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β1整合素介导AVP对心脏成纤维细胞增殖和粘附迁移的诱导作用及其与高血压心脏重构的关系

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β1整合素介导AVP对心脏成纤维细胞增殖和粘附迁移的诱导作用及其...

作者：彭育红第四军医大学

学位级别：硕士

随着细胞生物学、分子生物学和细胞免疫化学的发展，高血压心脏间质的问题已成为研究热点。心肌细胞外基质(ECM)胶原网的改变是高血压病发生发展中的重要病理过程之一，贯穿高血压病、心肌肥厚和心肌纤维化的始终，是一个自身不断发... 详细信息

随着细胞生物学、分子生物学和细胞免疫化学的发展，高血压心脏间质的问题已成为研究热点。心肌细胞外基质(ECM)胶原网的改变是高血压病发生发展中的重要病理过程之一，贯穿高血压病、心肌肥厚和心肌纤维化的始终，是一个自身不断发展的过程。现已证实，血流动力学因素和多种神经体液因素均可以影响ECM的代谢，并大多数与ECM受体整合素家族有关。研究表明，作为下丘脑分泌的内分泌多肽，精氨酸加压素(AVP) 与高血压病左室肥厚关系密切，伴左室肥厚的高血压患者血浆AVP浓度明显高于无左室肥厚的患者。体外研究显示：AVP可以诱导心肌细胞肥大并影响心脏成纤维细胞(CFs)胶原代谢。但是，AVP与ECM受体的关系;AVP 对CFs在基质胶原网中粘附、迁移的影响;调节β整合素表达对AVP作用的影响，这些问题目前均尚不清楚。本课题研究AVP对CFs增殖、粘附、迁移和β整合素表达的影响以及β整合素反义寡核苷酸(ASODN)和白介素-1β(IL-1β)的干预作用，旨在探讨AVP诱导高血压心脏间质重构形成中粘附分子的作用以及应用ASOND技术和细胞因子逆转重构的可能机制，为预防和消退心脏间质重构提供理论依据和新的解决途径。本研究以培养的新生Sprague-Dawley(SD)大鼠CFs为实验模型，采用 DNA合成、原位酶联免疫吸附测定(ELISA)、H-胸腺嘧啶核苷(H-TdR)掺入法、H-脯氨酸掺入法、MTT比色法和胶原凝胶收缩指数测定等技术，分别观察：(1)AVP对CFs增殖、超微结构、β整合素表达及胶原凝胶收缩特第四军医大学硕士学位论文一性的影响;p)pl整合素ASOND对CFS细胞数目、DNA合成功能和胶原合成功能的影响;o叩 l整合素 ASOND对 AVP诱导的 CFS增殖、DI整合素表达、DNA合成功能和胶原合成功能及胶原凝胶收缩特性的影响;O)IL刁P对AVP诱导的CFSpl整合素表达和胶原凝胶收缩特性的影响。研究结果显示：＊)在 10’＼10”‘M AVP作用下，CFS细胞数目随着A＼！－P 干预浓度的增加呈递增趋势;其中，作用 24h，10“‘M AVP组的 CFS MTT 反应A值明显高于对照组的A值(＜0刀1卜作用48h，10”’M AV P组和IO’‘M AVP组的A值均明显高于对照组;48h组CFS MTT反应A值均明显高于 24h组;10’‘M AVP组与其余实验组之间比较差异均有非常显著性意义 (＜0刀1)C)在透射电镜下，10”’M AVP作用 24h后 CFS体积大于空白对照组，胞浆内粗面内质网部分扩张，线粒体。微丝增多(照片5);48h后CFS 体积明显增大，粗面内质网显著扩张，核糖体、线粒体数目明显增多，呈典型合成旺盛表现(照片6、7)。o)在10”L10”‘M AVP作用下，CFS表面6;整合素表达水平随着AVP浓度的增加呈上升趋势，各组之间吸光度差异有非常显著性意义o二4刀3;P＜0刀1)，其中，IO”M＊VP和10”‘M＊VP组的 CFSp;整合素表达水平明显高于对照组(功．05;P叼．of);10”‘M AVP组与10“’和10“’M＊VP组比较差异也有显著性意义沪＜005卜纤p;整合素 ASOND链与AVP共同作用组CFS pl整合素表达水平明显低于AVP组、正义链十＊VP组和错配链十＊VP组o＜0刀1X正义链十＊＊P组和错配链十 AVP组的CFS pl整合素表达水平与AVP组比较均无统计学意义o叩刀5X ＊整合素ASOND组培养的CFS细胞数目明显低于对照组、正义链组和错配链组(尸＜001，P＜***，尸＜0刀5)。p;整合素ASOND组的CFS3H－Td＊掺入率明显低于对照组(＜0刀1h 也明显低于正义链组(＜0刀5卜pl整合素ASOND组的CFS’H书氨酸掺入率明显低于对照组汐＜0刀1＊也明显低于正义链组(＜0刀5卜的)空白对照组和pl整合素ASOND与AVP共同作用组细胞数目都低于AVP组和正义链＋AVP组，并且均有统计学意义 (＜0刀5卜B;整合素ASOND与AVP共同作用组的CFS’H－TdR掺入率明显低于空白对照组、AVP组和正义链十AVP组，并且均有非常显著性意义 o＜001XAVP组和正义链＋AVP组的CFS’H－TdR掺入率均高于空白对照组(＜001卜反义链十AVP组的 CFS’HJ氨酸掺入率明显低于空白对照组。－3－第四用医大

