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细辛通过上调p53介导铁死亡致大鼠肝损伤的作用机制研究

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中草药 2023年第2期54卷 593-600页

作者：鲍慧中朱丽娟刘雪枫王丽娟罗慧英甘肃中医药大学药学院甘肃兰州730000 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室甘肃兰州730000

目的探讨细辛通过上调p53表达介导铁死亡致大鼠肝损伤的作用机制。方法 32只大鼠随机分为对照组和细辛低、中、高剂量(0.27、0.81、1.35 g/kg)组,每组8只,每日ig给药1次,连续28 d。末次给药2 h后采集血清样本和肝脏样本,全自动生化仪... 详细信息

目的探讨细辛通过上调p53表达介导铁死亡致大鼠肝损伤的作用机制。方法 32只大鼠随机分为对照组和细辛低、中、高剂量(0.27、0.81、1.35 g/kg)组,每组8只,每日ig给药1次,连续28 d。末次给药2 h后采集血清样本和肝脏样本,全自动生化仪检测丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和碱性磷酸酯酶(alkaline phosphatase,ALP)水平;酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;比色法检测超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)活性和还原型谷胱甘肽(reducedglutathione,GSH)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)及Fe2+含量;化学荧光法检测活性氧物质(reactive oxide species,ROS)含量;苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肝脏病理变化;定量反转录-聚合酶链锁反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测p53、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 members 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)、转铁蛋白受体1(transferrin receptor1,TFR1)m RNA含量;Western blotting检测p53、SLC7A11、GPX4、FTH1、TFR1蛋白表达。结果与对照组比较,细辛组肝功能指标(ALT、AST、ALP)和血清致炎因子(TNF-α、IL-1β)水平显著升高(P细辛对大鼠肝脏有一定的损伤,其机制可能与上调p53、TFR1表达水平,下调FTH1表达水平,提高细胞内Fe2+含量;同时下调SLC7A11表达,使GPX4表达水平降低进而诱发肝细胞铁死亡有关。

关键词：细辛 p53 铁死亡肝损伤溶质载体家族7成员11 谷胱甘肽过氧化物酶4 铁蛋白重链1 转铁蛋白受体1

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细辛的化学成分、药理及毒理研究进展

中国实验方剂学杂志 2023年第10期29卷 224-234页

作者：刘美婷王连嵋孟晶郑宝鑫秦莎莎梁爱华天津中医药大学天津301617 中国中医科学院中药研究所中药鉴定与安全性检测评估北京市重点实验室北京100700

细辛是我国的一味传统中药,已有2000多年的用药历史,历代本草多有收录,具有解表散寒、祛风止痛、通窍、温肺化饮的功效,至今仍在临床上广泛用于治疗感冒、新型冠状病毒肺炎、哮喘、过敏性鼻炎、目痛、头痛、牙痛、口腔溃疡、湿疹等病证... 详细信息

细辛是我国的一味传统中药,已有2000多年的用药历史,历代本草多有收录,具有解表散寒、祛风止痛、通窍、温肺化饮的功效,至今仍在临床上广泛用于治疗感冒、新型冠状病毒肺炎、哮喘、过敏性鼻炎、目痛、头痛、牙痛、口腔溃疡、湿疹等病证。现代药理研究显示细辛具有解热、抗炎、止痛、抗菌、抗病毒、止咳平喘、抗过敏等多种作用。细辛具有多种化学成分,其中挥发油,既与散寒解热、止痛抗炎、抗过敏等功效相关,也是其毒性成分。细辛中还含有木脂素类、黄酮类、酰胺类、生物碱、菲类等非挥发油类成分在调节免疫、抗炎止痛、强心扩血管等方面发挥重要作用。其中的菲类化合物主要为马兜铃酸类物质,如马兜铃酸Ⅳa和马兜铃内酰胺Ⅰ,马兜铃酸Ⅳa具有显著抗炎作用。细辛的毒性和黄樟醚和马兜铃酸类成分有关,还受制备方法、剂量、产地、采集时间、药用部位、煎煮时间等多种因素影响,临床应用时应综合考虑。笔者通过检索国内外相关文献,针对细辛的化学成分-药理作用-毒理作用相关性,马兜铃酸、黄樟醚等成分的安全性研究进行了综述,旨在探究细辛的化学成分、药理毒理作用,提供客观认识细辛安全性的新视角,为细辛的临床合理用药、产品风险防控、药品科学监管等提供参考。

