检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

罗布麻宁对二氧化硅诱导矽肺大鼠的干预作用

中华劳动卫生职业病杂志 2023年第10期41卷 801-807页

作者：刘芳贾强厉铭宋招远胡晨阳薄存香山东省职业卫生与职业病防治研究院毒理室山东第一医科大学(山东省医学科学院)济南250062

目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶(NOX)抑制剂罗布麻宁对二氧化硅(SiO_(2))诱导的大鼠矽肺模型的干预作用,并探讨其作用机制。方法:于2021年10月,将24只SPF级SD雄性大鼠按随机数字表法分为对照组、矽肺模型组、罗布麻宁... 详细信息

目的:探讨烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶(NOX)抑制剂罗布麻宁对二氧化硅(SiO_(2))诱导的大鼠矽肺模型的干预作用,并探讨其作用机制。方法:于2021年10月,将24只SPF级SD雄性大鼠按随机数字表法分为对照组、矽肺模型组、罗布麻宁干预组,每组8只。采用一次性气管滴注SiO_(2)的方法染尘,罗布麻宁干预组大鼠于处理后第2天开始腹腔注射罗布麻宁50 mg/kg,3次/周。于28 d后处死大鼠,取肺组织称重后计算肺系数,苏木精-伊红染色和Masson染色分别观察各组大鼠肺组织病理学变化。检测肺组织NOX、活性氧(ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及丙二醛(MDA)水平;酶联免疫吸附试验法测定肺组织白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达;碱水解法检测羟脯氨酸(HYP)水平;蛋白免疫印迹法检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、E-钙黏蛋白(E-cad)及α-平滑肌蛋白(α-SMA)的表达。结果:与对照组相比,矽肺模型组大鼠体重降低,肺组织出现明显的炎性浸润及纤维化,肺系数、IL-1β、IL-6、TNF-α及TGF-β1水平均明显升高(P罗布麻宁干预组大鼠肺组织损伤明显改善,肺系数、NOX、ROS、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α及TGF-β1水平均降低,GSH-Px活力增加(P罗布麻宁干预组大鼠肺组织HYP和α-SMA表达均降低,E-cad水平增加(P罗布麻宁可能通过减少矽肺大鼠氧化应激、炎性因子释放及抑制上皮-间质转化,缓解SiO_(2)诱导的大鼠纤维化作用。

关键词：矽肺纤维化罗布麻宁上皮-间质转化大鼠 NADPH氧化酶活性氧

罗布麻宁减轻D-半乳糖诱导的老化大鼠听皮层线粒体氧化损伤

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华耳科学杂志 2019年第2期17卷 243-247页

作者：杜政德熊伟于树夔柳柯龚树生首都医科大学附属北京友谊医院耳鼻咽喉科北京100050

目的研究NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁(Apocynin, APO)对D-半乳糖诱导的老化大鼠听皮层线粒体氧化损伤的作用。方法 36只1月龄雄性Sprague-Dawley大鼠适应性喂养1周后随机分为3组(每组12只):①对照组:大鼠颈背部皮下注射生理盐水,每日1次... 详细信息

目的研究NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁(Apocynin, APO)对D-半乳糖诱导的老化大鼠听皮层线粒体氧化损伤的作用。方法 36只1月龄雄性Sprague-Dawley大鼠适应性喂养1周后随机分为3组(每组12只):①对照组:大鼠颈背部皮下注射生理盐水,每日1次,连续8周;②D-半乳糖组:大鼠颈背部皮下注射500mg/kg D-半乳糖,每日1次,连续8周;③D-半乳糖+罗布麻宁组:大鼠颈背部皮下注射500mg/kg D-半乳糖+腹膜内注射50mg/kg罗布麻宁,每日1次,连续8周。我们利用酶化学法检测H2O2、总超氧化物歧化酶(Total superoxide dismutase, T-SOD)活性、ATP和线粒体膜电位水平,利用免疫组织化学法检测DNA氧化损伤标记物8-羟基-2-脱氧鸟苷(8-hy?droxy-2-deoxyguanosine, 8-OHdG),利用透射电子显微镜观察听皮层线粒体超微结构。结果和对照组相比较,D-半乳糖组大鼠听皮层H2O2和8-OHdG水平显著增加,而T-SOD活性、ATP和线粒体膜电位水平则显著降低。和D-半乳糖组相比较,D-半乳糖+罗布麻宁组大鼠听皮层H2O2和8-OHdG水平显著降低,而T-SOD活性、ATP和线粒体膜电位水平则显著增加。同时,我们也观察到罗布麻宁可有效保护D-半乳糖诱导的老化大鼠听皮层线粒体超微结构。结论罗布麻宁可有效保护中枢听觉系统老化过程中线粒体氧化损伤。

关键词：老年性聋听皮层线粒体氧化损伤罗布麻宁 D-半乳糖

NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁对慢性间歇缺氧大鼠颈动脉体缺氧诱导因子1α和内皮素-1的表达研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁对慢性间歇缺氧大鼠颈动脉体缺氧诱导...

