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作者：吴宇航华中农业大学

学位级别：硕士

云斑天牛Batocera horsfieldi（Hope）是一种重要的蛀杆害虫,由于其幼虫具有生活隐蔽、活动周期长等特点,常规的防治手段很难达到预期的防治效果。昆虫嗅觉系统在其多种生理活动中起着关键作用,其中气味结合蛋白（Odorant-Binding Prote... 详细信息

云斑天牛Batocera horsfieldi（Hope）是一种重要的蛀杆害虫,由于其幼虫具有生活隐蔽、活动周期长等特点,常规的防治手段很难达到预期的防治效果。昆虫嗅觉系统在其多种生理活动中起着关键作用,其中气味结合蛋白（Odorant-Binding Proteins,OBPs）参与运输信息化学物质穿过昆虫嗅觉感器淋巴液,是嗅觉系统中重要的功能蛋白。探明云斑天牛嗅觉感受的分子机制,可为研发基于嗅觉调控技术的天牛防治策略提供重要依据。为系统地探究云斑天牛的嗅觉感受机制,本研究通过Illumina Hi Seq测序平台对云斑天牛嗅觉相关基因进行分析,测定了其中4个Bhor OBPs与寄主植物挥发物的结合特性,以期为探明Bhor OBPs在云斑天牛嗅觉感受中的功能,以及为筛选天牛行为活性物质提供理论依据。主要研究结果如下:1.云斑天牛成虫触角转录组测序及嗅觉相关基因鉴定通过生物信息学分析,在云斑天牛成虫触角转录组中鉴定了116个嗅觉相关基因,包括43个OBPs基因,12个Chemosensory Proteins（CSPs）基因,43个Odorant Receptors（ORs）基因,12个Ionotropic Receptors（IRs）基因和3个Sensory Neuron Membrane Proteins（SNMPs）基因。2.云斑天牛Bhor OBPs组织表达特性通过荧光定量PCR技术测定15个Bhor OBPs在云斑天牛雌雄成虫10个组织中的表达。结果表明,多数Bhor OBPs在雌雄成虫中具有相同的组织表达特征,不同Bhor OBPs在不同组织中的表达水平有较大差异。其中Bhor OBP8、Bhor OBP28和Bhor OBP29在成虫触角中高表达,Bhor OBP16、Bhor OBP27和Bhor OBP33在成虫下唇须与下颚须中高表达,Bhor OBP19、Bhor OBP24和Bhor OBP30在成虫各组织表达。在嗅觉相关器官中高表达的Bhor OBPs可能在云斑天牛的嗅觉识别过程中发挥重要作用。3.云斑天牛寄主植物白蜡枝叶挥发物的分离鉴定利用动态顶空吸附与GC-MS技术,对云斑天牛寄主植物白蜡Fraxinus chinensis枝叶挥发物进行了分离鉴定。结果表明,在本实验条件下共分离鉴定34种白蜡枝叶挥发性化合物,其中烯烃类14种,烷烃类9种,酯类8种,酮类、醛类和醇类各1种。对比分析云斑天牛产卵寄主植物杨树Populus与补充营养寄主植物野蔷薇Rosa multiflora的挥发物发现,其中11种挥发物是上述3种植物共有的挥发物。4.云斑天牛Bhor OBPs的原核表达、蛋白纯化及与配体的结合特性通过原核表达与蛋白纯化技术,成功获得在云斑天牛成虫中高表达的Bhor OBP16、Bhor OBP28、Bhor OBP30以及Bhor PBP2的体外重组蛋白。通过荧光竞争结合实验,测定了上述4个重组蛋白与11种寄主植物共有挥发物以及3种云斑天牛性信息素的结合特性。结果表明,在p H 7.4条件下,重组Bhor OBP16与3-蒈烯、α-蒎烯、D-柠檬烯、β-蒎烯,重组Bhor OBP28与（E）-β-罗勒烯、α-蒎烯、D-柠檬烯、β-蒎烯,以及重组Bhor PBP2与3-蒈烯、α-蒎烯、D-柠檬烯、β-蒎烯、己醛具有结合能力（Ki＜50μmol/L）;重组Bhor OBP30与供试的14种化合物均无结合能力（Ki＞50μmol/L）。筛选与上述Bhor OBPs具有结合能力的化合物（Ki＜50μmol/L）,分别进行荧光淬灭实验。结果表明,重组Bhor OBP16与3-蒈烯、α-蒎烯、D-柠檬烯,重组Bhor OBP28与α-蒎烯、D-柠檬烯、β-蒎烯,以及重组Bhor PBP2与3-蒈烯、α-蒎烯、D-柠檬烯、β-蒎烯、己醛均发生静态淬灭,表明重组蛋白与化合物可以形成稳定的“蛋白-配体”复合物。通过同源建模与分子对接分析上述Bhor OBPs与配体的结合机制,研究表明疏水作用力和氢键作用力发挥着重要作用。筛选与上述Bhor OBPs发生静态淬灭的化合物,分别进行圆二色谱实验,结果表明,重组Bhor OBP16、Bhor OBP28与Bhor PBP2的主要二级结构为α螺旋。在p H7.4条件下,重组Bhor OBP16随配体3-蒈烯浓度的升高,α螺旋逐渐增加;随配体α-蒎烯浓度的升高,α螺旋先增加后减少。重组Bhor OBP28随配体α-蒎烯、D-柠檬烯和β-蒎烯浓度的升高,α螺旋逐渐减少。重组Bhor PBP2随着配体3-蒈烯、α-蒎烯、D-柠檬烯、β-蒎烯和己醛浓度的升高,α螺旋逐渐减少。上述配体均能引起重组Bhor OBPs的二级结构产生构象变化。综上所述,本研究鉴定了云斑天牛的116个嗅觉相关基因,明确了15个Bhor OBPs的组织表达特性,探明了4个重组Bhor OBPs与11种寄主植

