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中南大学学报（医学版） 2011年第5期36卷 411-416页

作者：黄增辉曾珊欧阳淼董娟娟申竑中南大学湘雅医院医学实验研究中心长沙410008 中南大学湘雅医院肿瘤科长沙410008 中南大学湘雅医院消化内科长沙410008

目的:探讨肝素联合肝干细胞(WB-F344细胞)经脾移植对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法:构建携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体,体外培养、扩增WB-F344细胞,携带GFP基因的慢病毒转染WB-F344细胞。通过腹腔注射四氯化碳(CC l4)建立大... 详细信息

目的:探讨肝素联合肝干细胞(WB-F344细胞)经脾移植对大鼠急性肝损伤的治疗作用。方法:构建携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的慢病毒载体,体外培养、扩增WB-F344细胞,携带GFP基因的慢病毒转染WB-F344细胞。通过腹腔注射四氯化碳(CC l4)建立大鼠急性肝损伤模型,造模后24 h分别将1 mL含2×107个肝干细胞和8μL肝素的悬液经脾注入大鼠体内。移植术后1 d获取肝脏和脾脏标本进行荧光检测,分别于术后3,7,14和28 d尾静脉抽血送肝功能检测,获取肝脏组织行病理学检测。结果:经慢病毒转染3 d后,WB-F344细胞表达GFP;GFP阳性细胞经脾移植1 d后到达肝脏;实验组大鼠的肝功能和肝脏损伤修复明显优于对照组(P经脾联合肝素和WB-F344细胞移植对CC l4所导致的大鼠急性肝损伤有明显的治疗作用。

关键词：肝素肝干细胞经脾移植急性肝损伤

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IL-18BP/IL-4融合表达重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞经脾移植抑制ConA诱导的小鼠免疫性肝炎

IL-18BP/IL-4融合表达重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞经脾移植抑制...

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第二十四次全国中西医结合肝病学术会议

作者：姚航平程林芳吴晓鑫欧会林靳昌忠吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的:ConA诱导的小鼠肝炎模型是最常用来研究人类自身免疫性肝炎病理机制的理想模型。本文主要研究了白介素18结合蛋白/白介素4(IL-18BP/IL-4)融合表达重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞(***2)经脾移植,对ConA诱导的小鼠免疫性肝炎的治疗作... 详细信息

目的:ConA诱导的小鼠肝炎模型是最常用来研究人类自身免疫性肝炎病理机制的理想模型。本文主要研究了白介素18结合蛋白/白介素4(IL-18BP/IL-4)融合表达重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞(***2)经脾移植,对ConA诱导的小鼠免疫性肝炎的治疗作用及其分子机制。方法:用基因工程方法构建IL-18BP/IL-4融合表达重组腺病毒载体(Ad-IL-18BP/IL-4),并感染小鼠胎肝细胞***2。采用ELISA和Western blotting检测IL-4和IL-18BP在***2的表达,并将Ad-IL-18BP/IL-4基因转染的***2经脾移植至BALB/C小鼠。10天后,小鼠尾静脉注射ConA(剂量15mg/kg)。18小时后,小鼠被处死,留取各组小鼠的血清和肝组织。采用干式生化法检测血清转氨酶水平,HE染色分析肝脏的病理改变和肝损伤的程度。ELISA法检测小鼠血清和肝组织匀浆液中TNF-α,IL-18,IL-4,IL-10,IL-12p70和MCP-1水平;Western blott ing法分析肝组织NF-κB p65,AKT,p38-MAPK和JNK1/2的磷酸化水平。结果:Ad-IL-18BP/IL-4重组腺病毒能有效感染:***12,并在细胞内高效表达IL-18BP/IL-4融合蛋白,表达持续时间达2周。Ad-IL-18BP/IL-4基因修饰的胎肝细胞(Ad-IL-18BP/***2)经脾移植后,能有效地降低ConA注射所致的小鼠肝组织损伤,包括显著降低血清转氨酶(ALT、AST)的水平,明显改善肝脏的炎症和坏死。与对照组比较,Ad-IL-18BP/***2治疗组小鼠的血清和肝组织中TNF-α,IL-18,IL-12p70和MCP-1的表达水平显著降低,而IL-4和IL-10的水平较对照组升高。并且,治疗组小鼠的肝组织NF-κB p65,AKT,p38和JNKl/2信号分子的磷酸化水平显著受抑制。结论:Ad-IL-18BP/IL-4重组腺病毒基因修饰的胎肝细胞经脾移植,能有效抑制ConA诱导的小鼠免疫性肝炎,减轻肝脏的损伤。本研究为将来靶向肝脏疾病的生物治疗提供可行的策略。

关键词：免疫性肝炎重组腺病毒表达载体细胞因子融合蛋白经脾移植基因治疗胎肝细胞

来源： cnki会议评论

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