关键词：细辛马兜铃酸化学成分挥发油毒理学研究药理作用

基于网络药理学与非靶向代谢组学探讨细辛的肝损伤机制

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2575-2584页

作者：鲍慧中朱丽娟刘雪枫王丽娟罗慧英甘肃中医药大学药学院甘肃兰州730101 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室甘肃兰州730000 陇药产业创新研究院甘肃兰州730000 西北中藏药省部共建协同创新中心甘肃兰州730000

细辛是临床常用解表药,但其毒性限制了其使用。该研究采用网络药理学与代谢组学相结合的方法探讨细辛的肝损伤机制。GEO数据库下载肝损伤相关数据集GSE54257,采用Limma包对数据集GSE54257进行差异表达基因分析。TCMSP、ECTM、TOXNET等... 详细信息

细辛是临床常用解表药,但其毒性限制了其使用。该研究采用网络药理学与代谢组学相结合的方法探讨细辛的肝损伤机制。GEO数据库下载肝损伤相关数据集GSE54257,采用Limma包对数据集GSE54257进行差异表达基因分析。TCMSP、ECTM、TOXNET等数据库筛选细辛有毒成分与靶点基因,与GSE54257差异表达基因相映射,得到细辛肝损伤靶点基因并构建PPI网络。对靶点基因进行GO和KEGG富集分析,结合上游调控miRNA信息绘制“miRNA-靶点基因-信号通路”网络。30只大鼠分为空白组与细辛高、低剂量组,每日给药1次,连续给药28 d后检测肝功能指标和肝脏病理变化。空白组与细辛高剂量组随机取5个肝脏组织样本,采用超高效液相色谱-质谱(UHPLC-MS)技术分析各组样本小分子代谢产物。利用正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)筛选差异代谢物,并对差异代谢物进行富集分析、相关性分析和聚类分析,最后利用MetaboAnalyst平台对差异代谢物进行通路富集分析。经分析发现,细辛中有毒成分有14个,对应靶点基因37个,经与GSE54257中差异表达基因映射得到12个与细辛肝脏毒性相关的基因。动物实验结果显示,细辛可以显著升高大鼠肝功能指标,降低自由基清除酶活性,改变肝脏氧化应激水平,诱发脂质过氧化损伤。非靶向代谢组学分析结果显示,与空白组比较,细辛组大鼠肝脏组织中有9个代谢物上调,16个代谢物下调,这25个代谢物相关性较强,聚类良好。通路富集分析显示,这些差异代谢物与细辛12个肝毒性靶点基因主要参与嘌呤代谢,以及缬氨酸、亮氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸等的生物合成与代谢。该研究证实,细辛致肝损伤作用是多成分、多靶点、多信号通路作用的结果,其机制可能与抑制核苷酸合成,影响蛋白质代谢有关。

关键词：细辛肝损伤网络药理学非靶向代谢组学

细辛化学成分和药理作用的研究进展及其质量标志物的预测分析

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天然产物研究与开发 2023年第10期35卷 1794-1807页

