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作者：蒋军南京医科大学

学位级别：硕士

目的探讨肝动脉缺血所导致的胆管损伤与肝脓肿之间的关系。方法取80只SD大鼠,离断肝周侧支循环、结扎大鼠肝动脉及结扎胆管周围血管网以达到部分或完全阻断大鼠肝脏动脉血供的目的,分为假手术组、肝动脉结扎组、胆管周围血管网结扎组和... 详细信息

目的探讨肝动脉缺血所导致的胆管损伤与肝脓肿之间的关系。方法取80只SD大鼠,离断肝周侧支循环、结扎大鼠肝动脉及结扎胆管周围血管网以达到部分或完全阻断大鼠肝脏动脉血供的目的,分为假手术组、肝动脉结扎组、胆管周围血管网结扎组和肝脏完全去动脉化组等四组。术后3天、7天、14天行上腹部CT扫描监测有无肝胆异常。术后14天各组大鼠处死后取下腔静脉行血清转氨酶、碱性磷酸酶和总胆红素等生化检查。取肝脏组织石蜡包埋,行HE染色、Masson染色,观察病理改变及纤维化反应。另取80只大鼠,经胆管逆行注射大肠杆菌后,再将大鼠随机分为以上肝脏部分或完全去动脉化等四组,术后14天处死,观察各组大体标本有无肝脓肿形成,肝脏组织行HE染色,观察有无显微镜下肝脓肿形成。结果肝脏完全去动脉化组的大鼠14天后血清转氨酶、碱性磷酸酶和总胆红素均较其他三组明显升高,且肝细胞出现胆汁性梗死和凝固性坏死,并能观察到由于胆管缺血坏死、胆汁外渗形成的胆汁瘤。而行肝脏部分去动脉化的各组大鼠未发现肝胆细胞的坏死和胆汁瘤形成。行胆管逆行注射大肠杆菌后,只有完全去动脉化组的肝脏出现了大体和镜下可见的肝脓肿,且肝脓肿与坏死胆管相通。结论大鼠肝脏动脉血供完全阻断可以导致胆管坏死、胆汁外渗而形成胆汁瘤。经胆管逆行感染大肠杆菌后,胆汁瘤进而可以演变为肝脓肿。

关键词：胆管坏死胆汁瘤肝脓肿肝动脉结扎缺血性胆管炎缺血性胆管病大肠杆菌

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肠道微生态与肝移植及肝移植术后缺血性胆道病变的关系

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器官移植 2016年第4期7卷 315-319页

作者：陆建文董健张谞丰吕毅西安交通大学第一附属医院肝胆外科西安交通大学先进外科技术与工程研究所陕西省再生医学与外科工程研究中心 710061

近年来随着聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)及新一代测序技术(包括16S rRNA测序和宏基因组测序技术)的快速发展,肠道微生物作为一个"器官"越来越多地受到关注,相关研究进展突飞猛进。肠道微生物与肝移植术后感染、排斥反应等... 详细信息

近年来随着聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)及新一代测序技术(包括16S rRNA测序和宏基因组测序技术)的快速发展,肠道微生物作为一个"器官"越来越多地受到关注,相关研究进展突飞猛进。肠道微生物与肝移植术后感染、排斥反应等并发症存在相关性,通过干预肠道微生物可在一定程度上改善上述并发症。缺血性胆管病(IC)是肝移植后并发症的最严重类型,引起IC的原因包括缺血-再灌注损伤、免疫介导损伤及细胞毒性疏水性胆盐等。肠道微生物与上述IC的发病机制之间存在着紧密的联系,由此我们推测肠道微生物可能在肝移植术后IC的发生、发展中发挥重要作用。未来研究可能需着眼于肠道微生物预测IC的敏感性以及通过干预肠道菌群实现有效治疗。

关键词：肠道微生态肝移植缺血性胆管病胆道非吻合口狭窄缺血-再灌注损伤

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胆管上皮细胞上皮—间质转变以及BMP-7的逆转效应

胆管上皮细胞上皮—间质转变以及BMP-7的逆转效应

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作者：张煊中国人民解放军军医进修学院

学位级别：硕士

目的:胆管上皮细胞(Biliary Epithelial Cells,BECs)是一族高氧耗、高代谢、低缺氧耐受、易受自由基损害的细胞群体。缺血性胆管病时胆管上皮损伤后的共同特征是上皮化的功能单位发生改建和纤维化,伴有上皮细胞缺失、基底膜损害和间质... 详细信息

目的:胆管上皮细胞(Biliary Epithelial Cells,BECs)是一族高氧耗、高代谢、低缺氧耐受、易受自由基损害的细胞群体。缺血性胆管病时胆管上皮损伤后的共同特征是上皮化的功能单位发生改建和纤维化,伴有上皮细胞缺失、基底膜损害和间质纤维化。但胆管上皮细胞同胆管型纤维化之间的关系尚不清楚。本研究通过体外原代培养大鼠及人胆管上皮细胞(BECs),探讨经转化生长因子-β(TGF-β)诱导后,BECs能否出现上皮-间质表型转变(EMT),及其相关蛋白及分子标志的表达变化;并探讨骨形态形成蛋白-7(BMP-7)是否可以逆转胆管上皮细胞的EMT,从而为缺血性胆管病的发生机理及治疗提供实验依据。方法:分离大鼠及人肝胆管上皮细胞并进行原代培养。对2种细胞分别设立未处理空白对照组、诱导EMT组、BMP-7对EMT逆转效应组。通过免疫组化、免疫荧光检测其E-cadherin、CK-19、S100A4、β-catenin、Fibronectin等标志蛋白的表达变化。结果:(1)进行了体外分离大鼠及人胆管上皮细胞并进行原代培养,细胞纯度及存活率较高;(2)体外培养的胆管上皮细胞经TGF-β诱导后,其上皮标志E-cadherin、β-catenin、CK-19表达降低,间质细胞标志Vimentin、S100A4及Fibronectin的表达升高,出现EMT的特征;(3)BMP-7可在一定程度上逆转EMT,表现为E-cadherin、β-catenin及CK-19表达升高,而Vimentin、S100A4及Fibronectin的表达降低。结论:体外培养的BECs可以在TGF-β诱导下发生EMT改变,提示BECs可通过上皮-间质转变成肌纤维母细胞,可能在胆管上皮纤维性改建、导致胆管狭窄和纤维化中发挥作用。而且首次证明BMP-7可以逆转胆管上皮细胞EMT,显示BMP-7可以对缺血性胆管病潜在治疗价值。

关键词：胆管上皮细胞上皮-间质转变缺血性胆管病

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