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美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位基因表达及其产物的纯化

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动物医学进展 2006年第11期27卷 76-80页

作者：丛晓燕李俊吴家强张祯涛赵鸿雁曹帅王文志王金宝莱阳农学院动物科技学院山东青岛266109 山东省农科院畜牧兽医研究所山东济南250100 山东省畜牧兽医总站山东济南250100

对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究。将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入***21(DE3)细胞中,成功表达了重组蛋白GST-N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrap FF纯化试... 详细信息

对原核中以包涵体形式高效表达的美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段进行了变性、复性与纯化研究。将美洲型PRRSV重组质粒pGEX-6P-1-N转化入***21(DE3)细胞中,成功表达了重组蛋白GST-N,超声裂解复性后目的蛋白经GSTrap FF纯化试剂盒纯化后,纯度可达90%以上。将欧洲型PRRSV重组质粒PQE30-N转化入***15细胞中表达了重组蛋白His-N。超声裂解后目的蛋白经HisTrapHP蛋白纯化试剂盒纯化后,纯度可达95%以上。Western blot结果表明,两种蛋白分别被美洲型和欧洲型PRRSV阳性血清识别。纯化出的大量美洲型与欧洲型PRRSV特异N蛋白抗原表位区段,为PRRSV的鉴别诊断提供了抗原基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型欧洲型 N蛋白抗原多肽原核表达纯化

猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型RT-LAMP检测方法建立

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中国动物检疫 2015年第2期32卷 57-62页

作者：蒲静汪琳尹羿柏亚铎任彤张伟高志强乌日古玛拉时培蛟肖春芳北京出入境检验检疫局北京100113

本研究针对猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型ORF6基因的6个区域,利用2对引物建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-LAMP快速检测方法,该方法具有高灵敏度,高特异性的优点,在2小时左右即可得出结果,其灵敏度与PRRSV荧光RT-PCR检测方法相近,... 详细信息

本研究针对猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型ORF6基因的6个区域,利用2对引物建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-LAMP快速检测方法,该方法具有高灵敏度,高特异性的优点,在2小时左右即可得出结果,其灵敏度与PRRSV荧光RT-PCR检测方法相近,高于普通RT-PCR检测方法。将灭活的猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型培养物作10倍系列稀释,结果显示建立的荧光RT-PCR的检测极限可达10-7,RT-PCR检测方法的检测极限为10-5,RT-LAMP检测方法达到10-8,表明建立的RT-LAMP检测方法非常灵敏,可用于检测猪组织样本中的美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型 RT-LAMP

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美洲型组织胞浆菌病1例

中国实用内科杂志 1991年第8期 420-420页

作者：高熙智山东省临沂地区人民医院内科 276003

患者男,56岁。因发热、咳嗽及胸痛2天,于1989年11月5日入院。于入院2天前,始感发热、乏力、咳嗽,咳自粘痰带血丝,伴右胸痛,深吸气时加重。某医院胸透诊为右肺炎症,予丁胺卡那霉索、螺旋霉索等治疗无效。查体:体温37.6℃,脉搏72次/分,呼吸18

关键词：美洲型组织胞浆菌病胞浆细胞质

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抗欧洲型和美洲型PRRSV抗体的鉴别

畜牧兽医科技信息 2003年第4期 37-37页

作者：牛明福

PRRSV有欧洲型和美洲型两种毒株已众所周知,但能检测和鉴别这两种毒株所产生抗体的方法还未见有报道。Seuberlish.T等建立了一种双重ELISA同时检测并鉴别这两种抗体。这种串联的PRRS ELISA是用在***中表达的亲和纯化的重组核衣壳蛋白构... 详细信息

PRRSV有欧洲型和美洲型两种毒株已众所周知,但能检测和鉴别这两种毒株所产生抗体的方法还未见有报道。Seuberlish.T等建立了一种双重ELISA同时检测并鉴别这两种抗体。这种串联的PRRS ELISA是用在***中表达的亲和纯化的重组核衣壳蛋白构建的。在本试验中,用IDEXX Herdchek PRRS ELISA试剂盒和间接免疫荧光技术

关键词：美洲型欧洲型敏感性特异性 PRRSV 抗体

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猪繁殖与呼吸综合征的流行、诊断与防制

北方牧业 2024年第4期 31-31页

作者：张建锋镇平县农业综合行政执法大队河南镇平474250

1病原猪繁殖与呼吸综合征又被称为蓝耳病,主要是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种免疫抑制性传染性疾病。该病毒属于套式病毒目动脉炎病毒科,是一种正链RNA病毒,直径约为50~70纳米,有囊膜。猪繁殖与呼吸综合征病毒包括欧洲型和美洲... 详细信息

1病原猪繁殖与呼吸综合征又被称为蓝耳病,主要是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种免疫抑制性传染性疾病。该病毒属于套式病毒目动脉炎病毒科,是一种正链RNA病毒,直径约为50~70纳米,有囊膜。猪繁殖与呼吸综合征病毒包括欧洲型和美洲型。因为病毒出现基因变异、病毒基因重组以及基因突变等,导致猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因变异较大,尤其是一些毒株的抗原性和毒力存在较大的差异。从当前我国发现的猪繁殖与呼吸综合征病毒的存在情况来看,主要为美洲型。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒性传染性疾病美洲型正链RNA病毒免疫抑制蓝耳病动脉炎病毒科基因变异

