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1株引起条斑紫菜绿斑病的柠檬假交替单胞菌

中国水产科学 2002年第4期9卷 353-358页

作者：闫咏马家海许璞孙其焕王汉清上海水产大学渔业学院江苏南通226007 江苏省海洋水产研究所江苏省海洋水产研究所上海200090

从栽培海区采回的发病条斑紫菜 (Porphyraeyezoensis)上共分离筛选出 5 1株菌株 ,全部进行人工感染 ,其中 17# 菌株发病症状最典型 ,而感染对照组没有可见变化。初步确定 ,17# 菌株是条斑紫菜绿斑病的主要致病菌。17# 菌株为短杆状、极... 详细信息

从栽培海区采回的发病条斑紫菜 (Porphyraeyezoensis)上共分离筛选出 5 1株菌株 ,全部进行人工感染 ,其中 17# 菌株发病症状最典型 ,而感染对照组没有可见变化。初步确定 ,17# 菌株是条斑紫菜绿斑病的主要致病菌。17# 菌株为短杆状、极生单鞭毛可运动的革兰氏阴性菌 ,产生紫褐色色素 ,可水解明胶、酪蛋白、淀粉等大分子物质。葡萄糖氧化发酵试验 (O/F)为氧化性、氧化酶阳性、ONPG反应阳性 ,V -P反应阴性 ,生长需Na+ 等生化特性 ,G +C含量 4 0 .5mol% ,脂肪酸主要成分为C17∶1ω8c和C16∶1ω7c。基于 16SrRNA的系统进化分析均表明 ,从患绿斑病的条斑紫菜叶状体上分离到的致病菌株 17# 与柠檬假交替单胞菌 (Pseudoalteromonascitrea)为同种的不同菌株

关键词：条斑紫菜绿斑病柠檬假交替单胞菌

一株引起坛紫菜绿斑病病原的分离鉴定及致病性研究

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水产学报 2015年第11期39卷 1721-1729页

作者：韩晓娟茅云翔李杰李贵阳李晨刘莉莫照兰中国海洋大学海洋生命学院遗传与育种实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所农业部海洋渔业可持续发展重点实验室青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产生过程功能实验室

为了明确引起坛紫菜绿斑病的病原,对2012年发生在福建省莆田养殖海区坛紫菜叶状体绿斑病开展了病原的分离鉴定和致病性研究。利用2216E海水培养基平板,从患病藻体分离得到一株优势细菌X5;在实验室条件下将X5进行回接感染实验,在显微镜... 详细信息

为了明确引起坛紫菜绿斑病的病原,对2012年发生在福建省莆田养殖海区坛紫菜叶状体绿斑病开展了病原的分离鉴定和致病性研究。利用2216E海水培养基平板,从患病藻体分离得到一株优势细菌X5;在实验室条件下将X5进行回接感染实验,在显微镜下观察到坛紫菜叶状体发生组织病理变化,出现绿斑病症状:感染初期出现黄绿色小斑点,病斑逐渐扩大出现空洞,最后导致紫菜叶片流失;用浓度为104;08cfu/m L的X5感染坛紫菜时,在7 d内引起紫菜出现10%;00%病斑面积,这些结果表明X5为坛紫菜绿斑病的病原。利用生理生化和多基因序列分析方法对X5进行鉴定,结果显示该菌为革兰氏阴性菌,大小为0.6μm×0.4μm;.0μm×0.4μm,无鞭毛,在温度4;2℃、盐度50;50、p H 6;0范围内生长,最适生长温度为16℃,最适生长盐度为50,最适p H为7,对甲硝唑、林可霉素和青霉素耐药,对25种抗生素敏感,Biolog和API ID-32E细菌鉴定系统的结果显示X5为弧菌属细菌（Vibrio sp.）;基于多基因序列（16S rRNA,rpo A,recA,pyr H）构建的系统进化树分析显示,X5与***、***、***聚为一支,进化距离为0.095;.108,这些结果说明X5为弧菌属的一个新种或是***、***、***之一的一个新亚种。本研究报道了弧菌X5能够引起坛紫菜绿斑病,为紫菜流行病学及疾病防治提供了理论支撑。