关键词：精氨酸升压素结合素类 CD29 ASOND 心脏成纤维细胞 IL-1β

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慢性移植肾病与整合素连接激酶

国际泌尿系统杂志 2009年第2期29卷 271-276页

作者：解水勇(综述) 晏强邹和群(审校) 桂林南方医科大学附属桂林医院解放军181医院全军肾移植与透析治疗中心广西541002

慢性移植肾病（CAN）已成为移植肾远期失功的一个主要原因，其发生原因和发病机制目前尚不清楚。CAN多发生于肾移植数月后，其分子生物学发病机制研究已广泛展开。本文就CAN发病机制研究现状予以综述，有利于更好理解本病发病机制以及... 详细信息

慢性移植肾病（CAN）已成为移植肾远期失功的一个主要原因，其发生原因和发病机制目前尚不清楚。CAN多发生于肾移植数月后，其分子生物学发病机制研究已广泛展开。本文就CAN发病机制研究现状予以综述，有利于更好理解本病发病机制以及开展临床CAN防治研究。

关键词：肾疾病肾移植结合素类磷酶转移酶类

五味子对急性四氯化碳中毒大鼠肝整合素α1的影响

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医学临床研究 2008年第12期25卷 2122-2125页

作者：刘涛蔡绍先汪达丽陈玮莹邹立郑宇琼温博贵广东省汕头大学医学院广东汕头515041 汕头卫生学校广东汕头515073

【目的】检测急性四氯化碳(CCl4)中毒大鼠肝细胞中整合素α1(Integrinα1)的表达,探讨五味子在治疗急性肝损伤时对于Integrinα1表达的影响及意义。【方法】将Wistar大鼠随机分为对照组、中毒组和治疗组。中毒组和治疗组大鼠经腹腔一次... 详细信息

【目的】检测急性四氯化碳(CCl4)中毒大鼠肝细胞中整合素α1(Integrinα1)的表达,探讨五味子在治疗急性肝损伤时对于Integrinα1表达的影响及意义。【方法】将Wistar大鼠随机分为对照组、中毒组和治疗组。中毒组和治疗组大鼠经腹腔一次性注射20%的CCl4(按0.2 mL/100 g剂量)致毒。治疗组以五味子提取液每天(0.5 mL/100 g)灌胃,中毒组则用生理盐水每天(0.5 mL/100 g)灌胃。不同时间处死大鼠,用RT-PCR和免疫组化方法检测各组大鼠肝组织中Integrinα1的表达。【结果】RT-PCR和免疫组化结果显示,治疗组大鼠肝中Integrinα1 mRNA及蛋白的表达均高于中毒组,两组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。【结论】五味子应用于CCl4中毒大鼠急性肝损伤的治疗,可以促进肝细胞Integrinα1 mRNA及蛋白的表达,提示五味子对大鼠肝脏的保护作用可能与调节Integrinα1的代谢具有相关关系。