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简讯

中国兽医杂志 1998年第3期 56-57页

作者：编辑部

简讯★中国科协推广普及项目——科技录像片《猪及其产品的检疫检验》１９９７年１２月１９日通过了由中国畜牧兽医学会主持的以中国农科院研究员刘瑞三先生为组长的专家鉴定。该片１９９６年８月立项，１９９７年４月完成，片长４３分... 详细信息

简讯★中国科协推广普及项目——科技录像片《猪及其产品的检疫检验》１９９７年１２月１９日通过了由中国畜牧兽医学会主持的以中国农科院研究员刘瑞三先生为组长的专家鉴定。该片１９９６年８月立项，１９９７年４月完成，片长４３分钟。既具有科技性，又具通俗性和实用...

关键词：新型疫苗专家进口兽药流感病毒感冒病毒科技性检疫检验刘瑞三兽医学动物医学美洲型中西兽医结合河豚毒素河鲀毒素鱼毒畜禽品种中国畜牧兽医学会

反向遗传学技术应用于猪繁殖与呼吸综合征病毒研究的进展

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中国预防兽医学报 2019年第10期41卷 1072-1076页

作者：郑海红孙竹筠张可煜高飞韦祖樟中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcinere productive and respiratory syndrome virus, PRRSV)属于动脉炎病毒科(Arteriviridae)、动脉炎病毒属(Arterivirus)成员。根据血清学和遗传特性的差异,可将PRRSV分为欧洲型(1型)和美洲型(2型)[1]。随着反向遗传操作系统的建立,使对RNA病毒基因组在其cDNA分子水平上进行体外人工操作成为可能,如对基因进行点突变、缺失、插入、颠换、转位和互补等改造。近年来,科学家通过对PRRSV基因组的反向遗传操作[2-6],在研究PRRSV的基因复制、亚基因组转录与表达调控机理、PRRSV与宿主间的相互作用关系以及PRRSV用于异源基因表达载体来开发抗病毒疫苗等研究,取得了一些显著成果。本文就应用反向遗传学技术来研究PRRSV的进展报告做一综述。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作系统动脉炎病毒属遗传特性反向遗传学技术美洲型 RNA病毒基因复制

欧共体关于防止植物有害生物传入或扩散的理事会指令性附件Ⅰ

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植物检疫 1995年第4期 253-256页

欧共体关于防止植物有害生物传入或扩散的理事会指令性附件Ⅰ１欧共体所有成员国禁止传入和扩散的有害生物１．１欧共体所有成员国内无分布的有害生物１．１．１各虫态的昆虫、螨、线虫１．长翅卷蛾属（非欧洲种）Ａｃｌｅｒｉｓｓｐｐ... 详细信息

欧共体关于防止植物有害生物传入或扩散的理事会指令性附件Ⅰ１欧共体所有成员国禁止传入和扩散的有害生物１．１欧共体所有成员国内无分布的有害生物１．１．１各虫态的昆虫、螨、线虫１．长翅卷蛾属（非欧洲种）Ａｃｌｅｒｉｓｓｐｐ．２．菊花潜叶蝇Ａｍａｕｒｏｍｙｚ...

关键词：有害生物昆虫线虫蠕虫白带绕实蝇樱桃实蝇类枝原体类菌原体菜豆金色花叶病毒南瓜卷叶病毒马铃薯病毒美洲型虫态植物机械元件附件

PRRSV河南株ORF7基因的克隆表达及条件优化

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河南农业科学 2011年第1期40卷 136-140页

作者：刘明张改平肖治军郭军庆乔松林王丽史西保刘运超游雷鸣王爱萍郑州大学生物工程系河南郑州450001 河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室河南郑州450002

从猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)河南分离株(HN07-1、HN07-2)的细胞培养物中提取RNA,根据参考株IAF-exp91 N蛋白基因序列设计出2对引物,成功克隆出ORF7全长基因,并连接至pMD-19T载体。基因测序结果表明,2株PRRSV河南分离株ORF7基因序... 详细信息

从猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)河南分离株(HN07-1、HN07-2)的细胞培养物中提取RNA,根据参考株IAF-exp91 N蛋白基因序列设计出2对引物,成功克隆出ORF7全长基因,并连接至pMD-19T载体。基因测序结果表明,2株PRRSV河南分离株ORF7基因序列完全相同;该序列与HB-4(hs)同源性为100%,与标准美洲株VR-2332和我国早期分离的BJ-4株同源性为93.8%。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1后,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并对表达条件进行优化。SDS-PAGE和Western-blot结果表明,成功表达了约40 kD的融合蛋白;使用1.0 mmol/L的IPTG在2×YT培养基中诱导8 h可获得最大表达量。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征反转录克隆表达 Western-blot 美洲型