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高等学校化学学报 2020年第12期41卷 2658-2666页

作者：马维绎刘士博陈鹏北京大学元培学院北京100871 北京大学化学与分子工程学院北京100871

细胞-细胞相互作用在多种生理过程中有重要意义,针对这些相互作用的研究是化学与生命科学交叉领域的前沿热点.基于对酶的功能改造、定向进化和精准的时空调控,酶介导的邻近标记方法在分析细胞-细胞相互作用方面具有广泛的应用前景.本文... 详细信息

细胞-细胞相互作用在多种生理过程中有重要意义,针对这些相互作用的研究是化学与生命科学交叉领域的前沿热点.基于对酶的功能改造、定向进化和精准的时空调控,酶介导的邻近标记方法在分析细胞-细胞相互作用方面具有广泛的应用前景.本文重点描述了现有邻近标记方法的原理、效果、优缺点及潜在应用.

关键词：邻近标记细胞-细胞相互作用时空分辨率

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酶介导的邻近细胞标记方法探究细胞间相互作用

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第4期40卷 424-432页

作者：沙昱彤李景超易文浙江大学生命科学学院生物化学研究所肿瘤与干细胞生物学实验室杭州310058

细胞-细胞相互作用(cell-cell interactions,CCIs)可以通过细胞表面蛋白质、聚糖、脂质等介导的细胞间突触形成而发生,以维持机体稳态和调控生理功能。这些CCIs是复杂的,涉及许多不同的细胞表面和细胞内分子的参与。随着基础研究和转化... 详细信息

细胞-细胞相互作用(cell-cell interactions,CCIs)可以通过细胞表面蛋白质、聚糖、脂质等介导的细胞间突触形成而发生,以维持机体稳态和调控生理功能。这些CCIs是复杂的,涉及许多不同的细胞表面和细胞内分子的参与。随着基础研究和转化医学的不断发展,如何准确识别细胞间相互作用并对其进行表征和定量,引起了广泛关注。近年来,研究CCIs的技术手段不断推陈出新,而邻近标记是一种十分有前景的研究细胞间相互作用的化学生物学方法。目前,主要有两种类型的标记策略。一种是依赖基因工程操作,在“诱饵”细胞表面表达外源酶,通过其与相邻细胞上的受体底物的直接结合,以便发生细胞间邻近标记。另一种是使用酶或小分子催化剂(例如光催化剂),通过基因工程重组表达或借助化学(化学酶)方法将它们偶联在“诱饵”细胞表面,在适当的刺激或激活后,靶向递送感兴趣的标记分子,实现邻近标记。其中,酶介导的邻近细胞标记方法在检测和表征CCIs上具有重要的应用价值。该综述将标记过程中涉及有酶参与的方法定义为酶介导的邻近细胞标记方法,这种方法的一个明显优势是,由于酶和受体底物之间直接的物理接触或酶催化产生高反应活性标记分子而实现小的标记半径范围。该综述旨在归纳与总结近年来开发的酶介导的邻近细胞标记方法的原理、优缺点及现有应用。

关键词：细胞-细胞相互作用酶介导的邻近细胞标记方法邻近标记方法

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微流控芯片在细胞分化和细胞间相互作用研究中的应用

微流控芯片在细胞分化和细胞间相互作用研究中的应用

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作者：庄琪琛清华大学

学位级别：硕士

微流控芯片技术因其具有低样品消耗、快速检测分析及高通量等优势,尤其是具有操纵微小体积样品的能力而在与细胞相关的研究领域展现出巨大的应用潜力。本研究论文以微流控技术为基础,结合荧光显微成像及质谱等分析检测技术,开展了一些... 详细信息