作者：刘雪华中科技大学

学位级别：硕士

目的：观察NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁对慢性间歇缺氧（chronic intermittenthypoxia CIH）大鼠颈动脉体缺氧诱导因子1-α （hypoxia inducible factor HIF-1α）和内皮素-1（endothelin ET-1）的表达情况及尾动脉收缩血压变化，探讨OS... 详细信息

目的：观察NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁对慢性间歇缺氧（chronic intermittenthypoxia CIH）大鼠颈动脉体缺氧诱导因子1-α （hypoxia inducible factor HIF-1α）和内皮素-1（endothelin ET-1）的表达情况及尾动脉收缩血压变化，探讨OSAHS患者发生高血压的发病机制。方法：应用技术成熟的慢性间歇缺氧箱制备CIH大鼠模型，模拟OSAHS睡眠中慢性缺氧/复氧病理生理方式。将30只8周龄雄性SD大鼠随机分成3组，每组10只，分别为CIH组、罗布麻宁干预组及正常对照组。将CIH组和罗布麻宁干预组每日9AM-5PM放入间歇缺氧箱中，循环给予氮气和空气，各55s，每次循环110S，保证缺氧箱内氧浓度波动在6%-21%。正常对照组同时间置于缺氧箱内，不给缺氧处理。罗布麻宁干预组于每日清晨灌胃3mg/kg罗布麻宁， CIH组和正常对照组给予同体积生理盐水。造模周期为4周。尾袖法测量大鼠尾动脉收缩压，造模结束后第二天进行，每只大鼠反复测量三次，取平均值。测量方法参照大鼠尾动脉压测量仪使用说明书;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠颈动脉体组织HIF-1α和ET-1mRNA的表达情况，westernblotting检测颈动脉体HIF-1α的蛋白表达情况，外周丙二醛（malondialdehyde MDA）及超氧化物岐化酶（superoxide dismutase SOD）水平采用化学比色法测定;血清ET-1和HIF-1α采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测。结果：罗布麻宁干预组大鼠的尾动脉收缩压较CIH组显著降低（P＜0.05）;同时MDA水平，ET-1水平低于CIH组（P＜0.05），而SOD活性显著增加（P＜0.05）。与CIH组相比，罗布麻宁干预组大鼠颈动脉体HIF-1α蛋白表达的表达和外周血清HIF-1α及ET-1mRNA明显降低（均P＜0.05）;而HIF-1α mRNA的表达在两组之间却无显著统计学差异（P＞0.05）。结论：罗布麻宁通过抑制NADPH氧化酶活性，降低氧化应激水平，减少血管收缩因子ET-1水平从而缓解高血压的产生。HIF-1α/ET-1信号通路可能与CIH导致的依赖NADPH氧化酶的氧化应激存在相互作用，这可能是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征相关性高血压发生的病理生理基础之一。

关键词：慢性间歇缺氧内皮素-1 缺氧诱导因子1-α 罗布麻宁颈动脉体

罗布麻宁及其苷在植物界中的分布及药理活性研究进展

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国现代中药 2015年第6期17卷 617-626页

作者：黄珺谢国勇袁君陈雨洁秦民坚中国药科大学中药资源学教研室江苏南京210009

现代生物医学研究表明,罗布麻宁为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂,其作为工具药广泛用于呼吸、神经、心血管等系统疾病的机理研究。为了开发富含罗布麻宁及其苷的天然药物资源,本文综述了罗布麻宁及其苷在植物界中... 详细信息

现代生物医学研究表明,罗布麻宁为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶抑制剂,其作为工具药广泛用于呼吸、神经、心血管等系统疾病的机理研究。为了开发富含罗布麻宁及其苷的天然药物资源,本文综述了罗布麻宁及其苷在植物界中的分布情况,并对其药理作用进行概述。现有研究资料表明,罗布麻宁及其苷广泛分布于植物界,迄今已在60余科上百种植物中发现,集中分布于鸢尾科、玄参科、夹竹桃科等植物类群中。以上综述可为新药资源开发提供线索,并为罗布麻宁治疗疾病的深入机理研究提供参考。