关键词：坛紫菜绿斑病弧菌鉴定致病性

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夏橙绿斑病病理机制的解剖学研究

西南农业学报 2015年第5期28卷 2090-2095页

作者：王大平叶宝兴重庆文理学院林学与生命科学学院重庆永川402168 山东农业大学生命科学学院山东泰安271018

本文采用体视镜、叶片表皮离析法和塑料切片法系统地研究了夏橙叶片绿斑病的病理机制。结果表明:绿斑病由虚幻球藻和胶孢炭疽菌共同感染夏橙叶片所致。绿斑病病原体虚幻球藻主要分布在叶片上表面,少量的分布在叶片下表面。病叶颜色呈灰... 详细信息

本文采用体视镜、叶片表皮离析法和塑料切片法系统地研究了夏橙叶片绿斑病的病理机制。结果表明:绿斑病由虚幻球藻和胶孢炭疽菌共同感染夏橙叶片所致。绿斑病病原体虚幻球藻主要分布在叶片上表面,少量的分布在叶片下表面。病叶颜色呈灰绿色或橙黄色,较健康叶片颜色要深,部分叶片有轻度枯萎现象。健康叶片正面有许多凹陷小坑,是异细胞或油胞破裂后的痕迹。胶孢炭疽菌主要分布在叶片的上表皮细胞内和栅栏组织中,菌丝可以寄生在细胞内,亦可寄生在细胞间隙里,分生孢子盘主要存在于叶片下表皮。虚幻球藻矿质营养的来源主要取决于夏橙叶片的特殊结构,如破裂的油胞、角质膜等,其次与雨水、尘埃等外部因素可能有关。该文详细分析讨论了健康叶片和病叶在病理学解剖结构方面存在的6个差异性。

关键词：绿斑病虚幻球藻胶孢炭疽菌夏橙病理学机制叶片

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套袋对夏橙果实绿斑病发生及果实品质的影响

西南农业大学学报（自然科学版） 2006年第4期28卷 610-613页

作者：王大平刘奕清李道高重庆文理学院生命科学系重庆永川402168 西南大学园艺园林学院重庆400716

以奥灵达夏橙为试材,设不同时期进行果实套双层纸袋处理,果实成熟采收后调查绿斑病发生情况和进行品质分析。结果表明,套袋能有效控制果实绿斑病的发生,可提高果实亮度、黄色度和红色度,明显改善果实的外观品质,但单果重有轻微减少;套... 详细信息

以奥灵达夏橙为试材,设不同时期进行果实套双层纸袋处理,果实成熟采收后调查绿斑病发生情况和进行品质分析。结果表明,套袋能有效控制果实绿斑病的发生,可提高果实亮度、黄色度和红色度,明显改善果实的外观品质,但单果重有轻微减少;套袋果的可溶性固形物、总糖和可滴定酸含量较对照有所降低,套袋越早,降低越多;套袋各处理果实的维生素C含量均比对照有所增加。综合分析表明,夏橙在9月至10月套双层纸袋对控制果实绿斑病、改善果实品质较好。

关键词：夏橙套袋绿斑病果实品质

条斑紫菜（Pyropia yezoensis）的病害调查及其绿斑病病原的PCR检测方法

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条斑紫菜（Pyropia yezoensis）的病害调查及其绿斑病病原的PCR检...