作者：张瑜张红李宁陈娟陕西省中医药研究院西安710003

细辛为马兜铃科植物北细辛Asarum heterotropoides Fr.Schmidt var.mandshuricum(Maxim.)Kitag.、汉城细辛Asarum sieboldii Miq.***.seoulense Nakai或华细辛Asarum sieboldii Miq.的干燥根和根茎,其主要含有挥发油类、木脂素类、黄酮类和多糖类等化学成分。现代药理学和临床研究表明细辛具有镇痛抗炎、抗氧化、抗菌、止咳平喘、抗抑郁、抗癌、降血压等多种药理活性,用于治疗风寒感冒、风湿、多种疼痛、痰饮喘咳等病症。基于对细辛的化学成分及药理作用的归纳总结,结合其质量控制研究现状,从亲缘性、特征性成分、有效性、药动学、化学成分可测性及中药配伍等方面对其质量标志物(quality marker,Q-Marker)进行预测。初步预测出马兜铃酸Ⅳa、甲基丁香酚、黄樟醚、L-细辛脂素、L-芝麻脂素、2-甲氧基-4-乙烯基酚、三甲氧基甲苯、1,8-桉叶素、β-细辛醚、卡枯醇、水鬼蕉宾碱、山柰酚等成分可作为细辛质量标志物的候选化合物,以期为建立质量标准、深入研究及综合利用等提供参考。

关键词：细辛化学成分药理作用质量标志物

细辛篮状菌叶枯病病原鉴定及室内防控药剂筛选

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植物病理学报 2024年第2期54卷 249-258页

作者：刘坤孙文松张天静沈宝宇李晓丽辽宁省经济作物研究所辽阳111000 中国医学科学院药用植物研究所辽阳研究中心辽阳111000

采用组织分离法,对采自辽宁抚顺新宾的细辛叶枯病株进行病原分离和纯化。根据柯赫氏法则,对分离菌株进行致病性测定。通过形态学观察,结合rDNA-ITS序列分析,以及BenA与RPB2多基因位点序列对比分析,对病原菌进行鉴定。结果表明:经回接验... 详细信息

采用组织分离法,对采自辽宁抚顺新宾的细辛叶枯病株进行病原分离和纯化。根据柯赫氏法则,对分离菌株进行致病性测定。通过形态学观察,结合rDNA-ITS序列分析,以及BenA与RPB2多基因位点序列对比分析,对病原菌进行鉴定。结果表明:经回接验证,明确分离所获菌株是细辛叶枯病的致病菌;代表性菌株XXY-2的形态特征以及在OA、MEA、DG18、YES、CYA和CREA等6种培养基上的菌落培养特征与Talaromyces brevis一致;基于ITS-BenA-RPB2多基因序列系统发育分析结果显示,XXY-2与T.brevis的模式菌株DTO 307T和CBS 141833T处于同一分支,自展值为100,表明XXY-2为T.brevis。采用菌丝生长速率法,测定8种杀菌剂对T.brevis生长的抑制效果,其中吡唑醚菌酯和氟啶胺的室内抑菌效果最好,EC50值分别为0.0096和0.0056μg·mL-1。这是T.brevis作为细辛叶枯病病原的首次报道,为后续开展细辛叶枯病综合防治奠定了理论基础。

关键词：细辛叶枯病致病性测定多基因位点分析药剂筛选

细辛篮状菌叶枯病病原鉴定及室内防控药剂筛选

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植物病理学报 2023年

作者：刘坤孙文松张天静沈宝宇李晓丽中国医学科学院药用植物研究所辽阳研究中心辽宁省农科院药用植物研究所辽宁省经济作物研究所

采用组织分离法，对采自辽宁抚顺新宾的细辛叶枯病株进行病原分离和纯化。根据柯赫氏法则，对分离菌株进行致病性测定。通过形态学观察，结合rDNA-ITS序列分析，以及BenA与RPB2多基因位点序列对比分析，对病原菌进行鉴定。结果表明：经... 详细信息