关键词：罗布麻宁植物界分布药理作用

罗布麻宁（Apocynin）对二氧化硅诱导矽肺大鼠的干预作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

罗布麻宁（Apocynin）对二氧化硅诱导矽肺大鼠的干预作用

二苯基碘和夹竹桃麻素通过降低早产儿外周血单个核细胞p47phox位移与水平减少活性氧的产生

中国毒理学会第十次全国毒理学大会

作者：刘芳贾强厉铭宋招远胡晨阳薄存香山东省职业卫生与职业病防治研究院山东第一医科大学(山东省医学科学院)

目的探讨NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁(Apocynin)对二氧化硅(SiO2)诱导的大鼠矽肺模型的干预作用,并探讨其干预矽肺纤维化的可能作用机理,为治疗矽肺药物的开发提供新思路。材料和方法24只6～8周SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、Apocy... 详细信息

目的探讨NADPH氧化酶抑制剂罗布麻宁(Apocynin)对二氧化硅(SiO2)诱导的大鼠矽肺模型的干预作用,并探讨其干预矽肺纤维化的可能作用机理,为治疗矽肺药物的开发提供新思路。材料和方法24只6～8周SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、Apocynin干预组,每组8只。采用一次性非暴露式气管滴注1.0 mL 50 mg/mL SiO2混悬液的方法建立大鼠矽肺模型,对照组大鼠予同样方法灌注等量生理盐水,Apocynin干预组大鼠于SiO2造模后第二天开始腹腔注射罗布麻宁50 mg/kg,一周三次。期间,观察大鼠的一般状况,于28 d后处死大鼠。解剖大鼠肺组织,HE和Masson染色分别观察各组大鼠肺组织病理学变化;检测肺组织NADPH氧化酶(NOX)、活性氧(ROS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平;酶联免疫(Elisa)法测定肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-6表达;碱水解法检测羟脯氨酸(HYP)水平;Western Blot法检测肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、E-钙粘蛋白(E-cad)及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。结果 SiO2暴露28 d后,模型组大鼠体重降低,肺组织出现明显的炎性浸润及纤维化,肺系数、TNF-α、IL-1β、IL-6及TGF-β1水平均高与对照组(P<0.05);与模型组比较,Apocynin干预后的肺组织损伤结构明显改善,肺系数、TNF-α、IL-1β、IL-6及TGF-β1水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,Apocynin干预组可降低矽肺大鼠肺组织MDA、NOX及ROS水平,增加GSH-Px活性,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,Apocynin亦可显著降低矽肺大鼠肺组织HYP和α-SMA表达,增加E-cad水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Apocynin可能通过降低MDA、NOX及ROS水平,增加抗氧化酶GSH-Px活性,减少肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6及TGF-β1炎性因子释放,抑制矽肺大鼠胶原沉积和上皮间质转化(EMT)过程在矽肺大鼠体内发挥抗炎和抗纤维作用。

关键词：矽肺纤维化罗布麻宁 NADPH氧化酶 EMT

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞与分子免疫学杂志 2016年第1期32卷 59-62页

作者：张玲萍董文斌李清平康兰张莲玉卢佑英翟雪松四川医科大学附属第一医院新生儿科四川泸州646000

目的观察NADPH氧化酶抑制剂二苯基碘(DPI)和夹竹桃麻素(apocynin)对NADPH氧化酶亚基p47phox介导的活性氧(ROS)产生的影响,探讨细胞在高氧条件下,p47phox介导ROS产生的机制。方法 32周以下早产儿,尚未吸氧前取外周血2 m L,分离纯化外周... 详细信息

目的观察NADPH氧化酶抑制剂二苯基碘(DPI)和夹竹桃麻素(apocynin)对NADPH氧化酶亚基p47phox介导的活性氧(ROS)产生的影响,探讨细胞在高氧条件下,p47phox介导ROS产生的机制。方法 32周以下早产儿,尚未吸氧前取外周血2 m L,分离纯化外周血单个核细胞(PBMC)将所得细胞分为对照组、高氧组、高氧联合DPI处理组、高氧联合apocynin处理组进行培养。对照组置于37℃、50 m L/L的CO2培养箱中,高氧及相应处理组置于950 m L/L的O2与50 m L/L的CO2混合气体中培养48 h。采用Mitosox Red标记结合激光共聚焦显微镜检测PBMC内ROS的生成量、硫代巴比妥酸比色法检测培养液丙二醛含量、免疫荧光检测p47phox在细胞内的定位及移位率、Western blot法检测p47phox的蛋白水平。结果与高氧组相比,其余三组ROS和丙二醛明显减少,p47phox移位率与含量也显著降低;与对照组相比,高氧联合DPI处理组及高氧联合apocynin处理组ROS、丙二醛、p47phox移位率与含量并无显著差异。结论 DPI和apocynin能通过降低p47phox移位与含量来减少高氧诱导的ROS升高。