关键词：云斑天牛嗅觉相关基因气味结合蛋白寄主挥发物结合特性

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麻黄碱印迹聚合物合成条件对其形态及结合特性的影响

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色谱 2005年第1期23卷 7-11页

作者：董襄朝王薇王海波孙慧李琰王宁刘淑霞南开大学化学系天津300071

印迹聚合物合成条件对聚合物性能的影响是分子印迹技术中的一项重要研究内容。以左旋麻黄碱为印迹分子,甲基丙烯酸为功能单体,使用不同的交联剂和致孔剂合成了印迹聚合物,并对所得到的印迹聚合物的比表面积、孔结构和结合特性进行了评... 详细信息

印迹聚合物合成条件对聚合物性能的影响是分子印迹技术中的一项重要研究内容。以左旋麻黄碱为印迹分子,甲基丙烯酸为功能单体,使用不同的交联剂和致孔剂合成了印迹聚合物,并对所得到的印迹聚合物的比表面积、孔结构和结合特性进行了评价。研究结果说明合成的印迹聚合物对印迹分子具有很好的亲和能力及选择性。致孔剂可以影响聚合物比表面积的大小及单体组成。氯仿是甲基丙烯酸乙二醇二甲基丙烯酸酯和甲基丙烯酸季戊四醇三丙烯酸酯聚合链的良溶剂,导致了比表面积及孔容较小的聚合物结构;而以乙腈为致孔剂得到的聚合物有较大的比表面积。共聚物中羧基含量的测定结果也说明,在预聚溶液中单体浓度相同的条件下,以不同的致孔剂进行合成得到的聚合物中甲基丙烯酸的比例不同。聚合物的比表面积及单体浓度的差别都可能导致聚合物的结合容量不同。

关键词：分子印迹聚合物合成条件聚合物形态结合特性左旋麻黄碱

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煤矿区废水中溶解性有机质与铜的结合特性

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中国环境科学 2013年第8期33卷 1433-1441页

作者：冯启言张彦孟庆俊中国矿业大学环境与测绘学院江苏徐州221116 天津市环境保护科学研究院天津300191

为研究煤矿区废水排放对环境中重金属化学行为的影响,通过荧光滴定实验,利用铜离子选择电极法和荧光猝灭法定量化研究了矿井水和生活污水中溶解性有机质对铜的结合行为.结果表明,铜离子选择性电极法能精确地定量化这2类废水中有机质对... 详细信息