采用组织分离法，对采自辽宁抚顺新宾的细辛叶枯病株进行病原分离和纯化。根据柯赫氏法则，对分离菌株进行致病性测定。通过形态学观察，结合rDNA-ITS序列分析，以及BenA与RPB2多基因位点序列对比分析，对病原菌进行鉴定。结果表明：经回接验证，明确分离所获菌株是细辛叶枯病的致病菌；代表性菌株XXY-2的形态特征以及在OA、MEA、DG18、YES、CYA和CREA等6种培养基上的菌落培养特征与Talaromyces brevis一致；基于ITS-BenA-RPB2多基因序列系统发育分析结果显示，XXY-2与T.brevis的模式菌株DTO 307T和CBS 141833T处于同一分支，自展值为100，表明XXY-2为T.brevis。采用菌丝生长速率法，测定8种杀菌剂对T.brevis生长的抑制效果，其中吡唑醚菌酯和氟啶胺的室内抑菌效果最好，EC50值分别为0.0096和0.0056μg·mL-1。这是T brevis作为细辛叶枯病病原的首次报道，为后续开展细辛叶枯病综合防治奠定了理论基础。

关键词：细辛叶枯病致病性测定多基因位点分析药剂筛选

基于HPLC多指标成分测定及指纹图谱多模式识别方法的北细辛质量分析

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中草药 2022年第1期53卷 238-243页

作者：李妍何文媛王康宇白羽辛高文义贡济宇长春中医药大学药学院吉林长春130117

目的通过HPLC多成分含量测定与指纹图谱的多模式化学识别方法对北细辛Asarumheterotropoidesvar.mandshuricum进行不同产地质量分析研究,为北细辛药材质量评价提供参考。方法收集了4个产区的18批细辛样品,采集HPLC指纹图谱并进行3种有... 详细信息

目的通过HPLC多成分含量测定与指纹图谱的多模式化学识别方法对北细辛Asarumheterotropoidesvar.mandshuricum进行不同产地质量分析研究,为北细辛药材质量评价提供参考。方法收集了4个产区的18批细辛样品,采集HPLC指纹图谱并进行3种有效成分的含量测定,通过聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)分别探讨不同产区北细辛的质量。结果建立了北细辛药材的指纹图谱,确定共有峰17个,指认了3个共有峰。甲基丁香酚、芝麻脂素、细辛脂素的质量分数分别为1.76~32.98、1.03~6.05、1.59~6.91mg/g。CA可将4个产地北细辛药材聚为2类,PCA结果提取了2个主成分,OPLS-DA能有效地将2大产区药材明显地区分开。结论通过北细辛HPLC含量测定与指纹图谱建立的多模式识别法全面评价了北细辛的质量,为北细辛药材质量评价提供依据,可作为北细辛质量控制的有效方法。