关键词：四氯化碳中毒结合素类肝五味子大鼠

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整合素连接激酶与肾脏疾病

国外医学（泌尿系统分册） 2003年第5期23卷 606-608页

作者：曾莉黄颂敏四川大学华西医院，四川成都610041

整合素连接激酶 (integrin linkedkinase,ILK)是一种丝氨酸 /苏氨酸蛋白激酶 ,可以同整合素b1、b3亚基胞浆域结合 ,参与多种信号传导通路 ,包括整合素、生长因子及Wnt信号传导通路 ,在调节细胞粘附、凋亡、铺展、迁移、生长、细胞周期... 详细信息

整合素连接激酶 (integrin linkedkinase,ILK)是一种丝氨酸 /苏氨酸蛋白激酶 ,可以同整合素b1、b3亚基胞浆域结合 ,参与多种信号传导通路 ,包括整合素、生长因子及Wnt信号传导通路 ,在调节细胞粘附、凋亡、铺展、迁移、生长、细胞周期、基质积聚、肿瘤形成等过程中起重要作用 ,与肾脏疾病的发生过程相关。

关键词：肾疾病结合素类蛋白激酶类

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子宫内膜异位症中整合素表达的研究

现代妇产科进展 2002年第2期11卷 107-109页

作者：杭爱国刘玲吴赟钱海虹周美华胡莉萍上海市第一妇婴保健院上海200040 上海市杨浦区中心医院

目的 :研究整合素α4、α5、β1亚单位及αvβ3在子宫内膜异位症中的表达。方法 :采用免疫组化法分析子宫内膜异位症 2 7例的在位内膜和异位内膜整合素α4、α5、β1及αvβ3的表达 ,并选择同期正常育龄 13例子宫内膜进行对照。结果 ... 详细信息

目的 :研究整合素α4、α5、β1亚单位及αvβ3在子宫内膜异位症中的表达。方法 :采用免疫组化法分析子宫内膜异位症 2 7例的在位内膜和异位内膜整合素α4、α5、β1及αvβ3的表达 ,并选择同期正常育龄 13例子宫内膜进行对照。结果 :整合素α4、α5、β1及αvβ3在正常子宫内膜以及内异症患者的在位内膜和异位内膜腺上皮均有不同程度表达 ,α5在内异症中表达显著低于正常子宫内膜 ;而αvβ3在血管内皮细胞中有极显著性的阳性表达 ,以增生期异位灶为甚。结论 :推测内异症中整合素α5的低表达和血管内皮细胞中αvβ3的高表达可能与内异症发病有关。

关键词：细胞粘着分子结合素类子宫内膜异位症子宫内膜

整合素CD11b/CD18在喉癌患者淋巴细胞上的表达及临床意义

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山东医大基础医学院学报 2002年第1期16卷 12-14页

作者：张代杰栾信庸山东大学齐鲁医院济南250012

目的 :评价CD11b、CD18在喉癌诊断、病情进展及治疗监测中的作用。方法 :采用流式细胞免疫学方法测定正常人 31例、喉咽部良性肿瘤 9例及喉癌 32例的外周血淋巴细胞上CD11b、CD18的含量。结果 :喉癌患者外周血淋巴细胞上CD11b、CD18的... 详细信息

目的 :评价CD11b、CD18在喉癌诊断、病情进展及治疗监测中的作用。方法 :采用流式细胞免疫学方法测定正常人 31例、喉咽部良性肿瘤 9例及喉癌 32例的外周血淋巴细胞上CD11b、CD18的含量。结果 :喉癌患者外周血淋巴细胞上CD11b、CD18的含量明显低于正常人及咽喉部良性肿瘤患者 (P <0 .0 5 )。结论 :CD11b、CD18在喉癌的演变过程中有抑制肿瘤侵袭转移的作用 ,测定淋巴细胞上CD11b。

