筛选并设置不同的退火温度对PCR扩增体系进行优化,确定了甘薯羽状斑驳病毒的RT-PCR检测技术体系。该方法的建立旨在为生产上甘薯SPFMV病毒的快速检测提供技术支持。

关键词：甘薯(Ipomona batatas) 羽状斑驳病毒 RT-PCR检测技术

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甘薯羽状斑驳病毒的分离和提纯

江苏农业学报 1994年第1期10卷 47-49页

作者：朱作为薛启汉杨永嘉邢继英江苏省农业科学院遗传生理研究所中国甘薯研究中心

甘薯羽状斑驳病毒的分离和提纯朱作为，薛启汉，杨永嘉，邢继英关键词；提纯；甘薯羽状斑驳病毒甘纂羽状斑驳病毒（ＳＰＦＭＶ）用马铃薯Ｙ病毒组，它所引起的病害是甘薯病毒病中分布最广、危害最严重的一种。对它的提纯研究已有报道Ｄ... 详细信息

甘薯羽状斑驳病毒的分离和提纯朱作为，薛启汉，杨永嘉，邢继英关键词；提纯；甘薯羽状斑驳病毒甘纂羽状斑驳病毒（ＳＰＦＭＶ）用马铃薯Ｙ病毒组，它所引起的病害是甘薯病毒病中分布最广、危害最严重的一种。对它的提纯研究已有报道Ｄ””’，但步骤较多，耗时较长，并且...

关键词：提纯甘薯羽状斑驳病毒

甘薯病毒病的研究Ⅰ甘薯羽状斑驳病毒的分离、鉴定

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植物病理学报 1992年第4期22卷 319-322页

作者：李汝刚朱笑梅薛爱红蔡少华王小凤中国农科院生物技术研究中心中国科学院微生物研究所

本文从寄主范旧,蚜传特性、病毒颗粒形态、免疫电镜等方面对嫁接获得的甘薯羽状斑驳病毒廊坊分离物(SPFMV—LF)进行了鉴定,并和SPFMV—RC(美国株)进行了实验比较。SPFMV—LF易汁液摩擦传播和嫁接传播,并以蚜虫非持久性传播,SPFMV—LF系... 详细信息

本文从寄主范旧,蚜传特性、病毒颗粒形态、免疫电镜等方面对嫁接获得的甘薯羽状斑驳病毒廊坊分离物(SPFMV—LF)进行了鉴定,并和SPFMV—RC(美国株)进行了实验比较。SPFMV—LF易汁液摩擦传播和嫁接传播,并以蚜虫非持久性传播,SPFMV—LF系统侵染巴西牵牛(Ipomoea setosa)、牵牛(***);不侵染Chenopodium quinoa、***-ranticolor、Nicotiana benthamiana及其它烟草。尚未发现其局部斑寄主。SPFMV—LF及SPFMV—RC感染***后引起相似的症状,但感染***后症状差别较大。病毒颗粒长860—830nm,经两次蔗糖垫超速离心从SPFMV—LF感染的***叶片提取病毒并在BALB/C小鼠中制备抗SPFMV—LF的腹水多克隆抗体,免疫电镜表明,SPFMV—LF的抗体和SPFMV—RC株系有反应。上述实验结果表明SPFMV—LE是SPFMV的一个株系,但不同于SPFMV—RC。

关键词：甘薯病毒病羽状斑驳病毒鉴定

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制备免疫吸附电镜检测甘薯羽状斑驳病毒样品

植物病理学报 1995年第3期25卷 270-270页

作者：孟清解峰张鹤龄内蒙古大学生物系呼和浩特010021

甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)可经蚜虫、摩擦、嫁接方式传播,是Y病毒组的一个成员。受此病毒感染的甘薯叶片上形成羽状褪绿斑,脉间褪绿斑点以及紫色环斑,有的品种出现紫色条纹。在甘薯块根上,有的呈严... 详细信息

甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)可经蚜虫、摩擦、嫁接方式传播,是Y病毒组的一个成员。受此病毒感染的甘薯叶片上形成羽状褪绿斑,脉间褪绿斑点以及紫色环斑,有的品种出现紫色条纹。在甘薯块根上,有的呈严重纵向褐色龟裂,有的呈横向螺纹状木质化,有的块根内部形成木栓化,是危害甘薯最严重的病毒病害,可使甘薯严重退化及减产。无论是甘薯的抗病毒育种、病毒病害的防治,还是脱毒、无病毒甘薯种薯生产都离不开病毒的检测。灵敏的免疫吸附电镜(ISEM)检测方法被应用于各种病毒的检测中。

关键词：甘薯羽状斑驳病毒免疫吸附电镜病毒检测

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甘薯羽状斑驳病毒分子生物学研究概况

山东农业大学学报（自然科学版） 2001年第4期32卷 539-543页

作者：王升吉尚佑芬杨崇良李长松赵玖华路兴波孙红炜山东省农业科学院植物保护研究所山东济南250100

近些年来甘薯羽状斑驳病毒 (SPFMV)分子生物学有了较深入的研究。如整个基因组的全序列、整个基因组作为一个可译框架 (ORF)的某些精细结构和特点、各个功能蛋白的结构和功能 (如蚜传机理 )、基因组组分与其它马铃薯Y病毒属 (PVY)成员... 详细信息

近些年来甘薯羽状斑驳病毒 (SPFMV)分子生物学有了较深入的研究。如整个基因组的全序列、整个基因组作为一个可译框架 (ORF)的某些精细结构和特点、各个功能蛋白的结构和功能 (如蚜传机理 )、基因组组分与其它马铃薯Y病毒属 (PVY)成员的同源性比较、该病毒在PVY属病毒成员的分类地位等都有所涉及。了解这些为利用分子生物学手段对该种病毒进行鉴定、检测和加强抗SPFMV病毒基因工程的研究。

关键词：甘薯羽状斑驳病毒分子生物学基因组多聚蛋白