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经穴反应性时间动态变化与不同部位TRPV1、TRPV4表达的相关研究

经穴反应性时间动态变化与不同部位TRPV1、TRPV4表达的相关研究

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作者：沈晓炜成都中医药大学

学位级别：硕士

目的：根据针刺后不同部位TRPV1、TRPV4受体的改变探讨经穴反应性时间动态变化的机理。方法：实验分为两部分进行：(1)将清洁级的雄性SD大鼠光暗驯化7天后,先进行基础痛阈的筛选,然后按照痛阈结果进行随机分组,将大鼠分为造模组和空白组... 详细信息

目的：根据针刺后不同部位TRPV1、TRPV4受体的改变探讨经穴反应性时间动态变化的机理。方法：实验分为两部分进行：(1)将清洁级的雄性SD大鼠光暗驯化7天后,先进行基础痛阈的筛选,然后按照痛阈结果进行随机分组,将大鼠分为造模组和空白组;造模组在右足足垫部注射完全弗氏佐剂。造模成功后又按基础痛阈将大鼠随机分为模型组和模针组,每组均按照不同的处理时间点分为ZT0(7:00)、ZT4 (11:00)、ZT8(15:00)、ZT12(19:00)、ZT16(23:00)、ZT20(3:00)6个亚组。在6个不同时间点进行处理,模针组在相应时间点手针针刺大鼠患侧足三里30min,其间每5分钟捻转1min,频率为120次/min。空白组和模型组捆绑固定30min,不针刺。治疗结束后运用甩尾法检测不同时间点大鼠痛阈变化。(2)根据实验一重复测量方差分析的结果,选取针刺后痛阈曲线最高点和最低点对应的时相点进行实验,分组及造模方法同前,针刺治疗7天,在第7天治疗结束后立即取材,采用免疫组化的方法检测大鼠穴位局部、背根神经节以及脊髓中TRPV1、TRPV4的表达,比较经穴反应时间动态性与TRPV1、TRPV4的关系。结果：1、时间因素对空白组痛阈有显著影响,F=9.205,P=0.00,P0.05。3、针刺后,大鼠痛阈明显升高,时间因素对痛阈的影响有显著意义,F=30.414,P=0.0000.05)。5、背根神经节：ZT8时间点,模型组大鼠背根神经节TRPV1、TRPV4含量与空白组相比,明显增加(P0.05)。6、在脊髓：ZT8时间点,模型组的TRPV1、TRPV4含量与空白组相比,明显增加(P0.05)。ZT16时间点,模型组的TRPV1、TRPV4含量明显增加(P性波动,受时间因素的影响。表现为双谷结构,谷值分别出现在ZT4和ZT12。2、经穴反应具有时间动态性变化,不同时间点针刺均可提高大鼠的痛阈,针刺后穴位反应性的强弱受时间因素的影响,表现为单峰一谷的结构。不同时间针刺对痛阈的影响不同,说明穴位的反应性不同,其中针刺后经穴反应最佳时间点为ZT8、最差的时间点为ZT16。3、经穴反应性时间动态变化可能与针刺后穴位局部、背根神经节、脊髓TRPV1、 TRPV4兴奋的数量以及种类有关。

关键词：经穴反应性时间特征针刺 TRPV1 TRPV4

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不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动及P2X3受体影响的研究

不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动及P2X3受体影响的研究

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作者：黄士其成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动的作用及其对穴区、背根神经节、脊髓P2X3受体的影响,以期从经穴反应性动态变化为切入点,揭示择时针刺镇痛的外周机制。方法:实验由三部分组成。(1)将SD雄性大鼠(清洁级)置于动物节... 详细信息