为研究煤矿区废水排放对环境中重金属化学行为的影响,通过荧光滴定实验,利用铜离子选择电极法和荧光猝灭法定量化研究了矿井水和生活污水中溶解性有机质对铜的结合行为.结果表明,铜离子选择性电极法能精确地定量化这2类废水中有机质对铜的结合容量,其中矿井水中有机质对铜具有较大的结合容量,可以达到163.9mg/g,而生活污水中有机质对铜的结合容量相对较小,只有72.6mg/g.荧光猝灭法结果表征了这2类废水中各个组分对铜的结合特性,其中矿井水中的富里酸(A峰)对铜具有较强的结合容量,而生活污水中的类蛋白组分对铜的结合能力相对较弱.2类废水与铜结合前后的红外光谱变化结果表明矿井水中腐殖酸物质与铜的结合是一种化学反应,其中的酚羟基和羧基等官能团参与了反应,但生活污水中类蛋白物质的官能团与铜并没有发生化学结合反应.

关键词：溶解性有机质结合特性离子选择电极荧光猝灭定量化

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右旋邻氯扁桃酸分子印迹聚合物的制备及结合特性研究

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高分子学报 2003年第5期13卷 724-727页

作者：李萍戎非朱馨乐胡濬喆袁春伟东南大学生物医学工程系吴健雄实验室

以右旋邻氯扁桃酸为模板分子合成了具有高选择性的分子印迹聚合物作为手性分离材料 .紫外光谱研究说明在聚合开始之前模板分子与功能单体形成了配合物 ,并用Hyperchem软件模拟其分子结构 ,结合能分别为 -1 643 7× 1 0 4 J·mol- 1 和 ... 详细信息

以右旋邻氯扁桃酸为模板分子合成了具有高选择性的分子印迹聚合物作为手性分离材料 .紫外光谱研究说明在聚合开始之前模板分子与功能单体形成了配合物 ,并用Hyperchem软件模拟其分子结构 ,结合能分别为 -1 643 7× 1 0 4 J·mol- 1 和 -4 2 799× 1 0 4 J·mol- 1 .分子印迹聚合物对模板分子的结合量高于其它类似物 ,手性分离因子α达 1 76.Scatchard分析表明分子印迹聚合物在识别右旋邻氯扁桃酸分子过程中存在两类结合位点。

关键词：右旋邻氯扁桃酸分子印迹聚合物制备结合特性配合物模拟手性药物中间体分子结构

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环文蛤角质层与棱柱层结合特性研究

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农业机械学报 2013年第S1期44卷 297-300,287页

作者：马云海刘玉成彭杰佟金王智芹高喜军吉林大学工程仿生教育部重点实验室长春130025 吉林大学工程训练中心长春130022

采用JSM-6700F型扫描电子显微镜和CSM instruments Revetest Xpress Plus型划痕测试仪分别观察了环文蛤角质层与棱柱层表面微观形貌和测定环文蛤角质层与棱柱层之间结合特性。结果表明,当环文蛤角质层背面球形颗粒的粒径与棱柱层表面凹... 详细信息

采用JSM-6700F型扫描电子显微镜和CSM instruments Revetest Xpress Plus型划痕测试仪分别观察了环文蛤角质层与棱柱层表面微观形貌和测定环文蛤角质层与棱柱层之间结合特性。结果表明,当环文蛤角质层背面球形颗粒的粒径与棱柱层表面凹孔的孔径处在同一范围时,角质层和棱柱层的结合特性较好。环文蛤不同部位角质层表面形成的划痕存在一定差异,横向刻划时环文蛤各部分的摩擦因数变化波动比较大,纵向刻划时其摩擦因数变化波动均较小,角质层与棱柱层的结合情况相对较好,尤其是环文蛤腹部的角质层与棱柱层的结合情况更优。

关键词：环文蛤角质层棱柱层结合特性

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等离子体溅射对微型钻头表面ta-C涂层结合特性及摩擦性能的影响