作者：杨慧超上海海洋大学

学位级别：硕士

紫菜是我国海藻产业的重要组成部分,随着栽培产量和密度的增加,紫菜病害发生严重,成为重影响产业发展的瓶颈。我国紫菜病害研究起步较晚、基础薄弱,病害种类和病原种类不清楚,病害发生机制不明,病害防控手段缺乏,各方面的工作亟待开展... 详细信息

紫菜是我国海藻产业的重要组成部分,随着栽培产量和密度的增加,紫菜病害发生严重,成为重影响产业发展的瓶颈。我国紫菜病害研究起步较晚、基础薄弱,病害种类和病原种类不清楚,病害发生机制不明,病害防控手段缺乏,各方面的工作亟待开展。本文初步调查了条斑紫菜(Pyropia yezoensis)苗期和栽培期的病害,分离鉴定了苗期贝壳丝状体的可培养微生物,进一步分析了贝壳丝状体黄斑病的发病过程和病原种类;建立了一种紫菜绿斑病病原的PCR检测方法。本论文研究结果将为我国紫菜流行病学研究提供数据和支撑。具体研究内容和结果如下:1.条斑紫菜苗期和栽培期的病害调查。从2017年8月至2019年1月,对江苏、浙江、山东的十多个养殖场开展病害调查。育苗期间,多数育苗场都不同程度发生病害,出现黄斑、白斑、鲨皮等病征,以黄斑病最常见,其次为白斑病,有的养殖池同时发生两种病,发病严重的可导致整个养殖场绝收。发病和未发病育苗池的水质理化指标未见显著性差异。栽培期间,赤腐病、拟油壶菌病最常见。在两个发病海区鉴定了两种卵菌病原,分别为腐霉Pythium chondricola、拟油壶菌Olpidiopsis pyropia。2.紫菜育苗期可培养微生物的分析。对2017年9月及2018年10月采集的黄斑病及未发病的育苗池水和贝壳丝状体可培养微生物进行分离鉴定,共分离得到79属细菌571株,5属放线菌8株,未分离到真菌。可培养微生物丰度依次为:变形菌门Proteobacteria(81.28%)、拟杆菌门Bacteroidetes(10.25%)、厚壁菌门Firmicutes(6.55%)、放线菌门Actinobacteria(1.92%)。比较患黄斑病和未发病样品的细菌种类,发现患病样品分离到的弧菌科(Vibrionaceae)、红杆菌科(Rhodobacteraceae)、黄杆菌科(Flavobacteriaceae)、盐单胞菌科(Halomonadaceae)、假交替单胞菌科(Pseudoalteromonadaceae)、海洋螺菌科(Oceanospirillaceae)的细菌明显多于未发病样品,未发病样品的红螺菌科(Rhodospirillaceae)和赤杆菌科(Erythrobacteraceae)的细菌明显多于发病样品。对上述菌株的胞外酶产生情况进行分析,发现产生酪蛋白酶、明胶酶、淀粉酶、脂肪酶、琼胶酶的有319株、377株、288株、35株、5株,未见有产果胶酶和纤维素酶的菌株。发现从患黄斑病样品分离得到的菌株多数产生酪蛋白酶、淀粉酶、明胶酶和琼胶酶酶活。3.条斑紫菜丝状体贝壳溶壳条件的筛选。生产上常用溶壳剂溶解紫菜贝壳丝状体来获取丝状体,用以观察紫丝状体的生长和发育情况。为了减少溶壳剂作用强度对丝状体的影响,本研究比较了柏兰尼液和醋酸(7%、10%、15%和20%)两种溶壳剂在不同作用浓度和不同作用时间的溶壳效果、对丝状体形态变化和损伤的影响。结果显示,柏兰尼液的溶壳效果最好,其作用时间为90 s时,对丝状体形态变化和损伤影响最轻。4.条斑紫菜贝壳丝状体黄斑病的病程观察和可疑病原的确定。将患病贝壳丝状与正常条斑紫菜贝壳丝状体共同培养,7天后可观察到正常贝壳出现零星几个针尖大小的黄色斑点,随着感染时间增加,黄色斑点数量逐渐增加、直径逐渐增大,一般在5-7周病斑出现爆发式增加,病斑可渐渐增大至2mm左右。在显微镜下观察,发病丝状体经历棕红色、橙色、黄色的变化,最后藻丝崩解、内容物消失。从患黄斑病样品分离得到的菌株中选择17株,回接感染条斑紫菜贝壳丝状体和自由丝状体,有5株菌菌株(Ruegeria,Roseovarius,Marinomonas,Maribacter,Flavobacterium)能引起丝状体出现黄斑的症状。5.条斑紫菜绿斑病病原PCR检测方法的建立。针对条斑紫菜绿斑病病原假交替单胞菌Pseudoalteromonas tbzcY1的dnaA和dnaN基因,选择保守区设计2对简并引物pw-dnaA和pw-dnaN1,扩增片段分别为1258和1054 bp,通过16S rRNA、dnaA和dnaN基因序列的进化分析比较,确定tbzcY1属于海假交替单胞菌(Pseudoalteromonas marina)。选择高变区设计3对特异引物pws-dnaA2、pcs-dnaN2、pws-dnaN13,扩增片段分别为386、253、721 bp,进行特异性和灵敏性试验。结果表明这3对引物均能特异性从22种其他海水细菌中检测到***,其中pws-dnaA2灵敏度最高,检测下限为每反应4 CFU细菌或23.7 fg细菌基因组DNA。***人工侵染条斑紫菜引起绿斑病显微症状后,3对引物均能检出该病原。上述结果表明该方法可用于检测由***