关键词：淋巴细胞结合素类流式细胞术喉癌

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整合素与肿瘤侵袭及转移的关系

肿瘤防治杂志 2004年第3期11卷 317-320页

作者：余小冬杨瑞森于金明山东省肿瘤防治研究院胸外科山东济南250117 山东省肿瘤防治研究院放疗科山东济南250117

肿瘤细胞与细胞外基质间的相互作用影响肿瘤的发生、增殖、存活和转移到其他组织的能力。许多是由分布广泛的整合素介导的。整合素是细胞黏附、细胞迁移、细胞周期和程序化死亡 (凋亡 )所必须的 ,它和其他信号途径一起调节肿瘤的发生、... 详细信息

肿瘤细胞与细胞外基质间的相互作用影响肿瘤的发生、增殖、存活和转移到其他组织的能力。许多是由分布广泛的整合素介导的。整合素是细胞黏附、细胞迁移、细胞周期和程序化死亡 (凋亡 )所必须的 ,它和其他信号途径一起调节肿瘤的发生、侵袭及转移。就整合素的结构。

关键词：肿瘤结合素类淋巴细胞肿瘤浸润淋巴转移综述文献

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整合素在中枢神经系统中的作用

国际儿科学杂志 2008年第1期35卷 38-40页

作者：李晋辉(综述) 母得志(审校) 四川大学华西第二医院儿科成都610041

整合素是位于细胞表面的重要黏附分子，具有介导细胞与细胞外基质及细胞与细胞问的黏附，调节细胞生存、增殖、分化等多项功能。中枢神经系统内整合素分布广泛，通过其与周围基质和神经细胞的相互作用，传递信息，在中枢神经系统的发育... 详细信息

整合素是位于细胞表面的重要黏附分子，具有介导细胞与细胞外基质及细胞与细胞问的黏附，调节细胞生存、增殖、分化等多项功能。中枢神经系统内整合素分布广泛，通过其与周围基质和神经细胞的相互作用，传递信息，在中枢神经系统的发育和功能维持中起重要作用。对整合素的进一步研究，可能为防治中枢神经系统疾病提供新的切入点和新的临床思路。

关键词：结合素类中枢神经系统整合素细胞外基质

整合素β1与β3在非小细胞性肺癌及其淋巴结中的表达

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医学临床研究 2007年第5期24卷 738-741页

作者：汤轶刘建新金龙玉湖南省肿瘤医院胸外科湖南长沙410006 中南大学湘雅三医院胸外科湖南长沙410013

【目的】了解整合素β1与β3在非小细胞性肺癌(NSCLC)及其淋巴结组织中的表达,分析其与临床病例特征之间的关系。【方法】随机抽取42例术前未接受任何辅助治疗NSCLC及其淋巴结和10例癌旁正常肺组织,采用免疫组织化学SABC(链霉素-生物素... 详细信息

【目的】了解整合素β1与β3在非小细胞性肺癌(NSCLC)及其淋巴结组织中的表达,分析其与临床病例特征之间的关系。【方法】随机抽取42例术前未接受任何辅助治疗NSCLC及其淋巴结和10例癌旁正常肺组织,采用免疫组织化学SABC(链霉素-生物素-酶复合物)法检测的石蜡切片标本中的整合素β1与β3的表达并进行比较。【结果】①整合素β1与β3在NSCLC组织组中阳性率高于癌旁正常肺组织组;在转移性淋巴结组中阳性率表达高于非转移性淋巴结组。②整合素β1及β3在原发病灶的阳性表达率与NSCLC分化程度、淋巴结转移情况及其病理分级等临床病例因素不同而有显著差异。【结论】整合素β1与β3在NSCLC和转移淋巴结中的表达明显强于癌旁正常肺组织和非转移性淋巴结;整合素β1与β3在NSCLC中的表达与NSCLC的组织分化程度和恶性程度有关,并可能参与了NSCLC的发生,发展及淋巴结转移过程。

关键词：癌,非小细胞肺淋巴结结合素类