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硬质合金 2023年第1期40卷 16-25页

作者：罗春峰胡健陈成屈建国深圳市金洲精工科技股份有限公司广东深圳518000

无氢类金刚石涂层(ta-C)常用于提高刀具表面润滑性,提升极细微型钻头的排屑性能,降低断刀率。但ta-C涂层内应力大,与硬质合金钻头间的结合力较差,等离子溅射是提升涂层与基体之间结合力的有效方法。本文利用离子源产生的氩离子对硬质合... 详细信息

无氢类金刚石涂层(ta-C)常用于提高刀具表面润滑性,提升极细微型钻头的排屑性能,降低断刀率。但ta-C涂层内应力大,与硬质合金钻头间的结合力较差,等离子溅射是提升涂层与基体之间结合力的有效方法。本文利用离子源产生的氩离子对硬质合金微型钻头和样块表面进行等离子体溅射,研究基体电流密度对基体表面形貌的影响;再利用阴极弧技术在等离子体溅射后的硬质合金表面制备ta-C涂层,研究不同溅射基体电流密度对ta-C涂层结合特性的影响。利用球盘式摩擦磨损试验机对溅射后的硬质合金表面以及ta-C涂层摩擦系数进行测试。通过钻孔测试,研究钻孔过程中基体电流密度对涂层与基体结合特性以及涂层微型钻头断刀率的影响。结果表明,随着溅射基体电流密度的增加,基体表面钴含量逐渐减少。压痕测试结果显示,合理的溅射基体电流密度(19.1 mA/cm^(2))下,可得到高结合力等级(HF1)。高结合力等级的ta-C涂层,摩擦系数最低为0.096。涂层钻头加工通信印制电路板1000孔后,高结合力ta-C涂层钻头的槽内涂层无异常脱落,测试1000支后无断刀。

关键词：等离子体溅射 ta-C涂层结合特性摩擦性能微型钻头

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β_2糖蛋白I与重组乙型肝炎表面抗原的结合特性

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中华肝脏病杂志 2002年第1期10卷 31-33页

作者：高普均郭延军曲立科时彤张洪雁董春娥杨翰仪白求恩医科大学第一临床学院消化科长春130021 白求恩医科大学基础医学院生物化学教研室吉林省计划生育研究所

目的研究ＨＢｓＡｇ与β２糖蛋白Ｉ（β２ＧＰ　Ｉ）的结合特性，探讨 β２ＧＰＩ参与ＨＢＶ感染的机制。方法采用酶联免疫吸附实验，研究标记的人β２ＧＰＩ与重组ＨＢｓＡｇ的结合特性。结果标记的人β２ＧＰＩ与ＨＢｓＡｇ... 详细信息

目的研究ＨＢｓＡｇ与β２糖蛋白Ｉ（β２ＧＰ　Ｉ）的结合特性，探讨 β２ＧＰＩ参与ＨＢＶ感染的机制。方法采用酶联免疫吸附实验，研究标记的人β２ＧＰＩ与重组ＨＢｓＡｇ的结合特性。结果标记的人β２ＧＰＩ与ＨＢｓＡｇ有高度亲和力，并可以被过量的未标记人β２ＧＰＩ所抑制。结论 β２ＧＰＩ与ＨＢｓＡｇ的结合特性可能是β２ＧＰＩ介导乙肝病毒感染肝细胞的结构基础。

关键词： β2糖蛋白Ⅰ 重组乙型肝炎表面抗原乙型肝炎病毒结合特性 HBV感染

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Cu/Mo/Cu轧制复合界面的结合特性

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中国有色金属学报 2011年第9期21卷 2163-2167页

作者：张兵王快社孙院军王莎西安建筑科技大学冶金工程学院西安710055 金堆城钼业股份有限公司西安710077 西部金属材料股份有限公司西安710065

采用轧制方法制备Cu/Mo/Cu复合材料,利用金相显微镜、扫描电镜和电子拉伸机等研究Cu/Mo/Cu复合材料的界面结构、断裂特点和工艺参数对结合强度的影响。结果表明:轧制前经(750℃,8 min)热处理,道次变形量为55%,复合材料的界面结合紧密,... 详细信息