关键词：条斑紫菜病害调查微生物鉴定人工感染黄斑病绿斑病 PCR检测

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夏橙绿斑病的病原鉴定及其生长特性研究

西南园艺 2005年第B5期33卷 40-42,45页

作者：王大平李道高西南农业大学园艺园林学院，重庆400716 西南农业大学园艺园林学院，重庆400716／／重庆文理学院生命科学系，永川402168

夏橙绿斑病是一种新报道的病害。通过对病原进行分离鉴定和生长特性研究．表明该病是由绿藻门虚幻球藻属虚幻球藻(Apatococcus lobatus)所致；病藻的适应温度范围比较广，5-30℃都可生长，15～25℃为其适温范围；病藻具有广泛的光适应... 详细信息

夏橙绿斑病是一种新报道的病害。通过对病原进行分离鉴定和生长特性研究．表明该病是由绿藻门虚幻球藻属虚幻球藻(Apatococcus lobatus)所致；病藻的适应温度范围比较广，5-30℃都可生长，15～25℃为其适温范围；病藻具有广泛的光适应性，在500-4000lx的光照范围内均可生长，1000-3000lx为其适宜的光照范围；在pH值为4-10时病藻均能生长，适宜生长的pH值为5-9。田间观察结果表明，该病的发生还与空气湿度密切相关，当空气湿度大于80％时，发病就严重。

关键词：夏橙绿斑病病原虚幻球藻生长特性鉴定

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套袋对柑橘果面绿斑病及果实品质的影响

贵州农业科学 2018年第1期46卷 33-35页

作者：田福敏张绍彬罗涛熊运海王大平重庆文理学院重庆永川402160

为柑橘无公害生产提供参考,选择15年树龄纽荷尔脐橙进行试验,研究乳白色单层纸袋和外黄内黑双层纸袋进行果实套袋对纽荷尔脐橙果面绿斑病和果实品质的影响。结果表明:纽荷尔脐橙果实套乳白色单层纸袋可提高其果皮亮度、黄色值和红色值,... 详细信息

为柑橘无公害生产提供参考,选择15年树龄纽荷尔脐橙进行试验,研究乳白色单层纸袋和外黄内黑双层纸袋进行果实套袋对纽荷尔脐橙果面绿斑病和果实品质的影响。结果表明:纽荷尔脐橙果实套乳白色单层纸袋可提高其果皮亮度、黄色值和红色值,明显改善果实外观品质;套外黄内黑双层纸袋果实的着色较差,单果重、果形指数与未套袋果实差异不显著;套袋果实VC含量均比未套袋果实高,且差异达显著水平,但可溶性固形物、总糖和可滴定酸含量与未套袋果实差异不显著。套袋能有效控制果面绿斑病发生,且乳白色单层纸袋除能有效控制果面病虫害外,还可改善果实外观品质,增加果实商品价值,实现无公害生产。乳白色单层纸袋优于外黄内黑双层纸袋的套袋效果。