关键词：高氧暴露二苯基碘罗布麻宁 p47phox

自由基清除剂对仔猪生长及血液氧化代谢相关指标的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧与兽医 2012年第S1期44卷 274-275页

作者：韩国清朱晓彤束刚王松波王丽娜高萍江青艳农业部华南动物营养与饲料科学观测试验站华南农业大学动物科学学院广东广州510642

活性氧自由基是体内一种重要的信号分子,能参与能量稳态、免疫和信号传导过程。过多的活性氧自由基可造成细胞和组织的损坏,从而引起多种疾病。为研究自由基清除剂对仔猪采食、生长发育和代谢的影响,本研究首先采用二苯基苦基苯肼自由基... 详细信息

活性氧自由基是体内一种重要的信号分子,能参与能量稳态、免疫和信号传导过程。过多的活性氧自由基可造成细胞和组织的损坏,从而引起多种疾病。为研究自由基清除剂对仔猪采食、生长发育和代谢的影响,本研究首先采用二苯基苦基苯肼自由基(DPPH法)比较了维生素C、没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocate-chin gallate,EGCG)。

关键词：自由基清除剂罗布麻宁 α-硫辛酸二苯基苦基苯肼没食子儿茶素信号传导过程没食子酸酯 gallate DPPH 氧化代谢

以聚乙烯吡咯烷酮VA64为纳米载体构建胶束增溶型滴眼液的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

以聚乙烯吡咯烷酮VA64为纳米载体构建胶束增溶型滴眼液的实验研究

作者：李亚茹青岛科技大学

学位级别：硕士

目的眼病是一种常见的疾病,在每个人的一生中都可能发生。尽管一些眼病的详细机制尚未完全了解,但越来越多的证据表明许多眼病的基本病因机制与炎症及氧化应激有关。然而有效的眼用抗氧化应激、抗炎药物在眼科临床仍然是一个急需满足的... 详细信息