采用轧制方法制备Cu/Mo/Cu复合材料,利用金相显微镜、扫描电镜和电子拉伸机等研究Cu/Mo/Cu复合材料的界面结构、断裂特点和工艺参数对结合强度的影响。结果表明:轧制前经(750℃,8 min)热处理,道次变形量为55%,复合材料的界面结合紧密,最大剪切强度为77 MPa;钼层金属显微组织呈扁平纤维状,组织较为均匀,铜层金属的晶粒呈等轴状,由界面至表面晶粒逐渐增大,且分布很不均匀;复合机制为典型的裂口结合和机械啮合。

关键词： Cu/Mo/Cu复合材料轧制复合界面结合特性

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BmK AS在大鼠脑和蟑螂神经索突触体上的药理结合特性

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1999年第5期31卷 604-606页

作者：李亚军刘艳吉永华中国科学院上海生理研究所上海生命科学研究中心!上海200031

用ＩＮＤＯＧＥＮ法对一个新型东亚钳蝎活性多肽ＢｍＫＡＳ进行了１２５Ｉ标记。分别在哺乳动物和昆虫标本上观察了标记物的药理结合特性。结果表明ＢｍＫＡＳ在大鼠脑突触体标本上有单一非协同结合位点，其平... 详细信息

用ＩＮＤＯＧＥＮ法对一个新型东亚钳蝎活性多肽ＢｍＫＡＳ进行了１２５Ｉ标记。分别在哺乳动物和昆虫标本上观察了标记物的药理结合特性。结果表明ＢｍＫＡＳ在大鼠脑突触体标本上有单一非协同结合位点，其平衡解离常数Ｋｄ与最大结合容量Ｂｍａｘ分别为１．４９ｎｍｏｌ／Ｌ和１．３９ｎｍｏｌ／ｇ。此外，ＢｍＫＡＳ在蟑螂神经索突触体标本同样也只有单一非协同结合位点，其平衡解离常数Ｋｄ与最大结合容量Ｂｍａｘ分别为０．７９ｎｍｏｌ／Ｌ和６．６０ｎｍｏｌ／ｇ。结果提示，ＢｍＫＡＳ类蝎神经毒素在哺乳动物和昆虫兴奋性细胞膜上存在着特异的靶受体。

关键词：蝎神经毒素钠通道 125I 结合特性

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^(125)I-γ-Ty-Folate的制备及其体外结合特性

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复旦学报（医学版） 2004年第6期31卷 625-628页

作者：万丹晶钟高仁朱建华复旦大学药学院放射药学教研室上海200032

目的　制备碘标记叶酸酪氨酸复合物 (12 5I γ Ty Folate)并进行体外结合特性的研究。方法　叶酸(Folate)与酪氨酸甲酯通过EDC连接 ,水解后生成叶酸酪氨酸复合物 (γ Ty Folate)。12 5I γ Ty Folate采用Iodogen法标记 ,C18反向色谱柱... 详细信息

目的　制备碘标记叶酸酪氨酸复合物 (12 5I γ Ty Folate)并进行体外结合特性的研究。方法　叶酸(Folate)与酪氨酸甲酯通过EDC连接 ,水解后生成叶酸酪氨酸复合物 (γ Ty Folate)。12 5I γ Ty Folate采用Iodogen法标记 ,C18反向色谱柱纯化 ,纸层析检测。12 5I Ty Folate与叶酸结合蛋白 β 乳球蛋白 (β lactoglobulin)进行饱和结合实验、蛋白解离实验、竞争结合实验和动力学实验 ,与HeLa细胞进行了饱和实验。结果　12 5I γ Ty Folate的标记率为 5 0 %～ 6 0 % ,纯化后比活度为 5 4 3.8GBq/mmol,放化纯度大于 95 %。BMAX为 2 0 6 .4fmol/mL ,Kd 为3.82 7× 10 -10 mol/L。12 5I Ty Folate与叶酸结合蛋白 β lactoglobulin的结合具有温度时间依赖性、可饱和性、可逆性及特异性 ,12 5I γ Ty Folate与HeLa细胞的结合具有饱和性。结论　12 5I γ Ty Folate可作为叶酸结合蛋白 β lactoglobulin的特异性配体。

关键词：叶酸体外结合蛋白酪氨酸 HeLa细胞特异性实验制备结合特性甲酯

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