关键词：细辛 HPLC 指纹图谱化学模式识别质量评价甲基丁香酚芝麻脂素细辛脂素

细辛三个基原农艺性状、化学成分及转录组学差异分析

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细辛三个基原农艺性状、化学成分及转录组学差异分析

作者：于芸泽中国农业科学院

学位级别：硕士

细辛是一种常用中药,且为多基原药材。《中国药典》收录正品细辛为北细辛(Asarum heterotropoides Fr.Schmidt var.mandshuricum)、汉城细辛(Asarum sieboldii Miq var.seoulense Nakai.)和华细辛(Asarum sieboldii Miq.)。不同基原细辛化学成分及质量存在差异,势必影响中药的稳定性、可控性,进而影响临床疗效。为此,开展三种基原细辛主要农艺性状、化学成分和转录组的差异研究,为细辛基原鉴别及药材的质量控制提供参考。主工研究结果如下:1、对三种基原细辛主要农艺性状进行差异性分析结果表明,叶柄颜色、叶片形状等14个质量性状均存在差异。三种基原细辛的单株叶片数、叶长等8个性状的统计分析结果表明,三种基原细辛叶长等7个农艺性状均存在显著差异。其中,汉城细辛叶长显著大于北细辛与华细辛(p细辛的叶宽、叶柄长大小顺序均为汉城细辛>北细辛>华细辛,且不同基原间存在显著差异(p细辛与华细辛根长显著高于汉城细辛(p细辛的根重、须根粗、须根数由大到小的顺序均为华细辛>北细辛>汉城细辛,且三者之间存在极显著水平(p细辛与华细辛亲缘关系较近,二者与汉城细辛亲缘关系较远。2、利用GC-MS技术并结合多元统计分析方法,对三种不同基原细辛中的挥发性成分进行检测分析,结果从不同基原的细辛样品共鉴定了其中59个挥发性成分。统计分析结果表明,不同基原细辛的挥发油成分之间差异较大,不同产地之间的差异较小,并发现了11个潜在的化学标志物用于区分这三种不同基原的细辛。同时,利用UPLC方法测定了不同基原细辛中细辛脂素和芝麻脂素的含量,结果表明,不同基原细辛样本中两者的含量差异不显著。3、利用转录组测序技术对3种基原的细辛进行测序及分析,共获得113.29 Gb的clean data,组装77896条unigenes。三种细辛差异表达基因的GO功能注释显示,差异基因主要与细胞成分组织或生物发生、细胞成分组织等过程相关,筛选到细辛挥发油物质合成相关的unigene共492条,其中富集到萜类骨架合成的基因80个。MVA和MEP合成途径中的关键限速酶基因Ar HMGR和Ar DXS分别在北细辛和汉城细辛中上调表达,Ar HMGR为不稳定疏水蛋白,Ar DXS是不稳定亲水蛋白,Ar HMGR和Ar DXS的二级结构中均存在大量的α-螺旋和无规则卷曲,Ar HMGR具有两个跨膜位点,而Ar DXS无跨膜结构域。

关键词：细辛农艺性状差异成分转录组

基于古今文献对经典名方中细辛毒性的有效避减探析

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中国实验方剂学杂志 2023年第7期29卷 57-65页

作者：陈志强张意林陈仁寿南京中医药大学中医药文献研究所南京210046 安徽中医药大学第一附属医院合肥230012 江苏省经典名方工程研究中心南京210023

目的:通过研究细辛的相关文献,对影响细辛毒性的关键信息进行梳理,为经典名方中细辛的合理应用提供依据。方法:通过文献计量学的方式,搜集细辛的古今相关文献,分析细辛毒性与药物基原、用药部位、炮制方式、药物剂型、方药配伍、服药方... 详细信息

目的:通过研究细辛的相关文献,对影响细辛毒性的关键信息进行梳理,为经典名方中细辛的合理应用提供依据。方法:通过文献计量学的方式,搜集细辛的古今相关文献,分析细辛毒性与药物基原、用药部位、炮制方式、药物剂型、方药配伍、服药方法及患者体质因素之间的关系。结果:在经典名方的研发过程中,细辛在当归四逆汤、厚朴麻黄汤中的用量分别为9、6 g,煎煮时间应>120 min;细辛在辛夷散、三痹汤、大秦艽汤、清上蠲痛汤种的单次用量分别为0.8、1.2、0.9、1.1 g;当归四逆汤、厚朴麻黄汤、清上蠲痛汤等应选用辽细辛的根茎,辛夷散可选择汉城细辛的根茎。在药物的炮制上,当归四逆汤、厚朴麻黄汤、三痹汤、大秦艽汤四方中的细辛可选用酒制;辛夷散、清上蠲痛汤中的细辛可选用炒制;另外,细辛的毒性与药物的配伍和患者的体质等因素均有着密切的关系。结论:该研究通过梳理有关细辛毒性的文献资料,得出了影响细辛毒性的关键信息,探析了细辛毒性的有效避减方式,为包含细辛的经典名方的合理开发和安全应用提供了更为充分的依据。

关键词：经典名方中药毒性细辛有效避减文献研究