关键词：纽荷尔脐橙套袋绿斑病果实品质柑橘

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条斑紫菜绿斑病及其相关生态因子的初步研究

渔业现代化 2007年第4期34卷 44-46页

作者：林秋生闵建闫咏周亚文梁丽杜海欧马家海上海水产大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海200090 江苏省如东县渔业技术推广站江苏如东226400

对2004—2005年度江苏南部的条斑紫菜绿斑病进行了研究。该病主要出现在幼叶期和成叶期,发病时间从晚秋到早春。肉眼观察患病部位呈绿色,不久腐烂分解,留下带绿缘的孔洞。显微镜观察发现其主要症状为在藻体的中部和边缘出现圆形的绿色病... 详细信息

对2004—2005年度江苏南部的条斑紫菜绿斑病进行了研究。该病主要出现在幼叶期和成叶期,发病时间从晚秋到早春。肉眼观察患病部位呈绿色,不久腐烂分解,留下带绿缘的孔洞。显微镜观察发现其主要症状为在藻体的中部和边缘出现圆形的绿色病斑,以最初患病处为中心成放射状,不久便从中心部脱落。不同生态因子下的实验结果表明,海水温度下降和减低养殖密度可以在一定程度上抑制该病原菌的蔓延。冷藏网的使用是防治绿斑病在高温季节发生和蔓延的主要措施。

关键词：条斑紫菜绿斑病生态因子

条斑紫菜(Pyropia yezoensis)绿斑病病原菌的分离鉴定

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渔业科学进展 2019年第4期40卷 140-146页

作者：李杰牟宗娟杨慧超茅云翔阎永伟莫照兰青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室农业农村部海水养殖病害防治重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071 中国海洋大学海洋生命学院青岛266003 上海海洋大学水产与生命学院上海201306

绿斑病(Green spot disease)是一种常见的海区栽培条斑紫菜(Pyropia yezoensis)病害,在整个紫菜栽培期间都可能发生,以每年11~12月份最为严重,主要出现在幼叶期和成叶期。首先,在叶状体上出现红色或淡红色小斑,而后逐渐转变为绿色,病斑... 详细信息

绿斑病(Green spot disease)是一种常见的海区栽培条斑紫菜(Pyropia yezoensis)病害,在整个紫菜栽培期间都可能发生,以每年11~12月份最为严重,主要出现在幼叶期和成叶期。首先,在叶状体上出现红色或淡红色小斑,而后逐渐转变为绿色,病斑继续扩展,在叶状体表面形成若干孔洞,后期几乎整个藻体变绿。本研究对日照地区患绿斑病的条斑紫菜进行病原菌分离纯化,得到5株优势菌(编号为Y1~Y5),人工回感实验结果显示,Y1可以引起健康条斑紫菜发生绿斑病。对Y1进行了生理生化检测、16S rRNA、dnaA和dnaN基因序列分析,确定病原菌为海洋假交替单胞菌(Pseudoalteromonas marina)。对绿斑病的发病进程进行了观察,并检测了培养温度、海水比重和养殖密度等环境因子对绿斑病发生的影响,结果显示,高温和高密度养殖会加速绿斑病病情的发展,海水比重为1.022时,绿斑病发病较严重。本研究确定了一株引起条斑紫菜绿斑病的病原菌,并分析了部分理化因子对感染的影响,为条斑紫菜绿斑病的防控提供了基础数据。

关键词：条斑紫菜叶状体绿斑病海洋假交替单胞菌