目的:研究不同时间针刺对不同状态大鼠穴区神经电活动的作用及其对穴区、背根神经节、脊髓P2X3受体的影响,以期从经穴反应性动态变化为切入点,揭示择时针刺镇痛的外周机制。方法:实验由三部分组成。(1)将SD雄性大鼠(清洁级)置于动物节律隔离单元,驯化7天后,将大鼠随机分为空白组和空针组,每组根据处理时间的不同,分为ZT0、ZT4、ZT8、ZT12、ZT16、ZT20,六个亚组。在各时间点对空针组大鼠进行右侧“足三里”穴针刺,每5min行针一次,持续5min,留针30min,同时通过Power Lab对穴区腓总神经神经电活动进行记录,空白组不针刺,只记录神经电活动。(2)将驯化后的大鼠随机分为空白组和造模组。造模组在大鼠右侧足垫部皮内注射完全弗氏佐剂0.1ml,空白组注射等量的生理盐水。待模型制备成功后,将造模组随机分为模型组与模针组。在造模成功第2天,模针组于各亚组对应的时间点针刺患侧“足三里”穴,每5min行针一次,持续5min,留针30min,同时通过Power Lab对穴区腓总神经神经电活动进行记录,空白组及模型组不针刺,只记录神经电活动。(3)将驯化后的动物按照实验二的方法分为空白组及造模组。待模型复制成功后将造模组大鼠随机分为模型组和模针组。造模成功的第2天,根据实验二统计结果,结合前期不同时间针刺镇痛研究结果选择效应最优和最差时间点进行实验。模针组于特定时间点针刺患肢“足三里”穴,每5min行针一次,持续1min,空白及模型组只在相应时间点作捆绑处理。第7天治疗结束后,采用免疫组化法检测不同组特征时间点“足三里”穴局部皮肤组织、背根神经节(L4-L6)、脊髓(L4-L6)中P2X3受体的表达。结果:1.生理状态下:(1)不同时间点针刺可促进穴区局部神经放电次数。穴区局部神经放电次数:空针组与空白组比较,在ZT0、ZT8、ZT12和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.002、0.000、0.044和0.000;在ZT4和ZT16,差异不具有统计学意义,P值分别为0.470和0.237。(2)时间因素与各组穴区局部神经放电次数存在交互效应。在不同时间点,空针组与空白组比较,穴区局部神经放电次数差异具有统计学意义,P=0.000,P<0.05。2.病理状态下:(1)不同时间点针刺可促进穴区局部神经放电次数,降低神经放电平均幅值。穴区局部神经放电次数:模型组与空白组比较,在ZT12和ZT16,差异具有统计学意义,P值分别为0.002和0.000;在ZT0、ZT4、ZT8和ZT20,差异无统计学意义,P值分别为0.948、0.267、0.924、0.408。模针组与空白组比较,在ZT8和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.000和0.013;在ZT0、ZT4、ZT12、ZT16,差异无统计学意义,P值分别为0.314、0.665、0.188、0.631。模针组与模型组比较,在ZT4、ZT8、ZT12、ZT16和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.001、0.002、0.000、0.000和0.004;在ZT0,差异无统计学意义,P值为0.534。穴区局部神经放电平均幅值:模型组与空白组比较,在ZT4、ZT8、ZT12、ZT16和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.000、0.000、0.007、0.009和0.002;在ZT0,差异无统计学意义,P值为0.093。模针组与空白组比较,在ZT0、ZT4、ZT12、ZT16和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.001、0.000、0.003、0.016和0.003;在ZT8,差异无统计学意义,P值为0.065。模针组与模型组比较,在ZT4、ZT8、ZT12和ZT20,差异具有统计学意义,P值分别为0.000、0.000、0.037和0.009;在ZT0和ZT16,差异无统计学意义,P值分别为0.271,0.117。(2)时间因素与各组穴区局部神经放电次数存在交互效应。在不同时间点,空白组、模型组与模针组比较,穴区局部神经放电次数差异具有统计学意义,P=0.000,P<0.05;时间因素与各组穴区局部放电平均幅值存在交互效应。在不同时间点,空针组、模型组与模针组比较,穴区局部神经放电平均幅值差异具有统计学意义,F=17.433,P=0.000,P<0.05。3.在“足三里”穴区皮肤组织:ZT8时间点,与空白组相比,模型组的P2X3受体表达明显升高,P=0.000,P<0.01;与模型组相比,模针组的P2X3受体表达明显降低P=0.001,P<0.01。ZT16时间点,与空白组相比,模型组的P2X3受体表达明显升高,P=0.003,P<0.01;与模型组相比,模针组的P2X3受体表达无明显差异。4.在背根神经节(L4-L6):ZT8时间点,与空白组

关键词：择时针刺经穴反应性神经电活动 P2X3受体

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