微流控芯片技术因其具有低样品消耗、快速检测分析及高通量等优势,尤其是具有操纵微小体积样品的能力而在与细胞相关的研究领域展现出巨大的应用潜力。本研究论文以微流控技术为基础,结合荧光显微成像及质谱等分析检测技术,开展了一些与细胞分化和细胞-细胞间相互作用相关的研究。本论文首先回顾了微流控技术及微流控芯片与质谱联用技术在细胞分析领域应用的研究进展,发现微流控技术在细胞分化和细胞间相互作用的研究中有着良好的应用前景。随后,我们使用标准软光刻模具复制成型技术、固化剂差量法和聚二甲基硅氧烷(PDMS)胶水法开发出一种集成聚碳酸酯(PC)多孔膜的微流控芯片装置。我们优化了集成PC多孔膜芯片装置的制作条件,考察了该芯片的跨膜传质能力和与其他芯片装置集成的能力。该芯片装置中使用的PC多孔膜几乎允许所有生化因子的跨膜扩散,这不仅为跨膜细胞培养提供了保证,而且对于模拟细胞所处的微环境也是非常必要的,因为细胞不断从微环境中接受可溶性信号分子的调节。此外,我们将mES细胞培养于上层通道的PC多孔膜上,而将下层通道与由精密注射泵推动的装有培养基的注射器相连,实现了芯片上小鼠胚胎干(m ES)细胞低剪切力条件下的连续流动培养和诱导分化。最后,我们使用集成PC多孔膜的微流控芯片结合高灵敏度的质谱实现了芯片上细胞共培养和细胞代谢产物分析,为理解细胞间相互作用提供了分子层面的化学视野。在集成多孔膜的芯片上,我们模拟了肾上腺在交感神经的作用下分泌肾上腺素的生理过程,使用分化的PC12细胞模拟交感神经,293细胞模拟肾上腺。我们在芯片上优化了PC12细胞的分化条件,实现了分化的PC12细胞和293细胞的共培养并利用纳升-电喷雾-质谱(Nano-ESI-MS)检测到了293细胞分泌的肾上腺素分子。与同类工作相比,本工作在进行细胞代谢产物的质谱分析前无需进行复杂的芯片上样品前处理,极大地减少了样品消耗和分析时间。该芯片装置在疾病监控和药物研发等领域研究重要调控通路中已知和未知的信号因子时有着良好的应用前景。

关键词：微流控芯片多孔膜细胞分化细胞-细胞相互作用质谱

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多层微流控芯片串联质谱用于细胞间相互作用的研究

多层微流控芯片串联质谱用于细胞间相互作用的研究

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中国化学会第29届学术年会

作者：庄琪琛王诗琦张洁林金明微量分析测试方法与仪器研制北京市重点实验室清华大学化学系

细胞-细胞间的相互作用对于多细胞生命体来说是至关重要的,并且在多细胞生命体内细胞-细胞间的相互作用主要是通过直接接触或者可溶性因子的交换实现的。近年来,微流控芯片技术和质谱技术联用已经成为在体外研究细胞-细胞间相互作用的... 详细信息

细胞-细胞间的相互作用对于多细胞生命体来说是至关重要的,并且在多细胞生命体内细胞-细胞间的相互作用主要是通过直接接触或者可溶性因子的交换实现的。近年来,微流控芯片技术和质谱技术联用已经成为在体外研究细胞-细胞间相互作用的有力工具。在此,我们报道一种通过检测细胞代谢分子在体外研究细胞-细胞相互作用的简单快捷的方法。首先,我们开发了一种基于多孔膜的多层微流控芯片装置,该装置不仅能实现细胞-细胞间的共培养而且能够通过与质谱联用实现代谢物的检测。该多层微流控芯片平台建立以后,分化后的PC12细胞和293细胞分别培养于芯片的下层和上层通道中,实现了共培养,接着刺激细胞产生代谢产物并在线前处理后进行质谱检测。除此之外,我们还优化了诱导PC12细胞分化时培养基中胎牛血清（FBS）和鼠神经生长因子（mouse NGF）的浓度并进行了MAP-2免疫染色证明PC12的分化。

关键词：微流控质谱细胞-细胞相互作用细胞共培养

来源： cnki会议评论

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造血微环境通过细胞与细胞间黏附作用影响造血干细胞分子通路的研究进展

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医学综述 2016年第1期22卷 27-30页

作者：师迎旭韩艳秋杜华内蒙古医科大学附属医院检验科呼和浩特010050 内蒙古医科大学基础医学院病理教研室呼和浩特010050

造血干细胞(HSCs)在骨髓腔内需要特定的细胞外环境来维持其相对稳态,而HSC定位的区域被称为龛。造血微环境是一类特化的结构,由多种细胞构成。组成龛的细胞通过释放调控信号使HSC驻留于龛内并受其调控。造血微环境主要通过细胞-细胞、细... 详细信息

造血干细胞(HSCs)在骨髓腔内需要特定的细胞外环境来维持其相对稳态,而HSC定位的区域被称为龛。造血微环境是一类特化的结构,由多种细胞构成。组成龛的细胞通过释放调控信号使HSC驻留于龛内并受其调控。造血微环境主要通过细胞-细胞、细胞-可溶性因子、细胞-细胞外基质这三条途径对HSCs进行调控。其中细胞-细胞间的相互作用对维持HSC稳态具有重要作用。

关键词：干细胞龛造血干细胞细胞-细胞相互作用

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