目的眼病是一种常见的疾病,在每个人的一生中都可能发生。尽管一些眼病的详细机制尚未完全了解,但越来越多的证据表明许多眼病的基本病因机制与炎症及氧化应激有关。然而有效的眼用抗氧化应激、抗炎药物在眼科临床仍然是一个急需满足的医疗需求。因此,需要研发能够显著抑制氧化应激损伤、防止过度炎症反应的新药物。本研究将探讨:1.两亲性聚合物聚乙烯基吡咯烷酮VA64(Polyvinylpyrrolidone,VA64)首次用于构建眼部给药纳米平台的可行性;***64与罗布麻宁(Apocynin,APO)构建的纳米制剂治疗干眼症并协同调控高迁移率群族蛋白B1(High Mobility Group B1,HMGB1)信号通路促进损伤修复的可行性;3.为提高更多难溶性药物的生物利用度,将VA64作为混合辅料之一构建纳米给药系统的可行性;***64-D-α琥珀酸生育酚聚乙二醇酯(D-αtocopherol succinate polyethylene glycol ester,TPGS)与秦皮乙素(Aesculetin,AES)构建的纳米制剂治疗白内障并协同调控HMGB1信号通路预防白内障发展的可行性。方法1.薄膜水化法制备聚乙烯吡咯烷酮VA64-罗布麻宁胶束(APO-VA64),测定包封率、粒径电位优化处方,评价其储存稳定性、溶解度变化与体内外安全性与耐受性,考察其抗氧化活性、体外释放特性、在体角膜通透性及细胞水平安全性。2.使用苯扎氯铵(Benzalkonium chloride,BAC)构建BALB/c小鼠干眼损伤模型,荧光素钠、孟加拉玫瑰红染色后用裂隙灯观察眼表损伤及修复;测量角膜敏感度、泪液量,观察新生血管与灌注,评价角膜样本组织病理、扫描电镜及炎症因子表达。3.选用AES,构建载药聚乙烯吡咯烷酮VA64-TPGS胶束(AES-VA64-TPGS),以辅料比例、包封率等为指标优化处方,评价考察胶束储存稳定性、溶解度变化、体外抗氧化、体外释放、体内外安全性、角膜吸收特性及细胞耐受性。4.建立亚硒酸钠(Sodium selenite)白内障模型,按预定实验方案滴注各组药物,于预定时间用裂隙灯观察晶状体浑浊发展程度并评分;治疗结束后观察离体晶状体外观;检测晶状体氧化应激水平及相关炎症因子水平。将健康Wistar大鼠的晶状体在37°C的细胞培养基中孵育2小时后转移至各组继续孵育24小时;检查外观后称量湿重,随后测定各组氧化应激水平表达差异。结果***-VA64胶束滴眼液可以通过简单的工艺制备,该溶液透明无色,具有胶束粒径小(14.12±1.24 nm)、胶束粒径分布窄、APO包封效率高等优点。胶束化APO还具有较高的水溶性、体外释放能力和抗氧化活性。APO-VA64胶束滴眼液表现出良好的眼部耐受性,提高了小鼠的角膜渗透能力。体外细胞水平细胞毒性、角膜划痕与氧化应激损伤修复实验结果均表明具有良好的眼部安全性。2.发现局部给药的APO-VA64胶束滴眼液对BAC诱导的眼损伤比APO、VA64以及APO&VA64的物理混合混悬液更有效。APO-VA64胶束滴眼液治疗后小鼠角膜损伤修复、角膜敏感度、泪液、新生血管等基本恢复正常、结膜无明显水肿、充血。此外,HMGB1信号通路的阻断及其相关的促炎细胞因子参与了这种治疗效果,角膜中的炎症因子及m RNA水平均下降(与PBS相比,P<0.05)。3.制备的AES-VA64-TPGS胶束滴眼液呈淡黄色透明状,胶束粒径13.10±0.16nm、多分散性指数0.094±0.02、包封率99.75±2.16%。胶束化的AES水溶性升高了500多倍,体外释放和抗氧化活性也显著优于AES混悬液。同时AES-VA64-TPGS胶束滴眼液表现出良好的眼部耐受性,提高了大鼠的角膜渗透能力。***-VA64-TPGS胶束滴眼液对亚硒酸钠诱导的白内障防治比AES、VA64&TPGS以及AES&VA64&TPGS的物理混合混悬液更有效,甚至优于阳性对照组。胶束治疗后大鼠晶状体无明显浑浊,分离出的晶状体澄清透明,氧化应激及HMGB1信号通路相关的促炎细胞因子基本恢复至正常水平。在体外培养的晶状体中,AES-VA64-TPGS通过维持近正常水平的氧化还原系统成分,抑制几种晶状体中氧化应激蛋白的异常表达,防止晶状体细胞死亡,从而防止亚硒酸盐诱导的白内障发生。结论结果表明,VA64胶束能够明显提高难溶性药物的溶解度与眼部生物利用度,胶束化APO、AES能够通过抑制氧化应激以及炎性细胞因子有效缓解眼部炎症损伤,VA64是一种潜在的眼部药物传递纳米性辅料。

关键词：聚乙烯吡咯烷酮VA64 罗布麻宁秦皮乙素 TPGS 增溶增效眼部递送

抑制BMSC衰老的小分子化合物的筛选及Apocynin抗衰老作用机制的研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

抑制BMSC衰老的小分子化合物的筛选及Apocynin抗衰老作用机制的研...

作者：孙津龙第四军医大学

学位级别：硕士

我国是世界上老年人口最多的国家，在所有的人群中约有9000万人患有不同程度的骨质疏松，因而骨质疏松的治疗和预防是极为重要的医学课题。在骨衰老的进程中，破骨细胞对骨的吸收速率超过了成骨细胞的骨形成的速率，成骨细胞与破骨细胞... 详细信息

