检索结果-南通市图书馆

中华神经医学杂志 2015年第10期14卷 1012-1017页

作者：芮琴王爱东陆朝晖刘兵戴纯刚代兴亮王麒龙陈金生董军兰青黄强苏州大学附属第二医院实验中心苏州215004 苏州大学附属第二医院高新区医院神经外科苏州215151 苏州大学附属第二医院神经外科苏州215004

目的分析增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转基因裸小鼠（绿色裸小鼠）脑组织中EGFP的表达情况，为绿色裸小鼠的脑内移植应用提供依据。方法以本实验室自建的绿色裸小鼠FoxnlTnu．B6-CAG-EGFP／SU为实验对象，采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR... 详细信息

目的分析增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转基因裸小鼠（绿色裸小鼠）脑组织中EGFP的表达情况，为绿色裸小鼠的脑内移植应用提供依据。方法以本实验室自建的绿色裸小鼠FoxnlTnu．B6-CAG-EGFP／SU为实验对象，采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析小鼠主要器官组织／细胞和脑不同部位组织中EGFPmRNA表达水平，通过荧光显微镜观察小鼠全身主要器官组织和全脑不同层面组织中绿色荧光强度．应用荧光分光光度计定量分析、免疫组化染色定性观察小鼠脑不同部位组织中EGFP蛋白含量及阳性细胞的表达。结果半定量RT-PCR结果显示，绿色裸小鼠主要器官组织／细胞均不同程度表达EGFP。荧光显微镜下观察到脑不同层面组织均能显示绿色荧光，且亮度呈现部位差异，其中小脑皮层、海马、嗅球等部位荧光较亮。荧光定量PCR和荧光分光光度计定量分析表明，与大脑皮质相比，小脑皮层、海马和嗅球等组织EGFPmRNA和蛋白的表达水平较高。免疫组化染色显示，小脑浦肯野细胞、海马锥体细胞、嗅球颗粒细胞等呈现EGFP强阳性反应。结论绿色裸小鼠脑组织均不同程度表达EGFP，其中小脑皮层、海马和嗅球等部位表达较高．因此脑也适合做脑内移植实验研究。

关键词：绿色裸小鼠增强型绿色荧光蛋白脑组织

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

绿色裸小鼠中绿色荧光蛋白荧光示踪作用研究

绿色裸小鼠中绿色荧光蛋白荧光示踪作用研究

引用

作者：芮琴苏州大学

学位级别：硕士

第一部分“绿色裸小鼠”脑组织中绿色荧光蛋白表达分析【目的】分析绿色荧光裸小鼠脑组织中绿色荧光蛋白（EGFP）的表达情况,为绿色裸小鼠的脑内移植应用提供依据。【方法】采用半定量RT-PCR分析绿色裸小鼠不同脏器组织/细胞和脑不同部... 详细信息

第一部分“绿色裸小鼠”脑组织中绿色荧光蛋白表达分析【目的】分析绿色荧光裸小鼠脑组织中绿色荧光蛋白（EGFP）的表达情况,为绿色裸小鼠的脑内移植应用提供依据。【方法】采用半定量RT-PCR分析绿色裸小鼠不同脏器组织/细胞和脑不同部位组织中EGFP m RNA表达水平;通过荧光显微镜观察全身主要器官组织和全脑不同层面组织中绿色荧光强度;用荧光定量PCR和荧光分光光度计定量分析、免疫组化定性观察鼠脑不同部位组织中EGFP的表达;在绿色裸小鼠颅内接种表达红色荧光蛋白（RFP）的人胶质瘤干祖细胞SU3-RFP,动物活体成像及荧光显微镜观察小鼠活体脑和脑组织中肿瘤形成情况。【结果】RT-PCR结果显示,绿色裸小鼠各脏器组织和脑组织不同部位都不同程度表达EGFP;荧光显微镜下观察到脑组织不同层面都能显示绿色荧光,且呈现部位差异;q PCR和荧光分光光度计定量分析表明,与大脑皮质相比,小脑皮层、海马和嗅球等组织EGFP表达较高,差异具有显著性（p＜0.05）;免疫组化结果显示,小脑皮层、海马等部位存在强阳性表达EGFP的细胞;肿瘤细胞接种至绿色裸小鼠颅内后,小动物活体成像仪和荧光显微镜下可见绿色脑组织背景下红色荧光的肿瘤形成,表明成功建立了脑内红绿双色荧光示踪移植瘤模型。【结论】绿色荧光裸小鼠脑组织中不同程度表达EGFP,而非阴性表达,其中小脑皮层、海马和嗅球等部位表达较高。同其它高表达EGFP的脏器一样,脑也适合做人癌移植荧光示踪实验研究。第二部分双色荧光示踪移植瘤模型中骨髓来源宿主细胞恶性转化初步研究【目的】利用红绿双色荧光示踪移植瘤模型,探讨肿瘤微环境中来源于宿主骨髓的间质细胞的恶性转化问题。【方法】在绿色荧光示踪骨髓重建模型基础上,颅内接种表达RFP胶质瘤干祖细胞SU-RFP,建立红绿双色荧光示踪移植瘤模型。分离移植瘤组织进行体外培养,对可连续传代的发绿色荧光细胞进行单克隆培养（命名为ih BTCBM）,并对细胞生物学特征进行分析:CCK-8法绘制细胞增殖曲线,常规方法进行染色体核型分析;将细胞接种至裸小鼠皮下观察细胞致瘤性;采用免疫荧光方法检测细胞中骨髓间充质干细胞标准物Sca-1、CD29、CD44表达情况。【结果】ih BTCBM细胞体外培养呈现出恶性细胞表型,细胞增殖旺盛,染色体为异倍体,皮下接种裸小鼠致瘤率为100%（6/6）;免疫荧光检测结果显示细胞表达骨髓间充质干细胞标准物Sca-1、CD29和CD44。【结论】在EGFP荧光示踪下,从双色荧光示踪移植瘤组织中分离出宿主骨髓来源、可连续传代的细胞,该细胞可能是骨髓间充质干细胞的恶性转化的细胞。

关键词：绿色裸小鼠绿色荧光蛋白基因表达间质细胞恶性转化荧光示踪

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：