我国是世界上老年人口最多的国家，在所有的人群中约有9000万人患有不同程度的骨质疏松，因而骨质疏松的治疗和预防是极为重要的医学课题。在骨衰老的进程中，破骨细胞对骨的吸收速率超过了成骨细胞的骨形成的速率，成骨细胞与破骨细胞之间的骨代谢平衡被打破是骨量下降，骨密度降低的重要因素。而骨髓间充质干细胞作为成骨细胞的前体细胞，随着衰老进程的加剧，其增殖、分化等能力的出现下降的趋势。而这也直接导致了骨生成的减少，这是骨质疏松发生的一个非常关键的因素。而由于干细胞和骨质疏松等增龄性骨疾病之间的密切联系使得对干细胞的相关调控研究在本领域具有广阔的前景。小分子化合物作为近些年的研究热点，被广泛地应用于对细胞的调控与干预的研究中。本课题的研究以新发现的小分子化合物库为基础，从中筛选出了对骨髓间充质干细胞命运调控具有明显影响的小分子化合物，并对其影响的机制进行了进一步深入的探索，同时在动物模型上对其应用效果进行验证，筛选出了具有明显抑制BMSCs衰老进程的相关小分子化合物。1.研究思路在实验研究开始阶段，我们通过对国家小分子化合物资源中心所提供的24个化合物库中的约14000种小分子化合物进行初步的筛选。首先根据国家小分子化合物资源中心提供的对相关小分子化合物的作用方向的初步描述缩小了筛选范围，通过对相关化合物研究进展的查阅以及其相关作用靶点的分析，最终选定了目前在干细胞治疗领域尚未进行过相关研究，同时具有潜在的干细胞干预能力的小分子化合物共计27种，并应用于接下来的化合物筛选的实验研究当中。在第一部分实验中，首先对SD大鼠的BMSCs进行取材，以获得用于化合物干预实验的衰老的骨髓间充质干细胞（aging-BMSCs），随后使用选定的27种小分子化合物以梯度浓度（1000μM、100μM、10μM、1μM）分别对细胞进行干预。随后通过使用实时定量PCR（RT-PCR）的方法对选定的27种小分子化合物作用于骨髓间充质干细胞的相关靶点进行了mRNA水平的检测。此处选用了与干细胞衰老进程密切相关的靶点β–gal、p53、p21、p16、Nanog、Oct-4、TERT作为筛选靶点进行定量的检测。在这一步中，我们通过对相关基因表达的定量分析初步获得了11种对筛选靶点作用效果明显的小分子化合物及其最佳作用的浓度。随后我们通过对这11种选出的小分子化合物在同一批样本中进行了横向的对比，对其作用的效果进行了排序，并最终选定了5种小分子化合物用于进一步的研究中（apocynin、bax channel blocker、iso-Olomoucine、（±）bay k8644、H-9）。在第二部分实验中，我们对选定的5种小分子化合物以最佳作用浓度对aging-BMSCs进行干预，并对细胞进行了与衰老相关的多靶点的检测。通过MTT细胞增殖实验，我们对细胞的增殖能力进行了检测；通过细胞SA-β–gal活性染色实验。对细胞β–半乳糖苷酶活性及衰老状态进行检测；通过RT-PCR实验以及Western Blot实验在mRNA水平和蛋白水平分别检测细胞衰老和分化方面的改变；通过ALP染色、茜素红（Alizarin Red）染色、ALP活性定量检测来观察在对细胞进行成骨诱导后，细胞在分化水平的改变；通过流式技术（Flow Cytomery）检测来对细胞周期、细胞凋亡进行相关的检测。在本部分的实验中，我们发现选定的5种小分子化合物均具有明显逆转或延缓衰老骨髓间充质干细胞衰老进程的作用。在第三部分实验中，我们对小分子化合物Apocynin抗衰老的作用进行了更加细致的研究。首先我们在体外实验中对apocynin作用于aging-BMSCs的分子机制进行了探索。通过对NADPH Oxidase活性的定量检测、细胞内活性氧（ROS）水平定量检测及定性检测等实验我们发现了apocynin在衰老骨髓间充质干细胞中改变衰老进程的相关分子信号通路及其作用的方式。同时，我们通过使用SAMP6早衰小鼠模型对apocynin的作用进行了进一步的体内检测。我们发现apocynin的作用明显改善了p6小鼠的骨质疏松及骨衰老的进程。通过Micro-CT检测apocynin干预下其骨密度、骨量的改变；通过TRAP-ALP组织切片染色来检测apocynin对骨组织中成骨-破骨细胞平衡的改变情况。同时对SAMP6小鼠的BMSCs进行取材，通过相关体外实验检测其在衰老与分化方面的改变情况。2.实验结果第一部分小分子化合物的筛选1）通过对国家小分子化合物资源中心提供的化合物库进行初步的梳理分析，我们从中心提供的24个化合物库中选定了8个列出小分子化合物初步作用靶点或方向的化合物库进行筛选，从这8个库中对其列出的每个小分子化合物采用一定的筛选标准进行筛

关键词：骨质疏松骨髓间充质干细胞小分子化合物衰老罗布麻宁